Construcción de liposomas multifuncionales con saponina D de Bupleurum y evaluación de su eficacia anticancerígena hepática y selectividad tumoral

YU Kun ,  

YANG Guochun ,  

JIANG Yaliang ,  

XIAO Yunting ,  

WANG Congxian ,  

SUN Qionge ,  

LI Ziyue ,  

SHANG Yikun ,  

MAO Yu ,  

CHENG Xin ,  

摘要

El objetivo fue sustituir el colesterol (Chol) tradicional en liposomas por saponina D de Bupleurum (SSD) y modificar con Poloxámero 407 (P407) para la administración conjunta de curcumina (Cur), construyendo un sistema de administración liposomal multifuncional, y evaluar su selectividad tumoral in vivo y efecto contra tumores sólidos subcutáneos en ratones. Se utilizaron la tasa de encapsulación y el valor absoluto del potencial zeta como indicadores de evaluación; se optimizó la formulación y proceso del liposoma mediante diseño unifactorial y ortogonal combinado con el método de ponderación por entropía de la información, y se caracterizaron los liposomas obtenidos mediante el proceso óptimo. Se estableció un modelo de tumor sólido subcutáneo en ratones mediante la inyección subcutánea de células H22 de carcinoma hepático en el dorso de la extremidad anterior derecha. Según el proceso optimizado, se prepararon liposomas tradicionales con DiR (P407-DiR-Chol-LPs, PDCL) y liposomas nuevos con SSD (P407-DiR-SSD-LPs, PDSL), administrados por inyección intravenosa en la cola. Se utilizó la tecnología de imagen in vivo en animales pequeños para estudiar el efecto del SSD sobre la selectividad tumoral de los liposomas. Los ratones se dividieron aleatoriamente en grupos en blanco, modelo, doxorrubicina (DOX) libre (2 mg·kg-1), Cur libre (8 mg·kg-1), SSD libre (10 mg·kg-1), grupo P407-Cur-Chol-LPs (PCCL), grupo P407-SSD-LPs (PSL) y grupo P407-Cur-SSD-LPs (PCSL), con administración por inyección intraperitoneal cada dos días, durante 7 dosis, para estudiar el efecto anticancerígeno hepático y la biocompatibilidad de PCSL. Se monitoreó el peso corporal de los ratones y se calculó la tasa de cambio del peso, el índice de órganos, el volumen y peso del tumor, así como la tasa relativa de proliferación tumoral (T/C) y la tasa de inhibición del crecimiento tumoral (TGI). Se realizaron análisis histopatológicos del hígado, riñones y tejido tumoral mediante tinción con hematoxilina-eosina (HE), y se detectaron los contenidos de aminotransferasa aspártica (AST), alanina aminotransferasa (ALT), nitrógeno ureico en sangre (BUN) y creatinina (Crea) en suero con un analizador bioquímico totalmente automático. Los resultados del experimento ortogonal mostraron que las proporciones óptimas de Cur, SSD, P407 y fosfolípidos de soja (SPC) eran 1:25, 1:20 y 1:4 respectivamente. El PCSL optimizado mostró una estructura casi esférica, con tamaño de partícula de 179,15 nm, potencial zeta de -47,25 mV, tasa de encapsulación del 96,40 %, características de liberación in vitro compatibles con un modelo cinético de primer orden, y buena estabilidad de almacenamiento y compatibilidad sanguínea. El sistema IVIS y el análisis cuantitativo de fluorescencia indicaron que la señal fluorescente en el tejido tumoral y la relación de intensidad fluorescente tumor/órgano en el grupo PDSL fueron significativamente mayores que en el grupo PDCL (P<0,05, P<0,01). Entre los distintos grupos tratados, el grupo PCSL mostró un efecto terapéutico significativamente mejor que los grupos libres Cur, libres SSD, PCCL y PSL, con TGI >40 % y T/C <60 %, demostrando un claro efecto anticancerígeno hepático (P<0,05, P<0,01). El análisis histopatológico y las pruebas bioquímicas séricas mostraron que el grupo PCSL causó poco daño hepático y renal y mejoró notablemente la función hepática y renal. Conclusión: sustituir Chol por SSD para preparar un sistema de administración de medicamentos multifuncional, donde SSD no solo estabiliza los liposomas sino que también produce una excelente eficacia anticancerígena hepática, logrando un efecto de “medicamento y auxiliar en uno”, la entrega conjunta con Cur se puede usar para tratar tumores sólidos subcutáneos de hígado, proporcionando nuevas ideas y métodos técnicos para la investigación de la teoría tradicional china de "guía y mensajero" en el tratamiento del cáncer de hígado.

关键词

saponina D de Bupleurum; liposomas multifuncionales; poloxámero 407; curcumina; tumores sólidos subcutáneos; imagen in vivo en animales pequeños

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