El objetivo es investigar el mecanismo por el cual la fórmula Qi Fu Li Zhong Tang restaura la función de la barrera mucosa intestinal en la colitis ulcerosa (CU) mediante la regulación de la vía de señalización de la quinasa de cadena ligera de miosina (MLCK) / miosina ligera fosforilada (p-MLC). Métodos: se estableció un modelo de rata con CU tipo deficiencia de yang de bazo-riñón y un modelo in vitro de daño en la barrera intestinal. En experimentos in vivo se observaron el peso corporal de las ratas, las puntuaciones del índice de actividad de la enfermedad (DAI) y los cambios patológicos del colon; mediante ELISA se midieron los niveles de factor de necrosis tumoral-α (TNF-α), interleucina-1β (IL-1β) y mieloperoxidasa (MPO) en el colon. Se utilizó microscopía electrónica de transmisión (TEM) para observar la morfología y estructura de las uniones estrechas (TJ) en el colon de las ratas. En experimentos in vitro se empleó tinción con ciclofilina para observar la morfología de la F-actina en la línea celular de adenocarcinoma colorrectal humano Caco-2. Combinando experimentos in vivo e in vitro, se usaron inmunohistoquímica (IHC), inmunofluorescencia (IF) y Western blot para detectar la expresión y niveles de fosforilación de proteínas clave de TJ [zonula occludens-1 (ZO-1), ocludina (Occludin), claudina-1 (Claudin-1)] y de la vía de señalización MLCK/p-MLC. Resultados: en comparación con el grupo normal, el grupo modelo mostró una disminución significativa del peso corporal, aumento en las puntuaciones DAI y en la histopatología (P<0,01); los niveles de TNF-α, IL-1β y MPO en el tejido del colon aumentaron significativamente (P<0,01); la estructura de TJ estaba destruida, la expresión de ZO-1, Occludin y Claudin-1 disminuyó significativamente (P<0,05, P<0,01); las expresiones de las proteínas MLC, MLCK, p-MLC y p-MLCK aumentaron significativamente (P<0,01). En comparación con el grupo modelo, los grupos con distintas dosis de Qi Fu Li Zhong Tang mostraron aumento de peso corporal y reducción significativa en las puntuaciones DAI y en la histopatología (P<0,05, P<0,01); los niveles de MPO, TNF-α e IL-1β en el colon disminuyeron significativamente (P<0,05, P<0,01); en el grupo Qi Fu Li Zhong Tang + inhibidor la expresión de proteínas TJ ZO-1, Occludin y Claudin-1 aumentó significativamente (P<0,01), mientras que las expresiones de MLC, MLCK, p-MLC y p-MLCK se redujeron significativamente (P<0,01). En experimentos in vitro, comparado con el grupo normal, el grupo TNF-α mostró desorganización del citoesqueleto, disminución de la señal fluorescente de ZO-1, Occludin y Claudin-1, y aumento significativo en las expresiones de proteínas MLC, MLCK, p-MLC y p-MLCK (P<0,01). En comparación con el grupo TNF-α, el grupo Qi Fu Li Zhong Tang + inhibidor restauró la ordenada disposición del citoesqueleto de F-actina, la expresión y localización normales de proteínas TJ ZO-1, Occludin y Claudin-1; las expresiones de proteínas MLC, MLCK, p-MLC y p-MLCK disminuyeron significativamente (P<0,01). Conclusión: Qi Fu Li Zhong Tang podría mejorar la CU al estabilizar la estructura de TJ y reparar la integridad de la barrera intestinal mediante la inhibición de la vía de señalización MLCK/p-MLC.

colitis ulcerosa; Qi Fu Li Zhong Tang; barrera intestinal; uniones estrechas; quinasa de cadena ligera de miosina (MLCK)/fosforilación de cadena ligera de miosina (p-MLC)