Objetivo Este estudio tiene como objetivo investigar el efecto regulador de la fórmula Huanglian Jiedu Tang, representante del método de enfriamiento y desintoxicación, sobre la migración de células inmunitarias, la protección de la barrera hematoencefálica y la recuperación funcional celular en un modelo de accidente cerebrovascular isquémico. Método Se estableció un modelo de accidente cerebrovascular isquémico en ratones mediante oclusión transitoria de la arteria cerebral media (tMCAO), y se evaluaron el flujo sanguíneo cerebral y la función neurológica mediante imágenes láser de motas y puntuación neurológica. Las lesiones patológicas del tejido cerebral se evaluaron con tinción de hematoxilina-eosina (HE) y Nissl. Los ratones se dividieron en grupo sham, grupo modelo, grupo Huanglian Jiedu Tang y grupo extracto de hoja de Ginkgo biloba, y tras una semana de adaptación, se administró por gavage: los grupos sham y modelo recibieron solución salina, el grupo Huanglian Jiedu Tang se dosificó a 1.82 g·kg^-1, y el grupo extracto de Ginkgo a 0.432 g·kg^-1, durante 5 días consecutivos, realizando tMCAO el sexto día después de la última administración. Se realizó secuenciación de ARN unicelular en tejido cerebral y células inmunitarias periféricas, analizando la distribución celular mediante UMAP y odds ratio (OR), y análisis de expresión diferencial para evaluar los efectos de Huanglian Jiedu Tang sobre células endoteliales, pericitos y macrófagos, combinando con herramientas de comunicación celular (CellChat) y análisis de regulación de factores de transcripción (decoupler) para analizar la comunicación celular y regulación transcripcional. Finalmente, se validó la expresión de ARN mensajero y proteínas mediante PCR cuantitativa en tiempo real y ELISA. Resultados En comparación con el grupo sham, el grupo modelo mostró una puntuación neurológica significativamente mayor (P<0.01) y un flujo sanguíneo significativamente reducido (P<0.01), con desorganización cortical, mayor vacuolización de los somas celulares y aumento en el número de cuerpos de Nissl; comparado con el grupo modelo, los grupos Huanglian Jiedu Tang y extracto de Ginkgo mostraron una reducción significativa en la puntuación neurológica (P<0.01) y un aumento notable en el flujo sanguíneo (P<0.01), además de una mejora en la desorganización cortical, disminución de la vacuolización celular y reducción en el número de cuerpos de Nissl. Los datos unicelulares indican que Huanglian Jiedu Tang protege a las células endoteliales y pericitos de su reducción, restaurando la expresión de genes funcionales (como PECAM1, NOS3) en estas células y reduciendo la expresión de quimiocinas y factores de adhesión (CCL2, CXCL2); en macrófagos, Huanglian Jiedu Tang disminuye su migración quimiotáctica hacia el sistema nervioso central y reduce la expresión de sus receptores de quimiocinas y factores inflamatorios (IL-6, CCR2, CXCR2). El análisis de comunicación celular muestra que Huanglian Jiedu Tang reduce el daño a pericitos y células endoteliales, disminuye su atracción hacia los macrófagos, y reduce las interacciones ligando-receptor de las vías de señalización quimiocinas CCL, CXCL, CSF3 entre pericitos-macrófagos y endotelio-macrófagos, evitando daños secundarios. En comparación con el grupo sham, el grupo modelo mostró una expresión significativamente aumentada de ARNm de moléculas IL-1β, IL-6, factor de necrosis tumoral α (TNF-α), CCL2, CXCL2, CSF3 (P<0.01), y una expresión significativamente disminuida de ARNm funcionales endoteliales y pericitos (RGS5, PECAM1, VEGFB, NOS3) (P<0.01); comparado con el grupo modelo, los grupos Huanglian Jiedu Tang y extracto de Ginkgo mostraron una reducción significativa de las moléculas inflamatorias y un aumento significativo de los genes funcionales (P<0.01). A nivel proteico, el grupo modelo tuvo una expresión significativamente elevada de IL-1β, IL-6 y TNF-α en comparación con el grupo sham (P<0.01), mientras que los grupos Huanglian Jiedu Tang y extracto de Ginkgo mostraron una disminución significativa de estas proteínas en comparación con el grupo modelo (P<0.01). Conclusión Huanglian Jiedu Tang protege las células endoteliales y pericitos en el accidente cerebrovascular isquémico, reduce el daño neuronal, inhibe su interacción con macrófagos y disminuye el daño secundario en el sistema nervioso central.

Huanglian Jiedu Tang; accidente cerebrovascular isquémico; transcriptoma unicelular; interacción central-periférica