Objetivo: Basado en la vía de señalización del factor inducible por hipoxia-1 (HIF-1), investigar el efecto de la fórmula Bu Shen Hua Tan sobre la glucólisis aeróbica en células osteoblásticas embrionarias de ratón MC3T3-E1, y explorar más a fondo el mecanismo de intervención de la fórmula en la osteoporosis postmenopáusica (PMOP). Método: Las células MC3T3-E1 se dividieron en grupo control, grupos con baja, media y alta concentración de la fórmula Bu Shen Hua Tan (0.01, 0.05, 0.1 g/L), y grupo con icarina (0.1 g/L). Se determinaron la actividad osteogénica y la mineralización de los nódulos mediante tinción de fosfatasa alcalina (ALP) y ácido alizarínico rojo (ARS); se observaron cambios ultraestructurales en mitocondrias y retículo endoplasmático rugoso mediante microscopía electrónica de transmisión; se detectaron las expresiones de factores de transcripción asociados a la osteogénesis Runx2 y Osterix por inmunofluorescencia (IF); se midieron niveles de piruvato (PA) y lactato (LA) en el líquido sobrenadante celular mediante ELISA; se midió la tasa de acidificación extracelular (ECAR) usando el analizador Seahorse XF96; la expresión de proteínas HIF-1α, HIF-1β, PDK1, HK2, PKM2 se determinó por Western blot; y la expresión de ARNm HIF-1α, HIF-1β, PDK1, HK2, PKM2 por PCR cuantitativa en tiempo real. Resultados: En comparación con el grupo control, los grupos de tratamiento mostraron un aumento significativo en la tinción positiva de ALP y ARS en células MC3T3-E1 (P<0.05, P<0.01); el retículo endoplasmático rugoso se expandió significativamente y su número aumentó; el número de lisosomas también creció; la intensidad fluorescente de Runx2 y Osterix aumentó significativamente (P<0.01); los niveles de PA y LA en el sobrenadante celular aumentaron significativamente (P<0.01); la ECAR se incrementó claramente en los mismos intervalos de tiempo (P<0.05); las expresiones de proteínas y ARNm de HIF-1α, HK2, PDK1, PKM2 se incrementaron significativamente (P<0.05, P<0.01). Conclusión: La fórmula Bu Shen Hua Tan puede regular la glucólisis aeróbica en células osteoblásticas MC3T3-E1 mediante la activación del camino de señalización HIF-1, promoviendo la formación ósea.

fórmula Bu Shen Hua Tan; osteoporosis postmenopáusica; diferenciación de osteoblastos; vía de señalización del factor inducible por hipoxia-1 (HIF-1); glucólisis aeróbica