Construcción de liposomas multifuncionales de saponina de Bupleurum D y evaluación de su eficacia antitumoral hepática y especificidad

YU Kun ,  

YANG Guochun ,  

JIANG Yaliang ,  

XIAO Yunting ,  

WANG Congxian ,  

SUN Qionge ,  

LI Ziyue ,  

SHANG Yikun ,  

MAO Yu ,  

CHENG Xin ,  

摘要

El objetivo es reemplazar el colesterol (Chol) tradicional en liposomas con saponina de Bupleurum D (SSD), modificado con Poloxámero 407 (P407), para la entrega combinada de curcumina (Cur), construyendo un sistema de administración de liposomas multifuncional y evaluando su selectividad tumoral in vivo y efecto anticancerígeno en tumores sólidos subcutáneos en ratones. Se utilizaron la tasa de encapsulación y el valor absoluto del potencial zeta como indicadores de evaluación, optimizando la fórmula del liposoma mediante diseño de un solo factor, diseño ortogonal y método de ponderación de entropía, y se caracterizaron los liposomas preparados con el proceso óptimo. Se hizo un modelo de tumor sólido subcutáneo en ratones inyectando células de carcinoma hepático H22 bajo la piel del dorso de la pata delantera derecha. Se prepararon liposomas tradicionales con colesterol cargados con DiR (P407-DiR-Chol-LPs, PDCL) y liposomas SSD nuevos (P407-DiR-SSD-LPs, PDSL) según la fórmula optimizada, se inyectaron por vía intravenosa en la cola, y se utilizó imagenología in vivo para estudiar el efecto de SSD en la selectividad tumoral de los liposomas. Los ratones se asignaron aleatoriamente a grupos en blanco, modelo, doxorrubicina libre (DOX) (2 mg·kg-1), Cur libre (8 mg·kg-1), SSD libre (10 mg·kg-1), P407-Cur-Chol-LPs (PCCL), P407-SSD-LPs (PSL) y P407-Cur-SSD-LPs (PCSL), administrando por vía intraperitoneal cada dos días, 7 veces en total, evaluando el efecto anticancerígeno hepático y la biocompatibilidad de PCSL. Se monitorizó el peso corporal y el índice de cambio de peso, el índice de órganos, se midió el volumen y la masa del tumor, y se calcularon las tasas relativas de proliferación tumoral (T/C) e inhibición del crecimiento tumoral (TGI). El análisis histopatológico de hígado, riñón y tejido tumoral se realizó con tinción de hematoxilina-eosina (HE), y se analizaron los niveles de aspartato aminotransferasa (AST), alanina aminotransferasa (ALT), nitrógeno ureico en sangre (BUN) y creatinina (Crea) en suero mediante un analizador bioquímico automatizado completo. Los resultados del diseño ortogonal mostraron que las proporciones óptimas de Cur, SSD y P407 a fosfatidilcolina de soja (SPC) fueron 1:25, 1:20 y 1:4 respectivamente. El PCSL optimizado mostró estructura esférica, tamaño de partícula de 179.15 nm, potencial zeta de -47.25 mV, tasa de encapsulación del 96.40 %, patrón de liberación in vitro conforme a un modelo cinético de primer orden, con buena estabilidad de almacenamiento y excelente biocompatibilidad sanguínea. La imagen IVIS y el análisis cuantitativo de fluorescencia indicaron que la señal fluorescente en tejido tumoral y la relación intensidad fluorescente tumor/órganos en el grupo PDSL fueron significativamente mayores que en el grupo PDCL (P<0.05, P<0.01). Entre los distintos grupos de tratamiento, el grupo PCSL mostró un efecto terapéutico significativamente mejor que los grupos Cur libre, SSD libre, PCCL y PSL, con TGI >40% y T/C <60%, evidenciando un claro efecto anticancerígeno hepático (P<0.05, P<0.01). El análisis histopatológico y los resultados bioquímicos séricos indicaron que el grupo PCSL causó un daño menor en hígado y riñón, mejorando significativamente sus funciones. Conclusión: reemplazar Chol con SSD para preparar un sistema de entrega de fármacos multifuncional no solo estabiliza los liposomas, sino que produce una excelente eficacia anticancerígena hepática, logrando un efecto de "medicamento y adyuvante en uno". La entrega combinada de Cur puede usarse para el tratamiento de tumores sólidos subcutáneos de hígado, proporcionando nuevas ideas y herramientas técnicas para la investigación del cáncer hepático y la teoría de la medicina tradicional china "引经报使".

关键词

saponina de Bupleurum D; liposomas multifuncionales; Poloxámero 407; curcumina; tumor sólido subcutáneo; imagenologia in vivo en pequeños animales

阅读全文