El objetivo es revelar el mecanismo molecular mediante el cual la fórmula herbal china Qiang Jing Pian regula el envejecimiento de las células de Leydig y el tejido testicular de ratas a través de la vía de señalización dependiente de la cinasa dependiente de ciclina 4/factor de transcripción E2F (CDK4/E2F). Para los experimentos celulares, se seleccionaron ratas machos SD SPF de 2 meses, divididas aleatoriamente en grupo blanco (administración de solución salina al 0,9%) y grupo Qiang Jing Pian (20 ratas por grupo). Se estableció un modelo de envejecimiento de células de Leydig mediante inducción con 100 μmol·L^-1 de H₂O₂ en células TM3, validado mediante la detección de los niveles de p16 y p21 por Western blot. Se utilizó N-acetilcisteína (NAC, 1 mmol·L^-1), un antioxidante, como control positivo para eliminar especies reactivas de oxígeno (ROS). Las células se trataron con sueros que contenían concentraciones bajas (2,5%), medias (5%) y altas (10%) de Qiang Jing Pian. Se midieron los niveles de testosterona en el sobrenadante celular por ELISA, y la expresión de proteínas CDK4, E2F1 y E2F2 por Western blot. En el experimento animal, se utilizaron ratas naturalmente envejecidas de 19 meses como grupo modelo y ratas de 2 meses como grupo joven; el propionato de testosterona (5,21 mg·kg^-1·d^-1) se empleó como control positivo; los grupos con dosis baja, media y alta de Qiang Jing Pian recibieron dosis de 0,72, 1,44 y 2,88 g·kg^-1·d^-1 por vía oral, respectivamente. Se observó el estado general de las ratas, y se detectó el contenido proteico de CDK4, E2F1 y E2F2 en tejido testicular por Western blot. En el experimento celular, en comparación con el grupo normal, la expresión de CDK4 y E2F1 aumentó significativamente (P<0.05) en el grupo modelo, mientras que E2F2 disminuyó ligeramente; en comparación con el grupo modelo, los grupos de NAC y dosis baja de Qiang Jing Pian mostraron un aumento significativo de CDK4 (P<0.05), un aumento leve en la dosis media y una disminución significativa en la dosis alta (P<0.05). En el grupo NAC, E2F1 disminuyó significativamente (P<0.05) y E2F2 ligeramente; las dosis baja, media y alta de Qiang Jing Pian mostraron una disminución significativa en E2F1 y E2F2 (P<0.05); en comparación con NAC, CDK4 aumentó ligeramente en la dosis baja y disminuyó significativamente en la dosis alta (P<0.05), E2F1 disminuyó significativamente en la dosis alta (P<0.05) y E2F2 disminuyó en todas las dosis (P<0.05). En el experimento animal, en comparación con el grupo joven, CDK4 disminuyó significativamente (P<0.05) en el grupo modelo, mientras que E2F1 y E2F2 aumentaron ligeramente; en comparación con el grupo modelo, el propionato de testosterona y la dosis baja de Qiang Jing Pian disminuyeron significativamente CDK4 (P<0.05), mientras que las dosis media y alta aumentaron significativamente CDK4, con diferencias estadísticamente significativas para la dosis media (P<0.05); E2F1 disminuyó significativamente (P<0.05) y E2F2 aumentó ligeramente; en comparación con NAC, las dosis media y alta aumentaron significativamente la expresión de CDK4 (P<0.05), la dosis media aumentó significativamente la proteína E2F1 (P<0.05) y E2F2 disminuyó en todos los grupos de Qiang Jing Pian. Conclusión: Qiang Jing Pian mejora el proceso de envejecimiento de las células de Leydig y los tejidos testiculares mediante la regulación al alza de la expresión de CDK4 y la inhibición de los niveles de E2F1 y E2F2.

Qiang Jing Pian envejecimiento natural; células intersticiales testiculares; vía de señalización de la cinasa dependiente de ciclina 4/factor de transcripción E2F (CDK4/E2F)