Effect of Serum from Kidney Yang Deficiency Rats on Expression of <italic style="font-style: italic">β</italic>-catenin/OPG/RANKL in OB-OC Co-culture System and Regulatory of Icariin

Wei LI; Wen-long YANG; Han-ting XIA; Duan-guang CAO; Fo YANG; Pu LIU; Jiang-yuan LIU; Yun-feng LUO; Zhi-jun YANG; Feng-yun YANG

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20201341

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Effect of Serum from Kidney Yang Deficiency Rats on Expression of β-catenin/OPG/RANKL in OB-OC Co-culture System and Regulatory of Icariin

Pharmacology | 更新时间：2020-08-11

- Effect of Serum from Kidney Yang Deficiency Rats on Expression of β-catenin/OPG/RANKL in OB-OC Co-culture System and Regulatory of Icariin
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 26, Issue 13, Pages: 118-124(2020)
- 作者机构：
  
  1.江西中医药大学，南昌 330004
  2.江西中医药大学附属医院，南昌 330006
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20201341
  CLC： R2-0;R285.5;R274
- Published Online：20 April 2020，
  
  Published：05 July 2020
- 稿件说明：
移动端阅览
李威,杨文龙,夏汉庭等.肾阳虚大鼠血清对OB-OC共育体系中β-catenin/OPG/RANKL表达的影响及淫羊藿苷的调控作用[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(13):118-124.

LI Wei,YANG Wen-long,XIA Han-ting,et al.Effect of Serum from Kidney Yang Deficiency Rats on Expression of β-catenin/OPG/RANKL in OB-OC Co-culture System and Regulatory of Icariin[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(13):118-124.
李威,杨文龙,夏汉庭等.肾阳虚大鼠血清对OB-OC共育体系中β-catenin/OPG/RANKL表达的影响及淫羊藿苷的调控作用[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(13):118-124. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20201341.

LI Wei,YANG Wen-long,XIA Han-ting,et al.Effect of Serum from Kidney Yang Deficiency Rats on Expression of β-catenin/OPG/RANKL in OB-OC Co-culture System and Regulatory of Icariin[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(13):118-124. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20201341.

摘要

目的

观察肾阳虚大鼠血清对共育体系中骨保护素（OPG），胞质蛋白（

-catenin）及核转录因子-

B受体活化因子配体（RANKL）蛋白表达的影响及淫羊藿苷对其的调控，进一步探究其诱导骨质疏松发生的可能机制。

方法

取16只雄性SD大鼠，随机分为空白组和模型组，每组8只，模型组以10 mL·kg

-1

腺嘌呤灌胃建立肾阳虚模型，造模成功后收集血清。体外分离培养成骨细胞（OB）和破骨细胞（OC），采用茜素红、碱性磷酸酶（ALP）及姬姆萨染色观察并鉴定OB，OC用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色鉴定，transwell小室建立OB-OC共育体系，设置淫羊藿苷组（100 μmol·L

-1

），空白组，淫羊藿苷（100 μmol·L

-1

）+血清组（10%肾阳虚血清），血清组（10%肾阳虚血清）及Dickkopf1（DKK-1）药物组（100 μg·L

-1

），干预共育体系2 d后，对OC进行计数，微板酶标法检测培养液中TRAP及ALP的含量，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组OPG，

-catenin及RANKL蛋白的表达。

结果

与空白组比较，血清组ALP活性，

-catenin及OPG蛋白表达均明显降低（

0.05），而OC数量，TRAP活性及RANKL蛋白的表达明显升高（

0.05）；与血清组比较，淫羊藿苷组ALP活性显著降低（

0.01），与淫羊藿苷组比较，淫羊藿苷+血清组ALP活性及OPG蛋白表达明显降低（

0.05），TRAP活性及RANKL表达明显升高（

0.05）。

结论

肾阳虚大鼠血清能诱导骨质疏松的发病，其作用机制可能是通过降低ALP活性，下调OPG及

-catenin蛋白的表达，同时提高TRAP活性，上调RANKL蛋白的表达来实现的。

Abstract

Objective

To observe the effect of serum of kidney Yang deficiency rats on the expression of

-catenin，osteoprotegerin(OPG) and nuclear transcription factor-

B receptor activator ligand (RANKL) in the co-culture system and regulatory of icariin on it， and to explore the possible mechanism of inducing osteoporosis.

Method

The 16 male SD rats were randomly divided into blank group and model group， 8 rats in each group. 10 mL·kg

-1

adenine was administrated to stomach to establish kidney yang deficiency model. Serum was separated and extracted after the model was established successfully. Isolation and culture of osteoblast（OB） and osteoclast（OC）

in vitro

， OB was observed and identified by alkaline phosphatase（ALP），alizarin red and Giemsa staining， OC was identified by tartrate resistant acid phosphatase（TRAP） staining， OB-OC co-culture system was established in transwell cell， icariin group（100 μmol·L

-1

）， blank group， icariin（100 μmol·L

-1

） + serum group， serum group and Dickkopf1（DKK-1） drug（100 μg·L

-1

） were set up in group ， 2 days after intervention of co-culture system， OC was counted， ALP and TRAP in supernatant were detected by microplate enzyme labeling， and the expression of OPG，

-catenin and RANKL in each group was detected by Western blot.

Result

Compared with blank group， the ALP activity，

-catenin and OPG protein expression in serum group were significant reduction （

0.05）， while the OC quantity， TRAP activity and RANKL protein expression were marked increase （

0.05）. Compared with serum group， ALP activity of icariin group decreased significantly （

0.01）， Compared with icariin group， ALP activity and OPG protein expression decreased （

0.05）， trap activity and RANKL expression increased （

0.05） in icariin + serum group.

Conclusion

The serum of kidney Yang deficiency rats can induce the occurrence of osteoporosis， and the mechanism of action may be through inhibition of ALP activity， down regulating the expression of

-catenin and OPG protein， increasing the activity of TRAP and the expression of RANKL protein.

关键词

Keywords

references

张智海，刘忠厚，李娜，等 . 中国人骨质疏松症诊断标准专家共识 [J]. 中国骨质疏松杂志， 2014 ， 20 （ 9 ）: 1007 - 1010 .

张珍珍，李李 . 皖北地区40~65岁女性骨质疏松的危险因素调查 [J]. 中国老年学杂志， 2017 ， 37 （ 8 ）: 2042 - 2045 .

白璧辉，谢兴文，李鼎鹏，等 . 我国近5年来骨质疏松症流行病学研究现状 [J]. 中国骨质疏松杂志， 2018 ， 24 （ 2 ）: 253 - 258 .

韩亚军，帖小佳，伊力哈木·托合提 . 中国中老年人骨质疏松症患病率的Meta分析 [J]. 中国组织工程研究， 2014 ， 18 （ 7 ）: 1129 - 1134 .

谢兴文，李建国，李宁，等 . 基于“益肾生髓”理论探讨绝经后骨质疏松症的病机及临床治疗 [J]. 中国中医基础医学杂志， 2019 ， 25 （ 11 ）: 1635 - 1638 .

何丽娟，初杰 . 从中医肾精论干细胞 [J]. 辽宁中医药大学学报， 2015 ， 17 （ 7 ）: 142 - 144 .

李泽钊，邓建强 . 地仲强骨胶囊治疗肾虚兼气血不足型骨质疏松症的疗效及对骨代谢、骨转化的影响 [J]. 中国实验方剂学杂志， 2018 ， 24 （ 8 ）: 159 - 164 .

CUNNINGHAM T D ， DIN T ， PACE B S ， et al . Self-reported sleep duration associated with osteoporosis Data from a 4-year aggregated analysis from the national health and nutrition examination survey [J]. J Am Geria Soc ， 2015 ， 63 （ 7 ）: 1401 - 1406 .

万雷，黄宏兴，邓伟民，等 . 广东省中老年女性骨质疏松症患者骨密度、中医证型及其影响因素调查分析 [J]. 中国骨质疏松杂志， 2019 ， 25 （ 1 ）: 107 - 112 .

曹端广，夏汉庭，杨文龙，等 . 加味阳和汤对肾阳虚型骨质疏松模型大鼠骨密度及血清微量元素的影响 [J]. 安徽中医药大学学报， 2019 ， 38 （ 3 ）: 76 - 79 .

路宇仁，陈昳冰，崔元璐，等 . 淫羊藿苷药理作用研究进展 [J]. 中国实验方剂学杂志， 2018 ， 24 （ 17 ）: 209 - 220 .

宣玲，包玉婷，周小杰，等 . 肾阳虚大鼠肾组织中microRNA差异性表达与信号通路分析 [J]. 中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 （ 17 ）: 57 - 63 .

陈颖颖，罗静，徐愿，等 . 肾阳虚动物模型造模方法评价及进展 [J]. 中华中医药学刊， 2018 ， 36 （ 11 ）: 2697 - 2700 .

戴燚，刘军，范彦博，等 . 青蛾丸对去势鼠成骨细胞增殖以及MMP3-OPN-MAPK通路蛋白表达的影响 [J]. 时珍国医国药， 2016 ， 27 （ 4 ）: 836 - 838 .

王礼宁，马勇，郑苏阳，等 . 大鼠骨髓单核细胞的快速分离方法及向破骨细胞的诱导分化 [J]. 中国现代医学杂志， 2017 ， 27 （ 18 ）: 1 - 6 .

ITZSTEIN C ， HOF R J . Osteoclast formation in mouse cocultures [J]. Methods Mol Biol ， 2012 ， 8 （ 16 ）: 177 - 186 .

白宛鑫，赵良友，张娜，等 . 生淫羊藿与炙淫羊藿对肾阳虚证水肿模型大鼠的影响 [J]. 中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 （ 5 ）: 85 - 91 .

王露霏，白丁，韩向龙 . Wnt信号通路拮抗剂Dkk1调节骨代谢的最新进展 [J]. 中国组织工程研究， 2013 ， 17 （ 2 ）: 337 - 341 .

HEILAND G R ， ZWERINA K ， BAUM W ， et al . Neutralisation of Dkk-1 protects from systemic bone loss during inflammation and reduces sclerostin expression [J]. Ann Rheum Dis ， 2010 ， 69 （ 12 ）: 2152 - 2159 .

张妍，王健英，邢蕴蕴，等 . 中药影响骨代谢分子机制研究进展 [J]. 中草药， 2019 ， 50 （ 20 ）: 5096 - 5102 .

杨九杰，赵伟，王楠，等 . 脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基联合骨形态发生蛋白2治疗去卵巢大鼠骨质疏松症 [J]. 中国组织工程研究， 2020 ， 24 （ 1 ）: 7 - 13 .

FUKUD T ， KOKABU S ， OHTE S ， et al . Canonical Wnts and BMPs cooperatively induce osteoblastic differentiation through a GSK3beta-dependent and beta-catenin-independent mechanism [J]. Differentiation ， 2010 ， 80 （ 1 ）: 46 - 52 .

黎彦龙，何明，陈秉雄，等 . OPG-RANKL-RANK信号系统是调节破骨细胞及骨质疏松症的重要途径 [J]. 中国组织工程研究， 2015 ， 19 （ 24 ）: 3894 - 3898 .

董重阳，师建平，陈欣，等 . 淫羊藿提取物对绝经后骨质疏松症大鼠PGE2及 β 2肾上腺素受体的影响 [J]. 中华中医药杂志， 2019 ， 34 （ 5 ）: 2076 - 2079 .

宋敏，罗晓，李宁，等 . 淫羊藿总黄酮含药血清对成骨细胞OPG/OPGL基因表达的影响 [J]. 时珍国医国药， 2012 ， 23 （ 4 ）: 883 - 886 .

Views

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

Analysis on Characteristics of Dominant Population of Osteoporosis Treated with Quanduzhong Capsules Based on "Real-world Research-machine Learning" Dual Drive

Progress of Anti-osteoporosis Research of Traditional Chinese Medicine Based on Zebrafish Model

Pathways Related to Osteoporosis Treatment with Active Ingredients of Scutellaria Baicalensis： A Review

Evaluation of Anti-osteoporosis Activity and Hepatotoxicity of Xianling Gubao Based on Zebrafish Model

Hepatotoxicity and Anti-osteoporotic Mechanism of Evodiamine

Related Author

XU Wenyuan

XIANG Xinghua

TIAN Yaxin

TANG Dezhi

YU Lehua

YAN Zhaoshuai

LI Yuxin

SHI Nannan

Related Institution

North China Electric Power University

School of Mathematics and Statistics，Hunan University of Science and Technology

Longhua Hospital，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine

Institute of Basic Research in Clinical Medicine，China Academy of Chinese Medical Sciences

Xiangyang No.1 People′s Hospital， Hubei Universi ty of Medicine， Xiangyang

AI问答

Postal code：100700
Tel：010-84076882 Email：syfjx_2010@188.com
Technical support is provided by Beijing Founder electronics co., LTD 京ICP备11006657号-10 京公网安备11010802024621
It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.

⁰

Effect of Serum from Kidney Yang Deficiency Rats on Expression of β-catenin/OPG/RANKL in OB-OC Co-culture System and Regulatory of Icariin

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20201341

摘要

Abstract

关键词

Keywords

references