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期刊简介

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主编:吴以岭
主管单位:国家中医药管理局

主办单位:

中国中医科学院中药研究所
中华中医药学会

CN11-3495/R

ISSN1005-9903

出版周期:半月刊

地址:北京市东城区东直门内南小街16

电话:010-84076882

邮箱syfjx_2010@188.com

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定志小丸对卒中后认知障碍模型小鼠PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α通路的影响

目的研究定志小丸(DZXW)对卒中后认知障碍(PSCI)模型小鼠的作用机制。方法小鼠脑缺血再灌注损伤模型建立采用大脑中动脉闭塞法。将40只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、DZXW低剂量组(1.43 g·kg-1)和DZXW高剂量组(2.56 g·kg-1),每组10只。假手术组和模型组都进行等量的生理盐水灌胃处理,上述4组小鼠连续30 d灌胃,每天1次。采用Morris水迷宫实验评价小鼠学习记忆能力;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中淀粉样前体蛋白(APP)、淀粉样蛋白42(Aβ42)、乙酰胆碱酯酶(AChE)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;原位末端标记法(TUNEL)检测小鼠海马神经元的细胞凋亡程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、缺氧诱导因子-1α亚单位(HIF-1α)、自噬效应蛋白1(Beclin1)、螯合体1(p62)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;普鲁士蓝染色检测海马组织的铁沉积情况;透射电镜观察小鼠海马神经元超微结构。结果与假手术组比较,模型组的潜伏期、APP、Aβ42、AChE、TUNEL阳性率、铁离子沉积、HIF-1α、Beclin1、Bax和LC3Ⅱ/Ⅰ显著增加(P<0.01),而穿越平台次数、SOD、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、p62和Bcl-2显著减少(P<0.01)。与模型组比较,DZXW各剂量组的潜伏期、APP、Aβ42、AChE、TUNEL阳性率、铁离子沉积、HIF-1α、Beclin1、Bax和LC3Ⅱ/Ⅰ明显减少(P<0.05),而穿越平台次数、SOD、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、p62和Bcl-2明显增加(P<0.05)。结论DZXW可以通过调节PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α自噬信号通路来减缓PSCI模型小鼠因氧化应激加重海马神经元损伤诱导的认知障碍。

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定志小丸对卒中后认知障碍模型小鼠PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α通路的影响
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Volume 31 期 15,2025 2025年31卷第15期
  • 经典名方

    最新研究发现,黄芪葛根汤通过调节AGE/RAGE和TGF-β信号通路,改善肠黏膜屏障损伤,发挥抗2型糖尿病作用。

    彭莉莉, 郝渺, 杨志军, 刘亚洁, 原红霞

    2025, 31(15): 1-9. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20250803
    摘要:目的采用蛋白质组学技术探讨黄芪葛根汤治疗2型糖尿病(T2DM)的作用机制。方法采用链脲佐菌素联合高糖高脂饮食诱导T2DM大鼠模型。32只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、黄芪葛根汤(8.10 g·kg-1·d-1)组、阳性药组(盐酸二甲双胍,76.5 mg·kg-1·d-1)。药物干预6周后,检测空腹血糖,并进行口服糖耐量(OGTT)实验,计算OGTT曲线下面积(AUC);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清糖化血红蛋白(GHbA1c)表达;鲎试剂检测血清中脂多糖(LPS)含量变化;苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β mRNA水平。蛋白免疫印迹法(Western blot)和Real-time PCR检测各组大鼠结肠组织中闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)的蛋白和mRNA水平。取正常组、模型组、黄芪葛根汤组结肠组织,采用非标记定量蛋白质组学分析各组差异蛋白,并利用Western blot和Real-time PCR对关键蛋白进行验证;最后对差异蛋白进行生物信息学分析。结果与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖、AUC、GHbA1c显著升高(P<0.01);结肠黏膜上皮结构受损,并伴有炎性细胞浸润;结肠TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA水平及血清LPS含量均明显升高(P<0.05,P<0.01);结肠ZO-1、Occludin、Claudin-1蛋白和mRNA水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,黄芪葛根汤组大鼠空腹血糖、AUC、GHbA1c显著降低(P<0.01);结肠黏膜上皮损伤减轻;结肠TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA水平及血清LPS含量均明显降低(P<0.05,P<0.01);结肠ZO-1、Occludin、Claudin-1蛋白和mRNA水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。蛋白质组学显示,模型组与正常组比较和黄芪葛根汤组与模型组比较有70个差异蛋白呈现回调趋势;Western blot和Real-time PCR检测各组大鼠结肠组织黏蛋白2(Muc2)和转化生长因子β受体1(Tgfbr1)的蛋白和mRNA水平,与蛋白质组学结果一致。生物信息学结果显示70个回调蛋白富集到多条信号通路,其中发现TGF-β和高级糖基化终末产物/高级糖基化终末产物受体(AGE/RAGE)信号通路与肠黏膜屏障损伤密切相关,提示黄芪葛根汤可能通过调节上述通路发挥改善肠黏膜屏障损伤的作用。结论黄芪葛根汤可能是通过调节AGE/RAGE和TGF-β等信号通路,改善肠黏膜屏障损伤,发挥抗T2DM的作用。  
    关键词:蛋白质组学;黄芪葛根汤;2型糖尿病;差异表达蛋白;肠黏膜屏障   
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    更新时间:2025-07-01
  • 经典名方

    最新研究发现,黄连温胆汤通过调节TGR5/GLP-1信号通路和肠道菌群,有效改善湿热型糖尿病肠病大鼠症状。

    王郁金, 伽雨龙, 姜华, 袁晨, 邓茜瑞, 孟学莲, 王文骊, 苏衍进

    2025, 31(15): 10-18. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20242243
    摘要:目的基于G蛋白偶联胆汁酸受体5/胰高糖素样肽-1(TGR5/GLP-1)信号通路和肠道菌群探讨黄连温胆汤对湿热型糖尿病肠病大鼠的作用机制。方法将72只SD雄性大鼠,适应性喂养1周。随机抽取12只作为空白组,给予普通饲料喂养,其余SD大鼠均禁食不禁水12 h,通过“链脲佐菌素左侧腹腔注射(55 mg·kg-1)+高糖高脂饮食(20%蔗糖溶液+高脂饲料)+湿热环境(人工气候箱:温度30~34 ℃,相对湿度85%~95%)”方式制作湿热型糖尿病肠病大鼠模型。造模成功后随机分为模型组,二甲双胍组(200 mg·kg-1),黄连温胆汤低、中、高剂量组(7.10、14.20、28.39 g·kg-1),每组12只,空白组、模型组每天以生理盐水灌胃,每日1次,连续干预6周。观察期内,每周测量大鼠体质量、血糖水平并记录。给药结束后,采集大鼠新鲜粪便,采用16S rRNA测序技术,研究肠道菌群在不同组间的差异和变化;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;考察结肠组织病理形态学变化;免疫组化法检测大鼠结肠组织TGR5、GLP-1表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠结肠组织中TGR5、GLP-1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量下降,血糖升高,湿热症状明显;血清中IL-6、TNF-α含量显著增高(P<0.01);TGR5和GLP-1表达减少(P<0.01);致病菌增多。与模型组比较,各治疗组大鼠体质量、血糖水平及湿热证候均出现改善,其中以黄连温胆汤高剂量组的改善效果最为显著,炎症水平显著下调(P<0.01),TGR5和GLP-1表达显著增加(P<0.01),结肠病理切片显示,黄连温胆汤能够有效改善结肠病理变化。16S rRNA测序技术表明,治疗组有益菌显著增加。结论黄连温胆汤能够有效改善湿热型糖尿病肠病大鼠的湿热症状与血糖水平,其机制可能与调节TGR5/GLP-1信号通路和肠道菌群紊乱有关。  
    关键词:糖尿病肠病;肠道菌群;G蛋白偶联胆汁酸受体5/胰高糖素样肽-1(TGR5/GLP-1)信号通路;黄连温胆汤   
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    更新时间:2025-07-01
  • 经典名方

    最新研究发现,补中益气汤能减少肺组织细胞凋亡,改善肺泡表面活性物质分泌,减轻肺损伤,改善肺功能,可能与PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路相关。

    张璐瑶, 王杨静, 刘兵兵, 李杰茹

    2025, 31(15): 19-27. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20242242
    摘要:目的探讨补中益气汤干预对慢性间歇性低氧(CIH)致肺表面活性蛋白C(SFTPC)表达异常及肺损伤的改善作用及机制研究。方法选取40只健康成年雄性SPF级C57BL/6小鼠随机将其分为5个实验组:常氧组,CIH组,补中益气汤低、中、高剂量组,每组8只。造模期间,常氧组小鼠置于标准氧浓度的环境中,CIH组,补中益气汤低、中、高剂量组小鼠则被放置于低氧舱中,每天持续上舱8 h,共计35 d。每日上舱前给予低、中、高剂量组补中益气汤小鼠灌胃相应剂量的汤药(生药量分别为8.1、16.2、32.4 g·kg-1·d-1),同时常氧组、CIH组小鼠每日上舱前给予等剂量的生理盐水灌胃。记录小鼠实验前及实验结束后的一般状态,使用小鼠无创肺功能检测系统检测各组小鼠肺功能。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中SFTPC含量,苏木素-伊红(HE)染色检测肺组织病理形态学变化,原位末端标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肺组织中SFTPC、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化真核翻译起始因子2α(p-eIF2α)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)蛋白表达,免疫荧光染色检测小鼠肺组织中SFTPC、CHOP蛋白表达情况。结果与常氧组比较,CIH组小鼠肺功能有明显损伤情况,肺组织病理损伤评分升高(P<0.05,P<0.01),血清中SFTPC水平增加、肺组织中SFTPC表达下调(P<0.05,P<0.01),肺组织细胞凋亡阳性率增多,内质网应激相关因子p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP表达增加(P<0.05,P<0.01),与CIH组比较,补中益气汤干预可改善其受损的肺功能指标,肺组织病理损伤评分降低(P<0.05,P<0.01)。渗入血清中SFTPC减少、肺组织中SFTPC表达恢复(P<0.05,P<0.01),肺组织细胞凋亡阳性率明显下降,促凋亡因子Bax表达下调、抗凋亡因子Bcl-2表达上升(P<0.05,P<0.01),p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP活化及表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论补中益气汤减少肺组织细胞凋亡,改善肺泡表面活性物质的分泌,减轻肺损伤,改善肺功能,可能与PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路相关。  
    关键词:补中益气汤;间歇性低氧;内质网应激;肺表面活性蛋白C   
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    更新时间:2025-07-01
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