El objetivo es investigar el mecanismo molecular por el cual el ácido danfenólico B (SalB) inhibe la transición epiteliomesénquima (EMT) en el cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) mediante la reducción de la expresión de la fosforribosilaminoimidazolcarboxilasa/sintetasa de amida succínica (PAICS). Se utilizaron las células NSCLC A549 y las células epiteliales bronquiales normales (BEAS-2B) como modelos. Se evaluó la viabilidad celular tras el tratamiento con SalB en concentraciones de 0, 50, 100, 200, 300, 400, 500 μmol/L durante 24 o 48 horas mediante el ensayo CCK-8 para seleccionar la concentración efectiva y segura. Se evaluó el efecto de SalB en la proliferación, ciclo celular y apoptosis de las células A549 mediante tinción con EdU y citometría de flujo. Los ensayos de cicatrización y de invasión Transwell evaluaron su efecto sobre la migración e invasión celular. La secuenciación de ARN junto con el análisis bioinformático identificaron genes diferenciales y enriquecimiento funcional. El acoplamiento molecular predijo la capacidad de unión de SalB a PAICS, que se evaluó mediante estabilidad térmica de la proteína PAICS con CETSA. El western blot detectó la expresión de PAICS y proteínas relacionadas con la EMT [E-cadherina, N-cadherina, vimentina, Snail, Slug]. Se realizaron experimentos de rescate funcional mediante sobreexpresión mediante transfección de plásmidos PAICS. En comparación con el grupo control, SalB inhibió la viabilidad de las células A549 de forma dependiente de la concentración (P<0,05), y su concentración efectiva (≤300 μmol/L) no tuvo un efecto inhibidor significativo en la proliferación celular BEAS-2B. Dentro de este rango, SalB inhibió significativamente la proliferación, migración e invasión de las células A549 e indujo el bloqueo en fase G0/G1 y apoptosis (P<0,05). El análisis transcriptómico mostró una regulación negativa significativa de PAICS, enriquecida en funciones relacionadas con la proliferación celular y la EMT. La bioinformática mostró que PAICS se sobreexpresa en adenocarcinoma pulmonar y se asocia con mal pronóstico (P<0,01). El acoplamiento molecular mostró una fuerte afinidad de unión entre SalB y PAICS (energía de enlace -9,1 kcal/mol). El CETSA mostró que SalB aumentó significativamente la estabilidad térmica de la proteína PAICS (P<0,05). El western blot mostró que SalB inhibía la expresión de PAICS dependiente de dosis, aumentaba E-cadherina y disminuía N-cadherina, vimentina, Snail y Slug (P<0,05). Los experimentos de rescate demostraron que la sobreexpresión de PAICS aumentaba significativamente la proliferación, migración e invasión de células A549, promovía la progresión del ciclo celular e inhibía la apoptosis (P<0,05). Además, en comparación con el grupo control + SalB a alta concentración, la sobreexpresión de PAICS revirtió parcialmente la inhibición de SalB sobre el fenotipo maligno y las proteínas relacionadas con la EMT (N-cadherina, vimentina, Snail, Slug), y redujo la expresión de E-cadherina (P<0,05, P<0,01), indicando que PAICS es un objetivo funcional clave en el efecto antitumoral de SalB. Conclusión SalB inhibe eficazmente el proceso EMT y la progresión del ciclo celular en células A549 mediante la regulación negativa de la expresión de PAICS, ejerciendo efectos anticancerígenos contra NSCLC. Este estudio revela que PAICS es un objetivo funcional clave en la regulación de EMT por SalB y proporciona una base experimental para el uso de SalB como un candidato potencial para inhibir la metástasis de NSCLC.

cáncer de pulmón no microcítico; ácido danfenólico B; fosforribosilaminoimidazolcarboxilasa; transición epitelial a mesenquimal; migración e invasión