雷公藤及其配伍的临床与基础研究专题
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- 摘要：目的系统评价中药配伍雷公藤多苷（甙）片/雷公藤片（TWPT/TWT）治疗类风湿关节炎（RA）的安全性，并初步探索常用配伍方案增效减毒的网络调控机制。方法检索中文数据库（中国知网、万方数据库、维普数据库）和英文数据库（PubMed、Cochrane Library、EMbase）自建库至2021年7月TWPT/TWT治疗RA出现相关不良反应的研究，应用风险评价工具对研究进行质量评价，提取数据并采用Stata 15.0软件进行分析。进一步，运用中药整合药理学网络计算平台2.0（TCMIP v2.0，http：//www.tcmip.cn/），构建“药物靶标-效毒症状基因”相互作用网络，探析雷公藤常用配伍方案增效减毒的分子机制。结果共检索到2 132篇文献，最终纳入包含中药配伍TWPT/TWT治疗RA的临床研究文献18篇。系统评价结果显示，TWPT/TWT治疗RA的不良反应主要表现为消化系统、血液系统、生殖系统病变，其中以消化系统损害的发生率最高，而中药配伍可以有效改善TWPT/TWT所导致的不良反应［RR（95% CI）=0.45（0.30，0.66），P<0.01］。进而，亚组分析结果显示，RA患者的年龄、病程、配伍用药方案、用药剂量和疗程均会影响TWPT/TWT不良反应的发生。临床研究结果提示，白芍总苷（TGP）配伍TWPT/TWT应用最为广泛，且TGP减轻TWPT/TWT肝毒性的作用较其他中药更为显著，因此，本研究以该配伍方案为范例，进一步探索其缓解RA的“效-毒”关联机制。“药物靶标-效毒症状基因”相互作用网络挖掘结果显示，TGP-TWPT/TWT配伍的核心网络靶标主要通过调节机体免疫应答、减轻炎症反应、矫正代谢紊乱和改善细胞功能，来实现增效减毒作用。其中，参与“免疫-炎症”功能模块的白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-13（IL-13）是两药配伍增效和减毒的共同靶点；“机体代谢”功能模块中的内源性甾醇、胆汁酸和胆汁盐、胰岛素分泌等代谢途径与TWPT/TWT致肝毒和TGP减肝毒机制密切相关；而细胞功能调节通路，如干细胞因子（SCF）/酪氨酸激酶受体（KIT）信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路等，则共同参与了TWPT/TWT缓解RA和致肝毒的作用机制。结论临床采用合适的中药配伍TWPT/TWT治疗RA可有效增加其风湿病情改善作用且减轻其不良反应，其中，TGP-TWPT/TWT配伍方案的减毒作用最为显著。进一步的生物网络挖掘结果表明，TGP-TWPT/TWT配伍的减毒机制可能与两药靶标对白细胞介素信号通路和胆汁酸代谢途径的调节相关，二者配伍的协同增效机制可能通过作用于白细胞介素信号通路及细胞功能调节通路而实现。关键词：雷公藤制剂;中药配伍;临床合理用药;系统评价;网络药理学724|185|10<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-02-07
- 摘要：目的探讨菟丝子总黄酮配伍雷公藤多苷片对雌性生理小鼠卵巢生殖干细胞的作用，并从神经源性位点缺口同源蛋白（Notch）信号通路探讨其作用机制。方法将60只5周龄雌性昆明种小鼠随机分为正常组，1、2倍临床等效剂量雷公藤多苷片组（低、高剂量组13.65、27.3 mg·kg-1·d-1），菟丝子总黄酮（低、高剂量组150、300 mg·kg-1·d-1），配伍组（雷公藤多苷片低剂量+菟丝子总黄酮低剂量组），每组10只，连续给药3周后取材，计算子宫、卵巢脏脑指数，光镜下观察卵巢组织病理形态学改变；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中雌二醇含量；免疫荧光法观察卵巢上皮的卵巢生殖干细胞标志物果蝇VASA基因同源类似物（Mvh）、八聚体结合转录因子4（Oct4）、酪氨酸激酶受体（c-kit）、同源框蛋白质（Nanog）及Notch信号通路分子神经源性基因Notch同源蛋白1（Notch1）、Hes家族BHLH转录因子1（Hes1）、锯齿典型Notch配体1（Jagged1）的表达。结果与正常组比较，雷公藤多苷片低剂量组和高剂量组对小鼠子宫、卵巢的脏脑系数及形态学差异无统计学意义，仅可致小鼠闭锁卵泡数显著增加（P<0.01）；雷公藤多苷片低剂量对卵巢生殖干细胞标志物和Notch信号通路分子的表达有降低趋势，雷公藤多苷片高剂量下Mvh、c-kit、Nanog的表达水平明显降低（P<0.05，P<0.01），Notch1、Hes1表达水平显著降低（P<0.01）；菟丝子总黄酮低剂量组上述指标均明显升高（P<0.05，P<0.01）；与雷公藤多苷片低剂量组比较，配伍组闭锁卵泡数显著降低（P<0.01），Mvh、Nanog表达水平显著升高（P<0.01），Notch1、Hes1表达水平明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论卵巢生殖干细胞是雷公藤多苷片生殖毒性的源头靶点，菟丝子总黄酮可参与调控卵巢生殖干细胞途径缓解雷公藤多苷片所致的生殖损伤，其作用机制可能与Notch信号通路相关。关键词：雷公藤多苷片;菟丝子总黄酮;配伍;卵巢生殖干细胞;神经源性位点缺口同源蛋白（Notch）信号通路221|122|17<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-02-07
- 摘要：目的基于活化T细胞核因子2（NFAT2）/环氧化酶-2（COX-2）通路探讨雷公藤多苷片（TWPT）防治糖尿病肾病（DN）肾脏损伤的可能作用机制。方法选取雄性清洁级SD大鼠42只，适应性喂养1周后随机分为正常组8只，造模组34只。正常组予以正常饲养，造模组采用高脂高糖饮食喂养1周后予腹腔注射链脲佐菌素（STZ）法建立DN大鼠模型，除去造模过程中死亡及失败，选取造模成功的24只随机分为模型组、缬沙坦（8.33 mg·kg-1·d-1）组、TWPT（5 mg·kg-1·d-1）组。正常组和模型组均予等体积生理盐水灌胃，6周后测量体质量，收集大鼠尿液，腹主动脉取血后处死取材，生化检测血清中的尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血脂血糖及尿液中的24 h尿蛋白总量（24 h UTP），苏木素-伊红（HE）及马松（Masson）染色观察肾脏病理，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中的NFAT2、COX-2表达水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾组织中NFAT2、COX-2蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肾组织中NFAT2、COX-2 mRNA表达。结果与正常组比较，模型组大鼠24 h UTP、BUN、SCr、CHO、TG、FBG及血清NFAT2、COX-2表达显著升高（P<0.01），肾组织中的NFAT2、COX-2蛋白及mRNA表达显著升高（P<0.01），肾脏病理示肾小球体积增大，系膜细胞轻度增生，系膜基质增宽；与模型组比较，TWPT组大鼠24 h UTP、BUN、SCr、CHO、TG、FBG均明显降低（P<0.05，P<0.01）；肾脏病理示肾小球形态基本正常，血清中NFAT2、COX-2表达显著降低（P<0.01），肾组织中的NFAT2、COX-2 mRNA和蛋白表达显著下降（P<0.01）。结论TWPT可减轻DN大鼠24 h UTP、保护肾功能、改善肾脏病理，其作用机制可能与下调血清及肾组织NFAT2/COX-2表达相关。关键词：雷公藤多苷;糖尿病肾病;活化T细胞核因子2（NFAT2）/环氧化酶-2（COX-2）通路;实验研究188|76|5<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-02-07
- 摘要：目的探究肝脏药物代谢关键酶细胞色素P4502D6（CYP2D6）、细胞色素P4503A4（CYP3A4）在甘草水提物对急性肝损伤发挥保护作用的分子机制。方法将健康雄性昆明种小鼠分为正常组、模型组、甘草水提物低、中、高剂量组（5、10、15 g·kg-1·d-1）及阳性药甘草酸二铵组（75 mg·kg-1·d-1），每组10只。以预防给药1周后采用雷公藤多苷片270 mg·kg-1单次灌胃诱导急性肝损伤模型，作用18 h后采集样本。采用苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏病理变化；生化法检测血清中肝功能指标丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）、碱性磷酸酶（ALP）和总胆红素（TBIL）的含量及肝细胞氧化应激指标丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测肝脏药物代谢关键酶CYP2D6、CYP3A4的mRNA及蛋白表达水平。结果与正常组比较，模型组小鼠肝细胞出现显著水肿及炎性细胞浸润（P<0.01），AST、ALT、γ-GT、ALP、TBIL明显增高（P<0.05），MDA升高、SOD降低（P<0.01），CYP2D6和CYP3A4的mRNA及蛋白表达量明显降低（P<0.05）；正常组小鼠肝组织结构完整未见明显异常，与模型组比较，甘草水提物低、中、高剂量组和甘草酸二铵组可显著减轻肝细胞水肿程度及炎性细胞浸润程度（P<0.01），AST、ALT、γ-GT、ALP、TBIL的含量不同程度降低，MDA降低（P<0.01），SOD升高（P<0.01），CYP2D6和CYP3A4的mRNA及蛋白的表达量不同程度升高。结论甘草水提物对雷公藤多苷片所致急性肝损伤的保护作用，可能与降低血清中AST、ALT、γ-GT、ALP、TBIL的水平；抑制肝细胞中MDA升高，增加SOD酶活力；提高肝脏药物代谢关键酶CYP2D6和CYP3A4的活性进而加速毒性物质代谢有关。关键词：雷公藤多苷片;肝损伤;甘草;细胞色素P450275|146|8<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-02-07
- 摘要：目的探讨新风胶囊对脾虚湿盛证类风湿关节炎患者免疫炎症指标的影响。方法将102例患者按随机数字表法随机分为对照组和观察组，每组各51例。两组患者均给予甲氨蝶呤片治疗，观察组同时给与新风胶囊治疗，两组疗程均为12周。比较两组患者治疗前后28处关节疾病活动度评分（DAS28）、视觉模拟评分（VAS）、晨僵时间、血沉（ESR）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸肽抗体（anti-CCP）、血管内皮生长因子（VEGF）、血清淀粉样蛋白A（SAA）的变化；比较两组患者疗效及不良发应发生率；构建Apriori关联规则模型、随机行走模型来评价新风胶囊对hs-CRP、ESR、RF、SAA、VEGF、anti-CCP的改善情况。结果本研究无病例脱落。两组治疗前各项指标无统计学差异。经12周治疗后，观察组总有效率90.19%（46/51），明显高于对照组的74.51%（38/51）（χ2＝4.320，P<0.05）；观察组DAS28、VAS、晨僵时间较对照组改善更为明显（P<0.05）；Apriori关联规则模型结果显示，观察组新风胶囊的使用与RF、ESR、hs-CRP、SAA、VEGF的降低有强关联关系；随机行走模型结果显示，观察组hs-CRP、ESR、RF、SAA、VEGF的改善系数均优于对照组，对照组anti-CCP的改善系数优于观察组；观察组对hs-CRP、ESR、RF、SAA、VEGF的改善程度明显优于对照组（P<0.05）；比较不良反应的发生率，观察组明显低于对照组（χ2＝4.057，P<0.05）。结论在甲氨蝶呤片治疗基础上，给与新风胶囊治疗可有效改善类风湿性关节炎脾虚湿盛证的免疫炎症水平，降低不良反应发生率。关键词：新风胶囊;类风湿关节炎;免疫炎症;脾虚湿盛证313|119|7<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-02-07
- 摘要：目的评价雷公藤多苷片（TWPT）联用常用传统抗风湿病情药（csDMARDs）包括甲氨蝶呤（MTX）和/或来氟米特（LEF）对类风湿关节炎（RA）患者自身抗体及其相关指标的影响。方法检索PubMed、EMBASE、WebofScience、Cochrane图书馆、中国知网（CNKI）、VIP数据库、万方数据库、中国生物医学文献服务系统（SinoMed）等数据库中关于TWPT与MTX和/或LEF联用治疗RA患者截止到2021年12月1日的随机对照试验（RCT）。主要结局指标包括类风湿因子（RF）、抗瓜氨酸化蛋白抗体（ACPA），次要结局指标包括免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）和药物不良反应事件（ADE）。结果共纳入31项RCT，2 643名成年患者，其中TWPT联用MTX共20项，TWPT联用LEF共10项，TWPT同时联用MTX和TWPT仅1项，随访时间从2周到13个月不等；与csDMARDs单用相比，联用TWPT显著改善了RA患者血清RF［SMD=-2.45， 95% CI（-2.97， -1.93）］， P<0.000 01］，anti-CCP［SMD=-1.41，95% CI（-2.35， -0.48）， P=0.003］，IgM［SMD=-1.90， 95% CI（-3.03， -0.76）， P=0.001］和IgA［SMD=-1.18， 95% CI（-2.23， -0.12）， P=0.03］水平；对IgG［SMD=-1.02， 95% CI（-2.04， 0.01）， P=0.05］水平和ADE［RR=0.87， 95% CI（0.66， 1.15）， P=0.32］无显著影响。结论基于现有证据，临床TWPT联用csDMARDs比csDMARDs单用能更显著改善RA患者自身抗体水平，且不增加不良反应事件发生率。但由于所纳入RCT在质量及数量上存在一定局限性，相关结论仅作为RA临床诊疗的参考，仍然需更多高质量的研究进一步证实其疗效。关键词：雷公藤多苷片;类风湿关节炎;自身抗体;Meta分析440|92|10<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-02-07
- 摘要：目的通过雷公藤多苷片治疗类风湿关节炎疗效应答和诱发药源性肝损伤相关分子互作网络挖掘，揭示雷公藤多苷片的“效-毒”关联机制。方法利用前期已获得临床来源的雷公藤多苷片疗效应答相关基因表达谱和诱发药源性肝损伤相关蛋白质表达谱数据，根据生物分子间的相互作用信息，构建雷公藤多苷片“效-毒”关联网络，并通过计算网络节点的拓扑特征值，筛选关键网络靶标和挖掘其生物学功能。结果经临床转录组学检测，获得雷公藤多苷片治疗类风湿关节炎疗效相关差异表达基因119个。经临床蛋白质组学检测，获得雷公藤多苷片诱发药源性肝损伤相关差异表达蛋白质49个。进一步的临床症状富集分析表明，雷公藤多苷片治疗类风湿关节炎的效应基因与痹症相关中医症状和医学临床表型紧密相关，雷公藤多苷片诱发药源性肝损伤相关的差异蛋白质最显著富集于消化系统异常的临床症状，可见，上述多组学数据能够表征雷公藤多苷片治疗类风湿关节炎和诱发药源性肝损伤的主要临床症状。进而，“效-毒”关联网络挖掘表明，雷公藤多苷片治疗类风湿关节炎的关键效应靶标和诱发药源性肝损伤核心致毒蛋白质均参与机体“免疫-炎症”失衡的调节，特别在中性粒细胞脱颗粒、补体级联反应、蛋白质翻译后修饰介导的免疫炎症反应等方面发挥着重要作用；二者还显著富集于肾素-血管紧张素系统（RAS）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路等与细胞增殖和细胞周期调控密切相关的信号通路，以及参与糖原代谢和氧化还原反应等肝脏功能直接相关的生物学通路。结论本研究采用临床表型组学、临床转录组学和蛋白质组学整合的研究策略，系统阐释了雷公藤多苷片“效-毒”的关联特征和分子机制，为探索雷公藤多苷片“增效减毒”机制奠定良好的数据基础。关键词：雷公藤多苷片;类风湿关节炎;药源性肝损伤;多组学整合;“效-毒”关联网络355|402|15<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-02-07
