Mecanismo de acción antifibrogénico de la decocción Yinqi Sanhuang Jiedu a través de la inhibición de las trampas extracelulares de neutrófilos

LI Yanbo ,  

LEI Chao ,  

WU Qingjuan ,  

LYU Wenliang ,  

摘要

El objetivo es verificar el efecto terapéutico de la decocción Yinqi Sanhuang Jiedu (YQSH) en un modelo murino de fibrosis hepática inducida por tetracloruro de carbono (CCl₄), y explorar si su acción está relacionada con la inhibición de la infiltración de neutrófilos y la formación de trampas extracelulares de neutrófilos (NETs). Método: 36 ratones C57BL/6J se dividieron aleatoriamente en grupos normal, modelo, grupo de medicamento positivo silimarina (SF) (55 mg·kg-1·d-1), y grupos YQSH de dosis baja (YQSH-L), media (YQSH-M) y alta (YQSH-H) (8.325, 16.65, 33.3 g·kg-1·d-1), con 6 ratones en cada grupo. Excepto el grupo normal, los demás recibieron inyecciones intraperitoneales de CCl₄ para inducir fibrosis hepática. Tras el establecimiento exitoso del modelo, los grupos tratados recibieron la medicación correspondiente por vía oral durante 8 semanas. Se observaron los cambios patológicos del tejido hepático mediante tinciones hematoxilina-eosina (HE), rojo de Sirio y Masson. Se realizó una evaluación de la elasticidad hepática utilizando un sistema ecográfico Doppler color. Se detectó la expresión y niveles de ARNm de las quimiocinas C-X-C ligando 1 (CXCL1), ligando 2 (CXCL2) y ligando 5 (CXCL5) mediante inmunohistoquímica y PCR en tiempo real. El nivel de neutrófilos se determinó mediante citometría de flujo. La expresión de proteínas positivas de elastasa neutrofílica (NE) y mieloperoxidasa (MPO) se observó mediante inmunofluorescencia (IF). Los niveles de MPO, NE e histona H3 citrulinada (CitH3) se midieron mediante ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Resultados: en comparación con el grupo normal, el grupo modelo mostró una infiltración celular inflamatoria notable y depósito de colágeno en el hígado, aumento significativo en la elasticidad hepática, expresión de CXCL1, CXCL2, CXCL5, nivel de neutrófilos, y niveles elevados de MPO, NE y CitH3 (P<0.05, P<0.01). En comparación con el grupo modelo, el tratamiento con YQSH redujo la infiltración de células inflamatorias y el depósito de colágeno en el tejido hepático, disminuyó la elasticidad hepática (P<0.01), redujo la expresión proteica de CXCL1, CXCL2 y CXCL5 (P<0.01) y sus niveles de ARNm (P<0.05, P<0.01), disminuyó el nivel de neutrófilos (P<0.01), redujo significativamente la expresión positiva de las proteínas MPO y NE (P<0.05, P<0.01), y disminuyó los niveles de MPO, NE y CitH3 (P<0.05, P<0.01). Conclusión: el efecto antifibrogénico de YQSH podría estar relacionado con la inhibición de los niveles de quimiocinas (CXCL1, CXCL2, CXCL5), la reducción de la infiltración de neutrófilos y la inhibición de la formación de NETs.

关键词

fibrosis hepática;decocción Yinqi Sanhuang Jiedu;neutrófilos;trampas extracelulares de neutrófilos;quimiocinas

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