El objetivo fue utilizar técnicas de proteómica para investigar el mecanismo de las diferencias en la eficacia terapéutica por etapas de la fórmula Qi Jia Rou Gan contra la fibrosis hepática. Se estableció un modelo de fibrosis hepática por etapas en ratas mediante inyección subcutánea de tetracloruro de carbono (CCl₄) y aceite de oliva. 104 ratas SD se dividieron aleatoriamente en 13 grupos: grupo normal (grupo Control), grupos Modelo a las 2, 4, 6, 8 semanas (Model-2W, 4W, 6W, 8W), grupos de fórmula Qi Jia Rou Gan a las 2, 4, 6, 8 semanas (QRF-2W, 4W, 6W, 8W), grupos de comprimidos compuestos Bie Jia Rou Gan a las 2, 4, 6, 8 semanas (FBR-2W, 4W, 6W, 8W). Después de dos semanas de intervención con los fármacos, se colectaron tejidos hepáticos y muestras de sangre de la aorta abdominal para análisis. Se realizaron tinciones con hematoxilina-eosina (HE), Masson y rojo Sirius (PSR) para observar lesiones patológicas en el hígado y depósito de fibras de colágeno; inmunohistoquímica (IHC) para detectar marcadores de fibrosis hepática. Se utilizaron analizadores bioquímicos automáticos para medir indicadores serológicos de función hepática; ELISA para medir niveles de marcadores de fibrosis hepática. Se analizaron tejidos hepáticos de los grupos Control, Modelo y QRF mediante proteómica cuantitativa no marcada para identificar proteínas diferenciales, validadas posteriormente por Western blot para proteínas clave; finalmente se realizó análisis bioinformático. Resultados: (1) El modelo de fibrosis hepática por etapas inducido por CCl₄ y aceite de oliva mostró resultados patológicos en semanas 2, 4, 6, 8 que correspondieron a los estadios F1, F2, F3 y F4 según el estándar Metavir; en comparación con el grupo Control, los grupos Modelo mostraron una expresión significativamente elevada de actina α de músculo liso (α-SMA) y colágeno tipo I (Collagen Ⅰ) (P<0.05), así como elevaciones significativas en indicadores de función hepática sérica: ALT, AST, ALP, DBIL, TBil (P<0.01), y marcadores de fibrosis hepática PⅢP, Ⅳ-C, HA y LN (P<0.05, P<0.01). El modelo por etapas se estableció con éxito. (2) En comparación con los grupos Modelo, los grupos tratados en los mismos tiempos mostraron reducción de la balonización de hepatocitos, disposición celular hepática más ordenada y disminución en la infiltración de células inflamatorias; las fibras de colágeno teñidas en azul se volvieron más delgadas, los septos fibrosos se redujeron; la superficie de las fibras de colágeno y la superficie teñida por PSR disminuyeron (P<0.05). La superficie positiva para α-SMA y Collagen Ⅰ disminuyó notablemente (P<0.05), y los niveles séricos de ALT, AST, ALP, DBIL, TBil y marcadores PⅢP, Ⅳ-C, HA, LN disminuyeron significativamente (P<0.05, P<0.01). La mejora fue más notable en la etapa F3 (P<0.01). (3) La proteómica mostró que 165 proteínas diferenciales mostraron una tendencia de regulación entre grupos Modelo y Control, y entre QRF y Modelo; los niveles de NQO1, MAPK1, Arg1, GSTA1 detectados por Western blot coincidieron con los resultados proteómicos. El análisis bioinformático mostró que estas proteínas se enriquecen en varias vías de señalización, incluyendo metabolismo de fármacos - citocromo P450, biosíntesis de arginina y vía de señalización PPAR, estrechamente relacionadas con la fibrosis hepática, lo que sugiere que la fórmula Qi Jia Rou Gan podría ejercer un efecto regulador por etapas de la fibrosis hepática a través de estas vías. Los resultados indican que la fórmula probablemente regula la fibrosis hepática mediante la modulación del metabolismo de los fármacos - citocromo P450, biosíntesis de arginina y la vía de señalización PPAR.

proteómica; Qi Jia Rou Gan; fibrosis hepática; modelo por etapas; regulación por etapas