Regulación combinada de la vía PDK1/Akt por Bu Zhong Yi Qi y cisplatino para inhibir la glucólisis y afectar la proliferación de células de adenocarcinoma pulmonar

LI He ,  

BAI Sijia ,  

LIU Wenjun ,  

WANG Jianguang ,  

LYU Jialu ,  

WANG Chun ,  

摘要

El objetivo fue investigar el efecto de la combinación de la decocción Bu Zhong Yi Qi con cisplatino en la regulación de la vía de señalización de la piruvato deshidrogenasa quinasa 1 (PDK1) / proteína quinasa B (Akt) y su impacto en la glucólisis y la proliferación de células del adenocarcinoma pulmonar humano (A549). Se utilizaron técnicas de secuenciación del transcriptoma (RNA-seq) para comparar la expresión génica relacionada con el metabolismo de la glucosa entre células A549 y células resistentes a cisplatino A549/DDP; se realizó interferencia de PDK1 mediante siRNA; la eficacia fue evaluada con Western blot y PCR en tiempo real; la proliferación celular y actividad se midieron con el método CCK-8 bajo diferentes tratamientos; se determinó la concentración inhibitoria al 20% (IC20); experimentos de formación de colonias; detección de lactato y ATP; medición del potencial de membrana mitocondrial con la sonda fluorescente JC-1; análisis proteico de PDK1, p-Akt, Akt, isoforma PKM2, GLUT1, PDH, LDHA por Western blot; inmunofluorescencia confocal para PDK1 y p-Akt. Los resultados mostraron alta expresión de PDK1 en células A549 y A549/DDP, eficiente silenciamiento, disminución de proliferación y alteraciones metabólicas y mitocondriales bajo tratamientos combinados. Conclusión: La combinación de Bu Zhong Yi Qi con cisplatino puede inhibir la proliferación de células de adenocarcinoma pulmonar regulando la glucólisis vía la vía PDK1/Akt.

关键词

Bu Zhong Yi Qi; cisplatino; glucólisis; piruvato deshidrogenasa quinasa 1 (PDK1) / proteína quinasa B (Akt); ARN pequeño interferente (siRNA)

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