El objetivo es investigar si la sopa Huanglian Jiedu puede inhibir la infiltración de neutrófilos en el cerebro de ratones con oclusión de la arteria cerebral media (MCAO) mediante la regulación de la expresión de quimiocinas relacionadas con neutrófilos en exosomas, logrando así un efecto terapéutico. Método: 130 ratones machos SPF C57BL/6J se dividieron aleatoriamente en 4 grupos: grupo de cirugía simulada, grupo modelo MCAO, grupo sopa Huanglian Jiedu (6 g·kg^-1) y grupo Jinnaduo (21,6 mg·kg^-1), con 10 ratones en el grupo Jinnaduo y 40 en cada uno de los otros tres grupos. Los grupos de sopa Huanglian Jiedu y Jinnaduo recibieron administración oral diaria a razón de 0,15 mL·(10 g)^-1 del medicamento correspondiente durante 7 días consecutivos, mientras que los grupos de cirugía simulada y modelo recibieron la misma cantidad de solución salina por la misma vía. Tras 7 días, se realizó la cirugía de oclusión de la arteria cerebral media en los ratones, ligando los extremos distal y proximal de la arteria carótida común derecha (CCA), haciendo una pequeña incisión entre las ligaduras e insertando un monofilamento recubierto de silicona con cabeza redondeada para obstruir la arteria. El monofilamento se mantuvo durante 1 hora para establecer un modelo de isquemia cerebral focal. A las 24 horas tras la modelación, se realizaron evaluaciones: puntuación de déficits neurológicos (puntuación de Longa) para evaluar el estado neurológico, tinción TTC para detectar el volumen del infarto cerebral, imagen láser de manchas para observar el flujo sanguíneo cerebral, tinciones HE y Nissl para observar los cambios patológicos en el tejido cerebral. Los exosomas se aislaron del plasma y tejido cerebral mediante ultracentrifugación y se clasificaron por tamaño, analizándose mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM), medición del tamaño y Western blot. Se construyó la biblioteca y se secuenció el ARN largo de cadena de los exosomas. La PCR en tiempo real midió la expresión del ARNm de factores inflamatorios y quimiocinas relacionadas con neutrófilos en exosomas de plasma y tejido cerebral, ELISA midió la expresión proteica, e inmunohistoquímica detectó la expresión de la mieloperoxidasa específica de neutrófilos (MPO) en el cerebro. Resultados: En comparación con el grupo cirugía simulada, el grupo modelo mostró una disminución significativa en la puntuación neurológica (P<0.01), infartos cerebrales evidentes (P<0.01), una disminución significativa del flujo sanguíneo cerebral (P<0.01), necrosis celular cerebral, y una disminución notable en el número de cuerpos de Nissl (P<0.01). La expresión de ARNm de IL-1β, MPO, CXCL1, CXCL2, CXCL3, CXCL10, CCL2 y CCL3 aumentó significativamente en exosomas de plasma y tejido cerebral (P<0.05, P<0.01), así como la expresión proteica de IL-1β, MPO, CXCL2 y CXCL10 en exosomas de tejido cerebral (P<0.05, P<0.01). La tasa de positividad de MPO y la densidad óptica media en el cerebro aumentaron significativamente (P<0.01). En comparación con el grupo modelo, los grupos de sopa Huanglian Jiedu y Jinnaduo mostraron una mejora significativa en la puntuación neurológica (P<0.05), una reducción notable del volumen infartado (P<0.01), una recuperación significativa del flujo sanguíneo cerebral (P<0.01), menos células necróticas cerebrales y un aumento significativo en el número de cuerpos de Nissl (P<0.01). En el grupo sopa Huanglian Jiedu, la expresión de ARNm de los factores mencionados disminuyó significativamente en exosomas de plasma y tejido cerebral (P<0.05, P<0.01), así como la expresión proteica en exosomas de tejido cerebral y la positividad de MPO y la densidad óptica en el cerebro (P<0.01). Conclusión: La sopa Huanglian Jiedu puede regular eficazmente la expresión de quimiocinas relacionadas con neutrófilos en exosomas de plasma y tejido cerebral en ratones MCAO, reduciendo así la infiltración de neutrófilos en el cerebro y logrando un efecto terapéutico.

Sopa Huanglian Jiedu;accidente cerebrovascular isquémico;exosomas;quimiocinas;infiltración de neutrófilos