Estudio del mecanismo de acción de Xuefu Zhuyu Tang en modelo de rata con estasis sanguínea por enfermedad coronaria basado en la regulación de la función endotelial mediante la vía de señalización SIRT3

YAN Qing ,  

YU Yonghong ,  

TIAN Peng ,  

SU Chang ,  

LIANG Hao ,  

YANG Yang ,  

PENG Qinghua ,  

ZHANG Qiuyan ,  

摘要

Objetivo Este estudio tiene como objetivo explorar el mecanismo del papel de la desacetilasa mitocondrial 3 (SIRT3) en la reparación de la función miocárdica y endotelial en ratas modelo de enfermedad coronaria con síndrome de estasis sanguínea, así como el efecto de la intervención con la fórmula Xuefu Zhuyu Tang. Métodos Noventa ratas macho SD de nivel SPF (16 murieron después de la modelación, 74 sobrevivieron) fueron asignadas aleatoriamente en grupo normal (10), grupo sham (pasar hilo sin ligadura, 10), grupo modelo (10), grupo diltiazem (16 mg/kg, 11) y grupos de dosis baja, media y alta de Xuefu Zhuyu Tang (3.51, 7.02, 14.04 g/kg respectivamente, 11 cada uno). El modelo de estasis sanguínea de enfermedad coronaria fue inducido mediante ligadura de la arteria coronaria descendente anterior izquierda, con intervención continua durante 7 días postoperatorios. Se observaron características macroscópicas, se evaluaron ECG, ecocardiografía, hemorheología entre otros indicadores; se examinó la morfología patológica del tejido miocárdico con tinción HE; se midió el contenido de óxido nítrico (NO) en suero mediante método colorimétrico; se evaluaron contenidos de óxido nítrico sintasa inducible (iNOS), óxido nítrico sintasa endotelial (eNOS) y péptido constrictor endotelial-1 (ET-1) por ELISA; se detectaron niveles proteicos de HIF-1α y PFKFB3 en tejido miocárdico por inmunohistoquímica; se evaluaron expresiones proteicas y de ARNm de SIRT3, PPARγ, β-catenina mediante Western blot y PCR en tiempo real. Resultados En comparación con el grupo normal, el grupo modelo mostró peor estado general, signos evidentes de estasis sanguínea; la tinción HE reveló destrucción estructural notable, desorden en la organización celular cardíaca, rotura y degeneración de fibras musculares, picnosis o desaparición nuclear, edema intersticial con infiltración neutrofílica abundante; ECG mostró elevación persistente del segmento ST, ondas Q anormales, reducción de amplitud R, intervalos R-R irregulares, ondas T en punta o invertidas; la fracción de eyección ventricular izquierda (LVEF) y la fracción de acortamiento (LVFS) disminuyeron significativamente (P<0.01), mientras que diámetros telesistólico y telediastólico (LVIDd y LVIDs) aumentaron significativamente (P<0.01); la viscosidad sanguínea en niveles bajo, medio y alto, viscosidad plasmática y fibrinógeno aumentaron significativamente (P<0.01); niveles séricos de NO y eNOS disminuyeron significativamente (P<0.01), iNOS y ET-1 aumentaron significativamente (P<0.01); la expresión proteica de HIF-1α y PFKFB3 en miocardio aumentó significativamente (P<0.01); proteínas y ARNm de SIRT3 y PPARγ disminuyeron significativamente (P<0.01), mientras que β-catenina aumentó significativamente (P<0.01). En comparación con el grupo modelo, los grupos con dosis media y alta de Xuefu Zhuyu Tang mostraron mejoría en condiciones generales y resultados ECG; se mejoró la morfología de células cardiacas y disminuyó la infiltración inflamatoria según HE; LVIDd disminuyó significativamente (P<0.01), viscosidad sanguínea a bajo corte disminuyó significativamente (P<0.01); eNOS sérico aumentó significativamente (P<0.01), iNOS disminuyó significativamente (P<0.01); expresión proteica de PFKFB3 aumentó significativamente (P<0.01); proteína y ARNm de SIRT3 y PPARγ aumentaron significativamente (P<0.01); expresión proteica de β-catenina disminuyó significativamente (P<0.01). Las dosis baja, media y alta aumentaron significativamente LVEF y LVFS (P<0.05, P<0.01); LVIDs disminuyó significativamente (P<0.01); la viscosidad sanguínea a medio y alto corte, viscosidad plasmática y fibrinógeno disminuyeron significativamente (P<0.01); NO aumentó significativamente (P<0.01); ET-1 disminuyó significativamente (P<0.01); expresión proteica de HIF-1α aumentó significativamente (P<0.05, P<0.01); ARNm de β-catenina disminuyó significativamente (P<0.01). Conclusión Xuefu Zhuyu Tang podría activar la vía de señalización SIRT3, regulando sinérgicamente la expresión de proteínas clave HIF-1α, PFKFB3, PPARγ, β-catenina desde aspectos de homeostasis metabólica, estabilidad de conexiones celulares y coordinación vasomotora para regular la función endotelial, promoviendo la reparación y mejora funcional del miocardio en ratas con estasis sanguínea por enfermedad coronaria.

关键词

Enfermedad coronaria; Estasis sanguínea; Xuefu Zhuyu Tang; Desacetilasa mitocondrial 3 (SIRT3); Función endotelial

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