El objetivo es explorar el efecto de la fórmula para eliminar estasis y desintoxicar sobre las células endoteliales microvasculares cerebrales (BMECs) después de una lesión por privación de glucosa y oxígeno (OGD) y su mecanismo de intervención. Métodos: se utilizó el método CCK-8 para determinar el tiempo de OGD, seleccionando la concentración efectiva del suero que contiene la fórmula para eliminar estasis; las células se dividieron aleatoriamente en grupo con medio de cultivo con suero en blanco (KBXQ), grupo modelo (OGD), grupo HYXQ (OGD + suero que contiene la fórmula), grupo 3-metiladenina (3-MA) (OGD + 3-MA). Se observó la morfología celular con microscopio invertido; se observó el número de autofagosomas y autolisosomas dentro de las células con microscopio electrónico; se detectó la tasa de supervivencia celular con CCK-8; la tasa de apoptosis mediante TUNEL in situ; la expresión de proteínas LC3 y ocludina mediante inmunofluorescencia; se midió la permeabilidad del monocapa celular. Las células se dividieron aleatoriamente en grupos KBXQ, modelo (OGD), HYXQ, grupo inhibidor de PI3K (LY294002) (OGD + LY294002), grupo HYXQ + LY294002 (OGD + suero que contiene la fórmula + LY294002). Los niveles de expresión de moléculas clave de autofagia Atg6 homólogo de levadura 1 (Beclin1), LC3Ⅱ/LC3Ⅰ, proteína adaptadora selectiva (p62), ocludina, PI3K fosforilada (p-PI3K), PI3K, proteína quinasa B fosforilada (p-Akt), Akt, proteína diana de rapamicina en mamíferos fosforilada (p-mTOR), y proteína mTOR se detectaron mediante Western blot. Resultados: se seleccionó OGD de 6 h como la condición óptima del modelo, y el 5% como la mejor concentración volumétrica del suero que contiene la fórmula. En comparación con el grupo KBXQ, el grupo modelo mostró daños celulares evidentes bajo microscopio invertido, aumento significativo en el número de autofagosomas y autolisosomas bajo microscopio electrónico, reducción significativa en la tasa de supervivencia celular (P<0.01), aumento significativo en la tasa de apoptosis (P<0.01), aumento significativo en la intensidad de fluorescencia de la proteína LC3 (P<0.01), disminución significativa en la intensidad de fluorescencia de la proteína ocludina (P<0.01), y aumento significativo en la permeabilidad de la monocapa celular (P<0.01); en comparación con el grupo modelo, los grupos HYXQ y 3-MA mejoraron notablemente el daño celular, con reducción significativa en el número de autofagosomas y autolisosomas, aumento significativo en la tasa de supervivencia (P<0.01), disminución significativa en la tasa de apoptosis (P<0.01), disminución significativa en la intensidad de fluorescencia de LC3 (P<0.01), aumento significativo en la intensidad de fluorescencia de ocludina (P<0.01), y reducción en la permeabilidad de la monocapa (P<0.05). Los resultados de Western blot mostraron que en comparación con KBXQ, el grupo modelo tuvo aumento significativo de Beclin1 y LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.01), y disminución significativa de p62, ocludina, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt y p-mTOR/mTOR (P<0.01); en comparación con el modelo, HYXQ tuvo disminución significativa en Beclin1 y LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.01) y aumento significativo en p62, ocludina, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt y p-mTOR/mTOR (P<0.01); el grupo LY294002 mostró aumento significativo en Beclin1 y LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.05, P<0.01) y disminución significativa en p62, ocludina, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt y p-mTOR/mTOR (P<0.01); en comparación con LY294002, el grupo HYXQ+LY294002 mostró disminución significativa en Beclin1 y LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.01) y aumento significativo en p62, ocludina, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt y p-mTOR/mTOR (P<0.01). Conclusión: La fórmula para eliminar estasis y desintoxicar protege a las BMECs lesionadas por OGD probablemente activando la vía relacionada con la autofagia PI3K/Akt/mTOR, suprimiendo la sobreexpresión de autofagia, y protegiendo la proteína ocludina y la función de la barrera endotelial.

células endoteliales microvasculares cerebrales; autofagia; fórmula para eliminar estasis; fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K); proteína quinasa B (Akt)