El objetivo de este estudio es evaluar el efecto terapéutico de la decocción Huanglian Jiedu en un modelo de ratón con oclusión de la arteria cerebral media (MCAO) y explorar su mecanismo de acción sobre los oligodendrocitos, especialmente su potencial en la reparación de la vaina de mielina. Se emplearon múltiples métodos experimentales para evaluar el daño cerebral isquémico y el efecto de la intervención farmacológica. Se utilizó la imagen de dispersión láser para detectar cambios en el flujo sanguíneo cerebral, la tinción de Tetrazolio Rojo (TTC) para medir el volumen del infarto, y se realizó una evaluación neurológica según el estándar Zea-Longa. Los tejidos cerebrales se fijaron en parafina y se tiñeron con hematoxilina-eosina (HE) y Nissl para observar la estructura tisular y el daño neuronal. Los animales se dividieron en grupos: grupo sham (24), grupo modelo (24), grupo Huanglian Jiedu Tang (24) y grupo de extracto de hoja de ginkgo (18). Después de una semana de adaptación comenzó la administración por vía oral: los grupos sham y modelo recibieron solución salina; el grupo Huanglian Jiedu Tang recibió 1,82 g/kg; el grupo de extracto de ginkgo fue preparado como solución de 2,16 g/L y administrado a 0,432 g/kg. Se administró durante 5 días consecutivos con un volumen de 0,2 mL/(10 g)/día. Al final del sexto día, después de la última administración, se estableció el modelo MCAO. Se utilizó la secuenciación de ARN unicelular para analizar la composición celular del tejido cerebral y los cambios en los subgrupos de oligodendrocitos. Mediante reducción de dimensión UMAP y agrupación no supervisada se identificaron diferentes subgrupos y se analizó la expresión de genes marcadores. Además, se utilizó IPA para el enriquecimiento de rutas e inferencia causal. Finalmente, se validaron los cambios en la expresión de ARNm de genes relacionados con la mielina mediante PCR cuantitativa en tiempo real. En comparación con el grupo sham, el grupo modelo mostró una puntuación neurológica significativamente elevada (P<0.01), un flujo sanguíneo significativamente deteriorado (P<0.01), un área de infarto cerebral significativamente mayor (P<0.01), y cambios patológicos que incluían desorden en la organización cortical, vacuolización del soma celular y aumento de los cuerpos de Nissl; comparado con el grupo modelo, los grupos Huanglian Jiedu Tang y extracto de hoja de ginkgo mostraron una disminución significativa en la puntuación neurológica (P<0.01), una recuperación significativa del flujo sanguíneo (P<0.01), una reducción significativa en el área de infarto (P<0.01), además de mejoras en la organización cortical, reducción de la vacuolización y disminución en la cantidad de cuerpos de Nissl. Los datos unicelulares mostraron la existencia de un subgrupo de oligodendrocitos asociados a la mielina (Mye Oil) estrechamente relacionado con la mielinogénesis. En comparación con el grupo sham, el número de Mye Oil disminuyó en el grupo modelo; en comparación con el grupo modelo, el número de Mye Oil aumentó en el grupo Huanglian Jiedu Tang. Este subgrupo, a través de factores de transcripción OLIG1, OLIG2, NKX2-2, SOX10, promueve la expresión de genes de mielinogénesis como MOG, MBP, MAG, regulando la formación de la mielina, restaurando la cognición y produciendo un efecto terapéutico en el infarto cerebral agudo. Comparado con el grupo sham, el grupo modelo mostró niveles de expresión de ARNm OLIG1, OLIG2, NKX2-2, SOX10 significativamente disminuidos (P<0.01), así como niveles reducidos de ARNm de genes relacionados con la mielina MOG, MBP, MAG (P<0.01); comparado con el grupo modelo, los grupos Huanglian Jiedu Tang y extracto de hoja de ginkgo mostraron un aumento significativo en los niveles de expresión de estos ARNm (P<0.01). Conclusión: Huanglian Jiedu Tang puede promover la mielinogénesis mediante la regulación de la vía de señalización OLIG1/2-NKX2-2-SOX10, produciendo un efecto terapéutico en el infarto cerebral agudo.

Huanglian Jiedu Tang;infarto cerebral agudo;oligodendrocitos;transcriptoma unicelular;formación de mielina