Estudio del papel y mecanismo de Shugan Bushen Yulin Tang para mejorar la motilidad espermática en ratas con estasis hepática basado en la β-oxidación de ácidos grasos

DENG Chaoyang ,  

XIAO Min ,  

JIANG Xiaocui ,  

WANG Chaoyang ,  

LYU Yinjuan ,  

SHU Jinsong ,  

ZHOU Yanyan ,  

YU Xiaoming ,  

摘要

El objetivo fue estudiar el papel y mecanismo de la fórmula Shugan Bushen Yulin Tang en la mejora de la motilidad espermática en ratas con estasis hepática, basado en la sintasa de acil-CoA de cadena larga 4 (ACSL4) mediando la β-oxidación mitocondrial de ácidos grasos. Métodos: 40 ratas macho SD se dividieron aleatoriamente en grupo normal, grupo modelo, grupos de dosis alta y baja de Shugan Bushen Yulin Tang (26, 13 g·kg-1) y grupo fluoxetina (1.8 mg·kg-1), administrados por gavage. Excepto el grupo normal, los otros grupos se sometieron a un método combinado de restricción crónica y estimulación de la cola para producir el modelo de estasis hepática. Al terminar la modelación, cada grupo recibió los medicamentos correspondientes durante 21 días consecutivos. Se utilizaron métodos ELISA para detectar corticosterona (CORT), testosterona (T) y estradiol (E2) en suero. Se midieron masa corporal, masa testicular y epididimal con balanza analítica electrónica; se calcularon los índices testicular y epididimal. El sistema automático de análisis espermático midió la concentración y motilidad de los espermatozoides. Se observaron los cambios histológicos del tejido testicular mediante tinción con Hematoxilina-Eosina (HE). Se utilizó citometría de flujo y sondas fluorescentes como JC-1 para analizar el potencial de membrana mitocondrial en espermatozoides. La espectrometría de masas acoplada a cromatografía líquida (LC-MS) detectó cambios en el metabolismo lipídico espermático y filtró metabolitos diferenciales. ELISA detectó la actividad de acetil-CoA (Acetyl-CoA), acil-CoA (Acyl-CoA) y niveles de trifosfato de adenosina (ATP). La inmunofluorescencia (IF) evaluó la expresión de ACSL4 en tejido testicular. El Western blot analizó la expresión de proteínas ACSL4 y carnitina palmitoiltransferasa 1 (CPT1) en el tejido testicular. En comparación con el grupo normal, LC-MS seleccionó 24 metabolitos lipídicos diferenciales; tras la intervención con Shugan Bushen Yulin Tang se upregularon 11, y el análisis de enriquecimiento de vías indicó principalmente biosíntesis y metabolismo de ácidos grasos. Comparado con el grupo normal, la densidad y motilidad espermática, índice epididimal y potencial de membrana mitocondrial disminuyeron significativamente en el grupo modelo, junto con la reducción significativa de actividad de Acetyl-CoA, Acyl-CoA, contenido de ATP, y expresión proteica de ACSL4, CPT1 (P<0.01). Comparado con el grupo modelo, los grupos de Shugan Bushen Yulin Tang mejoraron significativamente densidad y motilidad espermática, índice epididimal, potencial mitocondrial, actividad de Acetyl-CoA, Acyl-CoA y contenido de ATP (P<0.01), así como expresión proteica ACSL4 y CPT1 (P<0.05, P<0.01). Conclusión: Shugan Bushen Yulin Tang puede mejorar la motilidad espermática en ratas con estasis hepática activando la β-oxidación mitocondrial mediada por ACSL4, aumentando la generación de ATP.

关键词

Shugan Bushen Yulin Tang;emociones;estasis hepática;motilidad espermática;mitocondrias;β-oxidación de ácidos grasos

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