Effect of Different Concentrations of Astragali Radix Containing Serum on CYP24A1，CYP27B1 mRNA and Protein in Osteogenic Differentiation of Aging Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

Qian LI; Yong-zhen WU; Lian-cheng GUAN; Jie GAO; Wen LI; Zhong QIN; Yun-zhi CHEN; Yi-Hui CHAI

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20201738

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Effect of Different Concentrations of Astragali Radix Containing Serum on CYP24A1，CYP27B1 mRNA and Protein in Osteogenic Differentiation of Aging Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

Pharmacology | 更新时间：2020-09-09

- Effect of Different Concentrations of Astragali Radix Containing Serum on CYP24A1，CYP27B1 mRNA and Protein in Osteogenic Differentiation of Aging Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 26, Issue 17, Pages: 49-55(2020)
- 作者机构：
  
  1.贵州中医药大学，贵阳 550025
  2.贵州中医药大学第二附属医院，贵阳 550002
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20201738
  CLC： R2-0;R289;R274;R364.5
- Published Online：01 July 2020，
  
  Published：05 September 2020
- 稿件说明：
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李倩,吴雍真,管连城等.黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞CYP24A1，CYP27B1 mRNA和蛋白的影响[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(17):49-55.

LI Qian,WU Yong-zhen,GUAN Lian-cheng,et al.Effect of Different Concentrations of Astragali Radix Containing Serum on CYP24A1，CYP27B1 mRNA and Protein in Osteogenic Differentiation of Aging Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(17):49-55.
李倩,吴雍真,管连城等.黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞CYP24A1，CYP27B1 mRNA和蛋白的影响[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(17):49-55. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20201738.

LI Qian,WU Yong-zhen,GUAN Lian-cheng,et al.Effect of Different Concentrations of Astragali Radix Containing Serum on CYP24A1，CYP27B1 mRNA and Protein in Osteogenic Differentiation of Aging Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(17):49-55. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20201738.

摘要

目的

通过探讨不同浓度黄芪含药血清对衰老骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化过程中24-羟基化酶（CYP24A1），1

羟化酶（CYP27B1）mRNA及蛋白表达的影响，初步探讨其治疗原发性骨质疏松症作用机制。

方法

将SD大鼠随机分为6组，正常组、模型组、黄芪含药血清低、中、高质量分数组（20%，40%，60%），维生素D组。细胞增殖毒性检测（CCK-8）法检测不同浓度黄芪含药血清对衰老BMSCs成骨分化细胞存活率的影响；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR），蛋白免疫印迹法（Western blot）检测不同浓度黄芪含药血清对衰老BMSCs成骨分化细胞CYP24A1，CYP27B1 mRNA和蛋白的表达情况。

结果

CCK-8法显示，与正常组比较，模型组BMSCs成骨分化细胞经

-半乳糖诱导后细胞增殖存活率显著降低（

0.01）；与模型组比较，黄芪含药血清中、高质量分数组及维生素D组均可在不同程度上提高衰老BMSCs成骨分化细胞增殖存活率（

0.01）；Real-time PCR和Western blot结果显示，与正常组比较，模型组CYP27B1 mRNA和蛋白相对表达量显著降低，CYP24A1 mRNA和蛋白相对表达量显著升高（

0.01）；与模型组比较，黄芪高质量分数组均可升高CYP27B1 mRNA和蛋白相对表达量（

0.01），降低CYP24A1 mRNA和蛋白相对表达量（

0.01），呈质量分数依赖性。

结论

不同浓度黄芪含药血清可治疗骨质疏松症，其机制可能与调节衰老骨髓间充质干细胞成骨分化过程中CYP24A1，CYP27B1 mRNA及蛋白表达水平有关。

Abstract

Objective

To investigate the effects of different concentrations of Astragali Radix containing serum on the expression of 24-hydroxylase（CYP24A1），1

-OHase（CYP27B1） mRNA and protein in rat bone marrow mesenchymal stem cells （BMSCs）， and to explore the mechanism of primary osteoporosis （OP）.

Method

The experiment was divided into 6 groups，like normal group， model group， low ，middle and high dose group of Astragali Radix containing serum（20%，40%，60%），Vitamin D group. Cell proliferation toxicity assay（CCK-8） was used to detect the effect of different concentrations of Astragali Radix containing serum on survival rate of aging BMSCs.Real-time quantitative PCR（Real-time PCR） and Western blot was used to detect the expression of CYP24A1 CYP27B1 mRNA and protein in senile BMSCs osteogenic differentiation cells by different concentrations of Astragali Radix containing serum.

Result

Compared with normal group， the proliferation and survival rate of BMSCs osteoblasts induced by

-galactose in model group was significantly lower than that in normal group （

0.01）. Compared with model group， medium and high dose groups and Vitamin D group could improve the proliferation and differentiation of aging BMSCs into osteoblasts in different degrees（

0.01）. The relative expression of CYP27B1 mRNA and protein in model group was significantly lower than that in normal group， while the relative expression of CYP24A1 mRNA and protein in model group was significantly higher than that in normal group. Compared with model group， high dose Astragali Radix containing serum group could increase the relative expression of CYP27B1 mRNA and protein， and decrease the relative expression of CYP24A1 mRNA and protein in a dose-dependent manner（

0.01）.

Conclusion

The mechanism of different concentrations of Astragali Radix containing serum in the treatment of osteoporosis may be related to the regulation of CYP24A1， CYP27B1 mRNA and protein in the osteogenic differentiation of aging BMSCs.

关键词

Keywords

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