地黄饮子防治阿尔茨海默病机制研究专题
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- 摘要：星形胶质细胞是中枢神经系统（CNS）重要的神经细胞类型，主要发挥营养与支持作用。星形胶质细胞与神经元之间存在密切的能量与物质偶联关系，能量偶联与物质偶联两者紧密关联、交互为用。近年来大量研究显示，星形胶质细胞-神经元偶联失衡在阿尔茨海默病（AD）的发生与进展中发挥核心作用，星形胶质细胞-神经元偶联网络失衡已成为AD干预的重要靶标并受到日益关注。中医学认为，AD的主要病机是肾虚髓亏，临床常用益肾填髓中药方剂治疗AD取得较好效果。研究发现大量益肾填髓方剂对星形胶质细胞-神经元偶联失衡具有调节和保护作用，中药方剂治疗AD的益肾填髓功效可能与其调节星形胶质细胞-神经元偶联失衡有一定的内在联系。该文就星形胶质细胞-神经元偶联失衡与AD肾虚髓亏病机之间可能内在联系及益肾填精中药干预机制的研究进展做一综述。关键词：阿尔茨海默病;星形胶质细胞;星形胶质细胞-神经元偶联;益肾填精389|565|3<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-05-17
- 摘要：目的研究地黄饮子调节磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路，改善阿尔茨海默病（AD）小鼠脑组织星形胶质细胞损伤和糖酵解，提高AD小鼠认知功能的作用机制。方法将40只4月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为模型组、模型+地黄饮子（2.5 g·kg-1）组，每组20只；同背景、同月龄C57BL/6J小鼠40只，随机分为正常组、正常+地黄饮子（2.5 g·kg-1）组，每组20只。正常+地黄饮子组和模型+地黄饮子组给予地黄饮子灌胃，正常组和模型组均给予等量无菌生理盐水，每天灌胃1次，连续给药150 d。Morris水迷宫实验测试小鼠定位航行与空间探索能力。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠脑组织PI3K、Akt蛋白及其磷酸化水平，以及磷酸果糖激酶-1（PFK-1）、乙醛脱氢酶3家族B2（ALDH3B2）蛋白表达。免疫荧光法评估星形胶质细胞形态及ALDH3B2的表达。结果与正常组比较，模型组小鼠在定位航行实验第2~5天中逃避潜伏期明显延长（P<0.05，P<0.01），穿越平台目标区域次数和目标象限停留时间明显减少（P<0.05，P<0.01），在相对象限停留时间明显增加（P<0.05），星形胶质细胞胞体表面积和细胞突起总长度明显增加（P<0.05，P<0.01），PI3K、Akt磷酸化水平、ALDH3B2、PFK-1蛋白表达量显著降低（P<0.01），而正常+地黄饮子组小鼠的上述实验指标差异无统计学意义。与模型组比较，模型+地黄饮子组小鼠在定位航行实验第2~5天中逃避潜伏期明显缩短（P<0.05，P<0.01），穿越平台次数和目标象限停留时间明显增加（P<0.05，P<0.01），在相对象限停留时间明显降低（P<0.05），星形胶质细胞胞体表面积和细胞突起总长度明显减少（P<0.05），PI3K、Akt磷酸化水平和ALDH3B2、PFK-1蛋白表达量显著提高（P<0.01）。结论地黄饮子通过激活PI3K/Akt信号通路，上调PFK-1、ALDH3B2蛋白表达量，保护AD小鼠脑组织星形胶质细胞损伤，提高糖酵解活性，改善AD小鼠学习记忆能力。关键词：地黄饮子;阿尔茨海默病（AD）;星形胶质细胞;糖酵解;磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）;磷酸果糖激酶-1（PFK-1）426|149|7<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-05-17
- 摘要：目的研究地黄饮子改善阿尔茨海默病（AD）模型小鼠脑组织星形胶质细胞损伤，调节能量代谢和自噬障碍的作用机制。方法4月龄雄性APP/PS1转基因小鼠40只，随机分为模型组、模型+地黄饮子组（2.5 g·kg-1），每组20只；同背景、同月龄C57BL/6J小鼠40只，随机分为正常组、正常+地黄饮子组（2.5 g·kg-1），每组20只。正常组和模型组均给予等量无菌生理盐水，每天灌胃1次，连续给药150 d。通过新物体识别实验和小鼠跳台实验评价小鼠学习记忆能力。免疫荧光法和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。高效液相色谱法检测小鼠脑组织中三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、单磷酸腺苷（AMP），并计算能荷（EC）水平。Western blot检测小鼠脑组织肝激酶B1（LKB1）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、自噬激活激酶1（ULK1）、哺乳动物雷帕霉素靶点（mTOR）的磷酸化水平及自噬相关蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62的表达水平。结果与正常组比较，模型组小鼠新物体识别实验辨别指数显著下降（P<0.01），跳台实验停留潜伏期显著缩短，错误次数显著增加，星形胶质细胞GFAP蛋白表达显著上调，脑组织ATP、ADP含量及EC值显著降低，AMP含量显著上升，AMPK、LKB1、mTOR磷酸化水平和p62蛋白表达显著升高，ULK1磷酸化水平和Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达显著下降（P<0.01）；正常+地黄饮子组小鼠中上述实验指标则差异无统计学意义。与模型组比较，模型+地黄饮子组小鼠新物体识别实验辨别指数明显增加（P<0.05），跳台实验停留潜伏期显著延长（P<0.01），错误次数显著减少（P<0.01），星形胶质细胞GFAP蛋白表达量明显下降（P<0.05），脑组织ATP、ADP含量及EC值明显升高（P<0.05，P<0.01），AMP含量明显下降（P<0.05），AMPK、LKB1和mTOR磷酸化水平和p62蛋白表达显著降低，ULK1磷酸化水平和Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论地黄饮子通过保护星形胶质细胞，改善AD小鼠脑内能量代谢和自噬障碍，提高模型小鼠学习记忆能力。关键词：地黄饮子;阿尔茨海默病;星形胶质细胞;能量障碍;自噬;哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/自噬激活激酶1（mTOR/ULK1）272|115|5<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-05-17
- 摘要：目的探讨地黄饮子改善AD小鼠脑中星形胶质细胞损伤及保护突触结构功能的作用机制。方法40只4月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为模型组、模型+地黄饮子（2.5 g·kg-1）组，每组20只；40只同背景、同月龄C57BL/6J小鼠，随机分为正常组、正常+地黄饮子（2.5 g·kg-1）组，每组20只。正常+地黄饮子组和模型+地黄饮子组给予地黄饮子灌胃，正常组和模型组均给予等量无菌生理盐水，每天灌胃1次，连续给药150 d。采用小鼠避暗箱实验和Y迷宫自由交替实验测试小鼠学习记忆能力。采用液质联用质谱仪（LC-MS）测定样品中谷氨酸（Glu）和谷氨酰胺（Gln）含量；长时程增强（LTP）实验检测脑组织的突触可塑性；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠脑组织兴奋性氨基酸转运蛋白2（EAAT2），突触后致密物-95（PSD95）及突触素（SYN）的表达水平；免疫荧光法评估EAAT2的定位及表达；比色法检测小鼠脑组织Na+-K+ ATP酶活性。结果与正常组比较，模型组小鼠在避暗箱实验中停留潜伏期显著缩短（P<0.01），错误次数显著增多（P<0.01），Y迷宫实验中自发交替反应率显著减少（P<0.01），进臂总次数差异无统计学意义，EAAT2，PSD95和Synaptophysin表达量显著降低（P<0.01），Na+-K+ ATP酶活性显著下降（P<0.01），Glu水平显著升高（P<0.01），Gln水平显著降低（P<0.01），相对群峰电位（PS）幅值和兴奋性突触后电位（EPSP）斜率明显降低（P<0.05，P<0.01），而正常+地黄饮子组小鼠的上述实验指标差异没有统计学意义。与模型组比较，模型+地黄饮子组小鼠在避暗箱实验中停留潜伏期明显增加（P<0.05），错误次数显著减少（P<0.01），Y迷宫实验中自发交替反应率显著升高（P<0.01），进臂总次数差异无统计学意义，EAAT2，PSD95和Synaptophysin表达量显著升高（P<0.01），Na+-K+ ATP酶活性显著增加（P<0.01），Glu水平显著降低（P<0.01），Gln水平显著升高（P<0.01），相对PS幅值和EPSP斜率显著升高（P<0.01）。结论地黄饮子通过保护星形胶质细胞，增加Glu摄取，减少其异常累积，保护突触结构与功能，改善AD小鼠认知功能障碍。关键词：地黄饮子;阿尔茨海默病;星形胶质细胞;突触结构;谷氨酸;长时程增强223|114|6<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2023-05-17
