Objetivo: Basado en la síntesis de la enzima acil-CoA de cadena larga 4 (ACSL4) mediando la β-oxidación de ácidos grasos mitocondriales, estudiar el efecto y mecanismo de la fórmula Shugan Bushen Yulin Tang para mejorar la motilidad espermática en ratas con estasis hepática. Métodos: Se dividieron aleatoriamente 40 ratas macho SD en grupo normal, grupo modelo, grupos de alta y baja dosis de Shugan Bushen Yulin Tang (26 y 13 g·kg⁻¹) y grupo fluoxetina (1.8 mg·kg⁻¹). Los tratamientos se administraron por gavage. Excepto el grupo normal, las otras ratas fueron sometidas a restricción crónica combinada con irritación de la cola para reproducir un modelo de estasis hepática. Después de la modelación, todas las ratas recibieron tratamientos correspondientes durante 21 días consecutivos. Los niveles de corticosterona (CORT), testosterona (T) y estradiol (E₂) en suero se detectaron por ELISA. Se midieron el peso corporal, testicular y del epidídimo con balanza analítica y se calcularon los índices testicular y epididimario. La concentración y motilidad espermática se evaluaron mediante un sistema automático de análisis de esperma. Se observó la histología testicular con tinción de hematoxilina-eosina (HE). Se analizó el potencial de membrana mitocondrial del esperma utilizando citometría de flujo y la sonda fluorescente JC-1. Se detectaron cambios en el metabolismo lipidico en espermatozoides por cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS), seleccionando metabolitos diferenciales. Se midieron las actividades de Acetil-CoA, Acil-CoA y niveles de ATP por ELISA. Se detectó la expresión de ACSL4 en tejido testicular mediante inmunofluorescencia (IF). Se detectaron la expresión proteica ACSL4 y CPT1 por western blot. Resultados: En comparación con el grupo normal, LC-MS seleccionó 24 metabolitos diferenciales de ácidos grasos; tras la intervención con Shugan Bushen Yulin Tang, se regularon al alza 11 metabolitos. El análisis de enriquecimiento de vías reveló la participación principal en la biosíntesis y metabolismo de ácidos grasos. En el grupo modelo, la densidad y motilidad espermática, índice epididimario, potencial de membrana mitocondrial, actividad de Acetil-CoA, Acil-CoA y contenido de ATP disminuyeron significativamente; la expresión de proteínas ACSL4 y CPT1 se redujo significativamente (P<0.01). En comparación con el grupo modelo, en las dosis de Shugan Bushen Yulin Tang aumentaron significativamente la densidad y motilidad espermática, índice epididimario, potencial de membrana mitocondrial (P<0.01), actividad de Acetil-CoA, Acil-CoA y contenido de ATP (P<0.01), también expresiones proteicas ACSL4 y CPT1 aumentaron significativamente (P<0.05, P<0.01). Conclusión: Shugan Bushen Yulin Tang puede mejorar la motilidad espermática en ratas con estasis hepática activando la β-oxidación mitocondrial de ácidos grasos mediada por ACSL4 y aumentando la producción de ATP.

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