Análisis del mecanismo de acción de las cápsulas nutricionales de riñón y médula modificadas en la regulación de miR-15b/Wnt y la estimulación de la diferenciación y maduración de OLN-93

LIU Sisi ,  

LI Chunyu ,  

LI Chen ,  

LI Haixin ,  

WANG Lei ,  

摘要

El objetivo del estudio es explorar el papel de las cápsulas nutricionales de riñón y médula en la regulación de la vía miR-15b/Wnt y la estimulación de la diferenciación y maduración de las células gliales OLN-93, con el análisis de los efectos y el mecanismo molecular. Métodos: Las células OLN-93 se dividieron en dos grupos - muestras y control (NC), grupo BMSC-exos y grupo BSYS-BMSC-exos, grupo BSYS-BMSC+LV-inhibidor miR-15b-5p-exos y grupo BSYS-BMSC+LV-NC-exos. Los exos se marcaron con la proteína DiR, y luego se evaluó su interacción con las células OLN-93 ; utilizando la prueba CCK-8, se determinó una dosis efectiva de las cápsulas nutricionales de riñón y médula en las células OLN-93. Las culturas de BMSC fueron infectadas con vectores virales para la supresión estable de la expresión de miR-15b-5p, y se recogieron sus exos. Se utilizó PCR en tiempo real para monitorear la expresión de miR-15b-5p y verificar la eficacia de la infección viral. Se utilizó un análisis de inmunofluorescencia (ICC) y un Western blot para evaluar la expresión de CNPase y PLP en las células OLN-93, así como un Western blot para estudiar la expresión de Wnt3a en las células OLN-93. PCR en tiempo real y Western blot se utilizaron para determinar los niveles de expresión en la vía Wnt/β-catenina y de la enzima glucógeno sintasa quinasa-3 β (GSK-3β), β-catenina y TCF4/TCF7L2 en las células OLN-93. Resultados: Los exos marcados con DiR mostraron una alta capacidad de absorción por las células OLN-93. Los resultados de la prueba CCK-8 mostraron que la concentración de 20 mg/ml de las cápsulas nutricionales de riñón y médula tuvo el mejor efecto sobre la actividad de las células OLN-93 (

关键词

Esclerosis múltiple; cápsulas nutricionales de riñón y médula; exos de BMSC; células gliales OLN-93; microARN (microARN); vía miR-15b/Wnt

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