El objetivo es investigar si la decocción Huanglian Jiedu Tang y sus principales componentes activos (genipinósido, baicalina y berberina) pueden inhibir la respuesta inflamatoria en células BV2 bajo la intervención de lipopolisacárido (LPS) a través de la vía de señalización de la proteína de alta movilidad B1 (HMGB1)/receptor Toll-like 4 (TLR4)/factor nuclear de transcripción-κB (NF-κB), y estudiar en profundidad las diferencias de eficacia entre tres monómeros, la combinación monomérica y la fórmula compuesta Huanglian Jiedu Tang en proporciones iguales. Método: se utilizaron células microgliales BV2 como principal objeto de estudio. Se evaluó el efecto de diferentes concentraciones de dimetilsulfóxido (DMSO) (0,8 %, 0,4 %, 0,2 %, 0,1 % y 0,05 %) sobre la viabilidad celular mediante el método CCK-8. Se monitoreó el estado del crecimiento celular con diferentes concentraciones de Huanglian Jiedu Tang (200, 100, 50, 25, 12.5 y 6.25 mg·L⁻¹) mediante Incucyte. Se realizó la medición de óxido nítrico (NO) para seleccionar la mejor concentración de administración. Se analizó el contenido de genipinósido, baicalina y berberina en Huanglian Jiedu Tang utilizando cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) y se establecieron grupos experimentales basados en la proporción del contenido. Se evaluó el efecto de las sustancias sobre la viabilidad celular utilizando CCK-8, los factores inflamatorios en el sobrenadante celular [factor de necrosis tumoral-α (TNF-α), interleucina (IL)-1β, IL-6 e IL-10] se midieron mediante ELISA. La polarización del tipo M1 en células BV2 se analizó con citometría de flujo, y se evaluó la expresión proteica de HMGB1, TLR4 y NF-κB mediante western blot. Resultados: comparado con el grupo control, concentraciones de DMSO del 0,2 % o menos no afectaron la viabilidad celular en 48 h (P>0.05). Bajo la intervención con 200 mg·L⁻¹ de Huanglian Jiedu Tang, el estado de crecimiento celular alcanzó la meseta a las 24 h. Bajo estímulo de LPS a 2 mg·L⁻¹, dicha concentración pudo reducir mejor la liberación de NO, y la administración previa de 6 h mostró mayor efecto inhibidor sobre NO que la administración directa. Los resultados de HPLC mostraron que cada 1 mg de polvo liofilizado de Huanglian Jiedu Tang contiene aproximadamente 24 μg de genipinósido, 15 μg de baicalina y 30 μg de berberina. Los grupos experimentales se establecieron como: grupo control, grupo LPS 2 mg·L⁻¹, Huanglian Jiedu Tang 200 mg·L⁻¹, grupo combinación monomérica, genipinósido 4.8 mg·L⁻¹, baicalina 3 mg·L⁻¹ y berberina 6 mg·L⁻¹. El grupo combinación monomérica es la mezcla compuesta por los tres componentes activos. Comparado con el grupo control, ni LPS ni Huanglian Jiedu Tang ni sus componentes activos afectaron la viabilidad celular. Comparado con el grupo control, el grupo LPS elevó significativamente los factores inflamatorios TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-10 en el sobrenadante celular (P<0.01). Huanglian Jiedu Tang y sus componentes activos redujeron los factores proinflamatorios TNF-α, IL-1β, IL-6 (P<0.05, P<0.01) y aumentaron el factor antiinflamatorio IL-10 (P<0.01); el grupo combinación monomérica mostró la mejor capacidad antiinflamatoria (P<0.05, P<0.01). Comparado con el grupo control, el grupo LPS elevó significativamente la proporción de la subpoblación CD80+CD86+ (tipo M1) en células BV2 (P<0.01). Huanglian Jiedu Tang y sus componentes activos mostraron una inhibición significativa sobre la polarización tipo M1 en células BV2 (P<0.05, P<0.01), con el mejor efecto en el grupo combinación monomérica (P<0.05, P<0.01). Comparado con el grupo control, el grupo LPS aumentó significativamente la expresión de las proteínas HMGB1, TLR4 y NF-κB (P<0.01), que se redujo considerablemente tras la intervención con Huanglian Jiedu Tang y sus componentes activos (P<0.05, P<0.01), siendo el grupo combinación monomérica el que mostró una regulación más efectiva (P<0.05, P<0.01). Conclusión: Huanglian Jiedu Tang y sus principales componentes activos (genipinósido, baicalina y berberina) pueden inhibir la respuesta inflamatoria en células BV2 estimuladas por LPS, y la combinación de los tres componentes activos mostró el mejor efecto antiinflamatorio, al mitigar significativamente la polarización tipo M1 en BV2 mediante la vía de señalización HMGB1/TLR4/NF-κB.

Huanglian Jiedu Tang; detección HPLC; células microgliales BV2; polarización tipo M1; proteína de alta movilidad B1 (HMGB1) / receptor Toll-like 4 (TLR4) / factor nuclear κB (NF-κB)