El líquido de rehabilitación KFX ejerce actividad anti-psoriásica in vitro inhibiendo la proliferación y migración celular y bloqueando la vía de señalización JAK3/STAT3

LI Shuai ,  

LIU Xuan ,  

TANG Wenyan ,  

WU Zhenqi ,  

CHEN Chunhui ,  

QIU Dadan ,  

XU Yi ,  

ZHANG Chenggui ,  

ZHU Jianquan ,  

ZHU Jiali ,  

摘要

El objetivo es explorar la actividad anti-psoriásica in vitro y el posible mecanismo de acción del líquido KFX (líquido de rehabilitación KFX), con el fin de proporcionar evidencia experimental sobre su efecto anti-psoriásico. Se dividieron las células de queratinocitos inmortalizadas humanas no inducidas (células HaCaT) en 7 grupos: control y grupos de líquido KFX con diferentes concentraciones de masa (5, 10, 20, 40, 80, 160 g·L-1). Después del tratamiento con diferentes concentraciones de líquido KFX, se evaluó el efecto sobre la proliferación celular normal mediante un kit de detección de proliferación y viabilidad celular (CCK-8); luego, las células HaCaT no inducidas se dividieron en 6 grupos: control y grupos con diferentes dosis de rh-IL-17A (5, 10, 50, 100, 120 g·L-1). Tras el tratamiento con diferentes concentraciones de interleucina-17A humana recombinante (rh IL-17A), se examinó su efecto en la proliferación celular para seleccionar la mejor concentración de inducción; luego, las células HaCaT normales se dividieron en control y grupos de líquido KFX (5, 10, 20, 40, 80, 160 g·L-1), excepto el control, se estableció un modelo celular psoriásico con la mejor concentración inductora de rh IL-17A. Tras el tratamiento con diferentes concentraciones de líquido KFX, se examinó el efecto sobre la proliferación de las células HaCaT psoriásicas; por último, las células HaCaT no inducidas se dividieron en 6 grupos: control, rh IL-17A, MTX y grupos de líquido KFX a diferentes concentraciones (20, 40, 80 g·L-1). Excepto en el grupo control, en los demás grupos se utilizó la mejor concentración inductora de rh IL-17A para establecer el modelo celular psoriásico. Después del tratamiento con diferentes fármacos, se midió el nivel de migración celular mediante el ensayo de cicatrización, y se detectó la expresión relativa de ARNm de Ki-67, S100A7, S100A8 y S100A9 mediante PCR cuantitativa en tiempo real. Se evaluó integralmente la actividad anti-psoriásica in vitro del líquido KFX. A través de la detección de la expresión relativa de los factores inflamatorios IL-1β, IL-6, CXCL-20 y las proteínas JAK3, p-JAK3, STAT3 y p-STAT3 en células HaCaT psoriásicas, se exploró el mecanismo de acción. Resultados: en comparación con el grupo control, el tratamiento con 80 g·L-1 de líquido KFX durante 72 h (P <0,05) y con 160 g·L-1 en diferentes periodos (P <0,01) afectó significativamente la proliferación de células HaCaT. Las demás concentraciones no mostraron diferencias evidentes en morfología celular ni en proliferación, lo que indica la seguridad del líquido KFX. En comparación con el control, después de 24 h de tratamiento con diferentes concentraciones de rh IL-17A, la actividad proliferativa celular aumentó notablemente, siendo más intensa a 100 μg·L-1 (P <0,05), con densidad cercana al 100% y morfología celular intacta, indicando que esa es la mejor concentración inductora. Los resultados del tratamiento con líquido KFX en células psoriásicas inducidas por rh IL-17A mostraron que el líquido KFX no solo inhibe eficazmente la proliferación celular psoriásica (P <0,01), sino que también reduce significativamente la migración (P <0,01) y la expresión relativa de ARNm Ki67, S100A7, S100A8 y S100A9 (P <0,01). Además, el líquido KFX disminuye significativamente la expresión relativa de IL-1β, IL-6 y CXCL-20 (P <0,01) y suprime la fosforilación de las proteínas JAK3 y STAT3 (P <0,05, P <0,01). Conclusión: el líquido KFX no tiene toxicidad evidente en células HaCaT no inducidas, inhibe la proliferación y migración de células psoriásicas inducidas por rh IL-17A, mostrando buena actividad anti-psoriásica in vitro, posiblemente relacionada con la regulación a la baja de la expresión de citoquinas inflamatorias en la vía JAK3/STAT3 y la inhibición de la fosforilación de las proteínas JAK3 y STAT3.

关键词

psoriasis; líquido de rehabilitación KFX; proliferación celular; capacidad de migración; factores inflamatorios; tirosina quinasa 3 (JAK3)/vía de señalización del transductor y activador de la transcripción 3 (STAT3)

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