Estudio del efecto de la intervención del jugo de Zhi Shi preparado con Atractylodes blanco para mejorar el estreñimiento de tránsito lento y el mecanismo de regulación sinérgica "microbiota-metabolismo" basado en la teoría "el bazo gobierna el transporte y la transformación"

LI Dan ,  

LIU Xiaoxia ,  

WANG Xiaofen ,  

HE Zuxin ,  

WEI Junnan ,  

LIU Yanqing ,  

GAO Yuxuan ,  

LUO Ping ,  

WANG Fang ,  

摘要

Objetivo: Basado en la teoría de que "el bazo gobierna el transporte y la transformación", se investigó la intervención del jugo de Zhi Shi preparado con Atractylodes blanco para mejorar el estreñimiento de tipo tránsito lento (STC) y el mecanismo coordinado "microbiota-metabolismo", aclarando el contenido científico de la teoría de la preparación. Métodos: Los animales se dividieron aleatoriamente en grupo en blanco, grupo modelo, grupo positivo (Mosapride) y grupos de dosis baja, media y alta de jugo de Zhi Shi preparado con Atractylodes blanco. Excepto el grupo en blanco, los otros cinco grupos se modelaron con estreñimiento de tránsito lento mediante hidrocloruro de lopéramida. Después del modelado, se aplicaron las intervenciones: dosis de Mosapride de 3 mg·kg-1, dosis bajas, medias y altas de jugo de Zhi Shi preparado con Atractylodes blanco de 3.9, 7.8 y 15.6 g·kg-1, respectivamente, durante 15 días consecutivos, se recolectaron heces, tejidos del colon y suero. Se midió la tasa de agua en las heces y la propulsión del intestino delgado; se observó la morfología patológica del tejido del colon mediante tinción con hematoxilina-eosina (HE); se midieron los niveles séricos de interleucina (IL)-6, factor de necrosis tumoral-α (TNF-α) y IL-2 mediante ELISA; se analizaron la estructura de la microbiota fecal con secuenciación 16S rRNA, genes diferencialmente expresados en tejido del colon mediante transcriptómica, análisis de enriquecimiento de ontología génica (GO) y bases de datos KEGG, y finalmente análisis de correlación de Spearman entre microbiota diferencial y genes diferenciales. Resultados: En comparación con el grupo en blanco, el grupo modelo mostró una reducción significativa en la tasa de propulsión intestinal y en el contenido de agua fecal (P<0.01), y un aumento significativo en los niveles séricos de IL-6, TNF-α e IL-2 (P<0.01). La tinción HE mostró daño y desprendimiento de células epiteliales de la mucosa del colon y reducción de células caliciformes en el grupo modelo. En comparación con el grupo modelo, todos los grupos tratados mejoraron en diferentes grados la situación de las células de la mucosa del colon, redujeron significativamente los niveles séricos de IL-6, TNF-α e IL-2 (P<0.01), y el grupo de dosis alta de jugo de Zhi Shi preparado con Atractylodes blanco aumentó significativamente la tasa de propulsión intestinal y el contenido de agua fecal (P<0.05, P<0.01). El análisis transcriptómico identificó 104 genes diferenciales comunes al comparar el grupo modelo con el grupo en blanco y el grupo de dosis alta, enriquecidos en vías de metabolismo de ácido araquidónico y regulación de reabsorción de sodio por aldosterona, estrechamente relacionadas con la patogénesis de STC. La secuenciación 16S rRNA mostró que el jugo de Zhi Shi preparado con Atractylodes blanco podría revertir el desequilibrio de la microbiota intestinal del ratón modelo, aumentar la riqueza de especies microbianas, reducir la abundancia de bacterias proinflamatorias como el género Sutterella y enriquecer bacterias beneficiosas como el grupo NK4A136 de la familia Muribaculaceae y el género Ruminococcus, todos importantes productores de butirato intestinal. El análisis de correlación de Spearman mostró que las bacterias beneficiosas enriquecidas en el grupo de jugo de Zhi Shi preparado con Atractylodes blanco se correlacionaban negativamente con genes de la vía metabólica del ácido araquidónico y positivamente con genes de la vía de regulación de reabsorción de sodio por aldosterona, mientras que las bacterias proinflamatorias del grupo modelo mostraban correlaciones opuestas. Conclusión: El jugo de Zhi Shi preparado con Atractylodes blanco puede ejercer un efecto terapéutico sinérgico en STC regulando la microbiota intestinal, el metabolismo inflamatorio mediado por ácido araquidónico y las vías de regulación hidrosalina de aldosterona.

关键词

estreñimiento de tránsito lento;microbiota intestinal;Atractylodes blanco;Zhi Shi;metabolismo del ácido araquidónico;aldosterona;regulación sinérgica

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