El objetivo es aclarar si la fórmula de componentes Jinshui Huanxian II (ECC-JHF II) y la dureza de la matriz regulan la transición epitelial-mesenquimal (EMT) durante la intervención en la fibrosis pulmonar a través de la regulación de la integrina β1 (ITG β1). Método: Se estableció un modelo murino de fibrosis pulmonar mediante una única instilación intratraqueal de bleomicina (BLM). Para observar el progreso de la enfermedad en distintos períodos, los ratones se sacrificaron antes de la modelación y a los días 7, 14, 21, 28 y 42 después de la modelación para evaluar los indicadores relacionados. Para evaluar la eficacia de la intervención farmacológica, se administraron ECC-JHF II y pirfenidona (PFD) por vía oral durante 14 días a partir del día 29 post-modelación y luego se sacrificaron los ratones para evaluar la función pulmonar, los cambios patológicos, el depósito de colágeno, la dureza del tejido pulmonar y los marcadores EMT. In vitro, se prepararon hidrogeles compuestos de polietilenglicol (PEG) con diferentes durezas usando PEG- SH y PEG-MAL, polímeros de polietilenglicol octa-armados funcionalizados con tio y maleimida, respectivamente. Se añadieron dosis bajas, medias y altas de ECC-JHF II (15.31, 30.63, 61.25 mg·L^-1) a células epiteliales alveolares tipo II humanas cultivadas en matrices duras para observar el efecto de la intervención de ECC-JHF II en la EMT inducida por el factor de crecimiento transformante β1 (TGF- β1). ECC-JHF II se aplicó sobre células de tipo II cultivadas en matrices blandas (3.8 kPa) y duras (~GPa) y se evaluaron los niveles de ARNm y expresión fluorescente de los marcadores epiteliales E-cadherina (CDH1), mesenquimales N-cadherina (CDH2) y vimentina (VIM), así como ITG β1, mediante PCR en tiempo real e inmunofluorescencia. La expresión proteica de CDH1, CDH2 e ITG β1 se detectó mediante Western blot, y el mecanismo biomecánico de ECC-JHF II en EMT y fibrosis pulmonar se verificó mediante la inhibición y activación específica de ITG β1. Resultados: ECC-JHF II mejoró la fibrosis pulmonar inducida por BLM en ratones, manifestándose en un aumento significativo del volumen minuto ventilatorio (MV) y del flujo espiratorio al 50 % del volumen corriente (EF50) en comparación con el grupo modelo (p<0.05), y un aumento notable del volumen corriente (TV) tras el tratamiento (p<0.01). El análisis inmunohistoquímico mostró reducción de inflamación y daño alveolar, disminución del depósito de colágeno tipo I (COL-I) y disminución notable de la dureza del tejido pulmonar (p<0.01), mitigando el progreso de la enfermedad. La PCR en tiempo real mostró un aumento en la expresión de CDH1 y una disminución significativa de CDH2 y VIM en el grupo ECC-JHF II en comparación con el modelo (p<0.05, p<0.01), indicando la inhibición de EMT y mejora en fibrosis pulmonar. Los experimentos in vitro demostraron que ECC-JHF II y el ablandamiento de la matriz pueden revertir el fenotipo EMT, evidenciándose un aumento significativo de CDH1 y una reducción notable de CDH2 y VIM en las células cultivadas sobre matriz blanda (p<0.01, p<0.05). Además, ECC-JHF II inhibió la expresión de ITG β1 in vivo e in vitro, y mediante la reducción y activación específica de ITG β1 se confirmó la participación de ITG β1 en la regulación del efecto inhibitor de ECC-JHF II sobre EMT y fibrosis pulmonar. Conclusión: ECC-JHF II y el ablandamiento de la matriz pueden bloquear el proceso de EMT y mejorar la fibrosis pulmonar, posiblemente mediante la inhibición de ITG β1 involucrado en la transducción mecánica. Este estudio revela desde una perspectiva biomecánica el nuevo mecanismo de intervención de ECC-JHF II en la fibrosis pulmonar.

fórmula Jinshui Huanxian; fórmula compuesta; fibrosis pulmonar; dureza de la matriz; integrina β1; transición epitelial-mesenquimal