当归芍药散治疗阿尔茨海默病作用机制研究专题
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- 摘要：阿尔茨海默病（AD）是一种起病隐匿并呈进行性发展的神经系统退行性疾病，已成为全球重大健康和社会经济问题。AD发病机制十分复杂，存在β淀粉样蛋白过度沉积、Tau蛋白过度磷酸化、氧化应激、炎症等多种假说，因此迫切需要多途径、多环节、多靶点的整体综合调治措施的干预。这正是中医药的特色与优势。开展和加强中医药治疗本病的研究，具有重大意义。当归芍药散出自《金匮要略》，该方肝脾同调、血水并治，原为疗妇人之疾而设，自20世纪80年代末首次被日本学者用于治疗AD获效后，逐渐被广泛用于临床，疗效确切。阐明此方作用机理有助于其治疗优势的发挥。该文综述近年来相关实验研究进展，就其减少β-淀粉样蛋白过度沉积、抑制Tau蛋白异常磷酸化、改善氧化应激损伤、抑制炎症反应、调节乙酰胆碱相关酶类、增加α7烟碱样乙酰胆碱受体、调节脂质代谢、改善肠道菌群、拮抗神经细胞凋亡、降低胞内Ca2+超载并提高雌二醇激素水平等机制进行论述，以期为阐明此方治疗AD的科学内涵提供文献支持，并为进一步研究奠定基础。关键词：当归芍药散;阿尔茨海默病;作用机制;实验研究;综述636|582|4<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2022-11-17
- 摘要：目的探讨当归芍药散（DSS）调控泛素-蛋白酶体途径（UPP）改善SAMP8阿尔茨海默病（AD）模型小鼠认知能力的作用机制。方法15只SAMR1小鼠为正常组，60只SAMP8小鼠随机分为模型组及DSS高、中、低剂量组（57.6、28.8、14.4 g·kg-1·d-1），连续灌胃给药8周。Morris水迷宫实验测试定位航行与空间探索能力；苏木素-伊红（HE）染色法检测海马CA1区神经元病理结构改变；免疫组化法（IHC）和酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测海马β淀粉样蛋白（Aβ）和磷酸化（p）-Tau蛋白含量，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马组织泛素（Ub）、泛素连接酶E3（E3）、26S蛋白酶体、泛素羧基端水解酶1（UCHL1）、UCHL3 mRNA和蛋白表达。结果与正常组比较，模型组小鼠逃避潜伏期延长（P<0.05），穿越平台象限次数和平台象限停留百分比减少（P<0.05）；CA1区神经元明显减少、胞体聚缩；β-淀粉样前体蛋白（β-APP）和p-Tau阳性细胞数量明显增多（P<0.05）；Aβ和p-Tau蛋白水平升高（P<0.05）；Ub mRNA和蛋白表达升高（P<0.05）；E3、26S蛋白酶体、UCHL1、UCHL3 mRNA和蛋白表达下降（P<0.05）。与模型组比较，DSS高、中剂量组逃避潜伏期缩短（P<0.05），穿越平台象限次数和停留百分比增加（P<0.05）；DSS各剂量组CA1病理改变明显改善；各剂量组β-APP及中、低剂量组p-Tau阳性染色细胞数量减少（P<0.05）；各剂量组Aβ及p-Tau蛋白水平下降（P<0.05）；各剂量组 Ub mRNA表达降低（P<0.05），高、中剂量组26S、E3、UCHL3 mRNA表达水平升高（P<0.05），中剂量组UCHL1 mRNA表达升高（P<0.05）；各剂量组Ub蛋白表达降低，高、中剂量组26S、E3、UCHL1+3蛋白表达升高（P<0.05）。结论DSS可改善SAMP8小鼠认知能力，其机制可能与降低UPP途径中Ub及升高E3、26S、UCHL1、UCHL3的表达，减少Aβ和p-Tau异常沉积有关。关键词：当归芍药散;阿尔茨海默病;泛素-蛋白酶体途径（UPP）267|89|5<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2022-11-17
- 摘要：目的探讨当归芍药散（DSS）含药血清对β淀粉样蛋白（Aβ）1-40损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞的保护作用及对泛素-蛋白酶体途径（UPP）的调控作用机制。方法采用Aβ1-40干预PC12细胞制备损伤模型。实验分为空白组、模型组、DSS含药血清高、中、低剂量组（10%、5%、2.5%）。细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞Aβ和磷酸化（p）-Tau蛋白含量，免疫荧光细胞化学（ICC）标记UPP重要靶点泛素（Ub）、泛素连接酶E3（E3）、26S蛋白酶体、泛素羧基端水解酶1（UCHL1）和UCHL3蛋白的表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Ub、E3、26S、UCHL1、UCHL3 mRNA和蛋白的表达。结果根据CCK-8实验结果，筛选5 μmol·L-1、48 h为PC12细胞损伤最佳造模条件。与空白组比较，模型组细胞存活率降低（P<0.05）、凋亡率升高（P<0.05），Aβ及p-Tau表达升高（P<0.05），Ub蛋白及mRNA表达升高，26S、E3、UCHL1+3蛋白及mRNA表达降低（P<0.05）。与模型组比较，DSS中剂量组细胞存活率升高（P<0.05）；DSS各剂量组细胞凋亡率下降（P<0.05）；DSS各剂量组Aβ含量降低（P<0.05），DSS高、中剂量组p-Tau 含量降低（P<0.05）；DSS各剂量组Ub mRNA表达降低（P<0.05），DSS各剂量组26S mRNA表达升高（P<0.05），DSS中剂量组UCHL1 mRNA表达升高（P<0.05），DSS高、中剂量组E3和UCHL 3mRNA表达升高（P<0.05）；DSS各剂量组Ub蛋白表达降低，DSS高、中剂量组26S、E3、UCHL1+3蛋白表达升高，以DSS中剂量效果最佳。结论DSS含药血清可提高细胞存活率、降低细胞凋亡率、清除Aβ和p-Tau蛋白沉积，对Aβ1-40损伤PC12细胞有保护作用，其作用可能是通过调控UPP降低Ub表达及升高26S、E3、UCHL1及UCHL3表达来发挥。关键词：当归芍药散;阿尔茨海默病（AD）;泛素-蛋白酶体途径（UPP）;大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞303|60|4<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2022-11-17
- 摘要：目的基于16S rDNA测序研究当归芍药散（DSS）对阿尔茨海默病（AD）模型小鼠SAMP8肠道菌群的影响。方法按随机数字表法，将24只7月龄SAMP8小鼠分为DSS低、中、高剂量组（14.4、28.8、57.6 g·kg-1·d-1）及模型组，另取6只同月龄SAMR1小鼠，为正常组。连续给药8周后，采用16S rDNA高通量测序技术检测小鼠粪便肠道菌群的变化；Morris水迷宫实验评价小鼠定位航行与空间探索能力；尼氏染色观察海马CA1区神经元病理变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测海马β淀粉样蛋白（Aβ）和Tau蛋白过度磷酸化（p-Tau）蛋白含量。结果与正常组比较，模型组小鼠肠道菌群α多样性降低、β多样性明显改变；逃避潜伏期延长（P<0.05），穿越平台象限次数和平台象限停留时间明显减少（P<0.05）；CA1区神经元尼氏小体数量明显减少（P<0.05）；Aβ和p-Tau蛋白水平明显升高（P<0.05）。DSS干预后，各组小鼠肠道菌群α多样性均增加，中、高剂量组β多样性与正常组相似、以中剂量组效果最佳；在门水平上，厚壁菌门丰度明显增加（P<0.05），拟杆菌门、变形菌门丰度明显降低（P<0.05）；在属水平上，乳酸杆菌等菌属丰度明显增加（P<0.05），拟杆菌、幽门螺杆菌、理研菌、副杆状菌、萨特氏菌、黏液性菌等菌属丰度明显降低（P<0.05）；小鼠逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）、穿越平台象限次数和平台象限停留时间明显增加（P<0.05）；尼氏小体数量明显增加（P<0.05），Aβ和p-Tau蛋白水平明显降低（P<0.05）；Pearson相关性分析表明黏液性菌、拟杆菌和萨特氏菌菌属丰度与SAMP8小鼠认知能力呈负相关，乳酸杆菌和Butyricimonas菌属丰度与SAMP8小鼠认知能力呈正相关。结论DSS可改善SAMP8小鼠认知能力，其作用机制可能与调节肠道菌群多样性、群落组成有关。关键词：阿尔茨海默病（AD）;当归芍药散;SAMP8;肠道菌群259|112|8<HTML><印刷PDF><网络PDF>更新时间：2022-11-17
