El objetivo es investigar el efecto y mecanismo del polvo Taishan Panshi (TSPSP) para inhibir el daño por estrés oxidativo en células de trofoblasto humano (HTR-8/SVneo) y entender el mecanismo terapéutico de TSPSP en abortos espontáneos (SA). Se utilizó la base de datos clínica (GEO) para analizar las diferencias génicas en SA y su asociación con el estrés oxidativo. Se empleó farmacología de redes para filtrar los componentes activos de TSPSP y construir una red "medicina tradicional china-componente-objetivo-enfermedad" para predecir el mecanismo de acción de TSPSP. En experimentos in vitro, las células HTR-8/SVneo se dividieron en grupo blanco, grupo modelo, grupos con suero conteniendo TSPSP al 2.5%, 5%, 10%, y grupo con inhibidor del factor nuclear E2 relacionado con el factor 2 (Nrf2) (ML385, 30 μmol·L^-1). Excepto el grupo blanco, los demás recibieron estímulo con 150 μmol·L^-1 H₂O₂ por 3 h para modelar el daño por estrés oxidativo celular. Tras confirmar el modelo, el grupo blanco y modelo recibieron suero blanco al 10%, y los grupos con suero TSPSP recibieron concentraciones correspondientes. Al grupo inhibidor de Nrf2 se le añadió ML385 al 30 μmol·L^-1 sobre el 10% de suero TSPSP. Las células se cultivaron 24 h y se recogieron para análisis posteriores. La viabilidad celular se evaluó por CCK-8; la migración celular por ensayo de rasguño; los contenidos de malondialdehído (MDA), Fe²⁺ y glutatión (GSH) por ELISA; los niveles de ROS por sonda fluorescente (DCF-DA); la expresión de proteínas KEAP1, Nrf2, FoxO3 y ARNm por inmunofluorescencia (IF) y PCR en tiempo real; las proteínas KEAP1, Nrf2, FoxO3, GPX4 y SOD por Western blot. Los resultados de las bases de GEO (GSE76862 y GSE22490) mostraron que los genes KEAP1, Nrf2 y FoxO3 se relacionan con la enfermedad. Se identificaron 9 vías de señalización significativamente diferenciadas (P<0.05), de las cuales 3 incluyen los genes Nrf2 y FoxO3. Se obtuvieron 246 objetivos de los componentes activos de TSPSP y 2804 objetivos relacionados con SA; el cruce dio 154 objetivos potenciales. El análisis topológico mostró valores elevados para KEAP1, Nrf2, etc. Los análisis GO y KEGG indicaron que los objetivos comunes están involucrados principalmente en la respuesta al estrés oxidativo y las vías FoxO y MAPK. En experimentos in vitro, la viabilidad celular del grupo modelo fue significativamente menor que la del grupo blanco (P<0.01); los grupos con suero TSPSP mostraron mayor viabilidad (P<0.01); el grupo ML385 redujo la viabilidad a aproximadamente 70% comparado con el TSPSP al 10% (P<0.01). En el grupo modelo, MDA, Fe²⁺ y ROS aumentaron significativamente, mientras que GSH disminuyó (P<0.01); la migración celular disminuyó; las expresiones de proteína y ARNm KEAP1 y FoxO3 aumentaron (P<0.01); las de Nrf2, GPX4 y SOD disminuyeron (P<0.01). Comparado con el modelo, los grupos con TSPSP redujeron significativamente MDA, Fe²⁺ y ROS, aumentaron GSH y la migración; KEAP1 y FoxO3 disminuyeron significativamente y Nrf2, GPX4 y SOD aumentaron (P<0.05, P<0.01). El grupo ML385 revirtió estas tendencias (P<0.05, P<0.01). Conclusión: TSPSP puede inhibir el daño por estrés oxidativo en células de trofoblasto inducido por H₂O₂, posiblemente mediante activación de la vía de señalización KEAP1/Nrf2/FoxO3.

Polvo Taishan Panshi; aborto espontáneo; proteína Kelch-like ECH asociada 1/factor nuclear E2 relacionado con factor 2/proteína FoxO3 (KEAP1/Nrf2/FoxO3); trofoblasto humano; daño por estrés oxidativo