Effect of Naringenin on Oxidative Stress and Tau Protein Phosphorylation of A<italic style="font-style: italic">β</italic><sub>25-35</sub>-induced PC12 Cell Injury

Qi QIU; Zhong-hua HU; Hong-dan XU; Huai-yu XING; Hui-feng SUN; Ning ZHANG; Xia LEI

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20202140

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Effect of Naringenin on Oxidative Stress and Tau Protein Phosphorylation of Aβ_25-35-induced PC12 Cell Injury

Pharmacology | 更新时间：2020-12-10

- Effect of Naringenin on Oxidative Stress and Tau Protein Phosphorylation of Aβ_25-35-induced PC12 Cell Injury
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 26, Issue 21, Pages: 92-99(2020)
- 作者机构：
  
  1.黑龙江中医药大学药学院，哈尔滨 150040
  2.黑龙江中医药大学佳木斯学院，黑龙江佳木斯 154007
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20202140
  CLC： R2-0;R289;R742
- Received：14 March 2020，
  
  Published Online：27 August 2020，
  
  Published：05 November 2020
- 稿件说明：
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邱琦,胡中花,徐红丹等.柚皮素对Aβ_25-35损伤PC12细胞氧化应激及Tau蛋白磷酸化的影响[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(21):92-99.

QIU Qi,HU Zhong-hua,XU Hong-dan,et al.Effect of Naringenin on Oxidative Stress and Tau Protein Phosphorylation of Aβ_25-35-induced PC12 Cell Injury[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(21):92-99.
邱琦,胡中花,徐红丹等.柚皮素对Aβ_25-35损伤PC12细胞氧化应激及Tau蛋白磷酸化的影响[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(21):92-99. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202140.

QIU Qi,HU Zhong-hua,XU Hong-dan,et al.Effect of Naringenin on Oxidative Stress and Tau Protein Phosphorylation of Aβ_25-35-induced PC12 Cell Injury[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(21):92-99. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202140.

摘要

目的

探讨柚皮素对

淀粉样蛋白（A

）

25-35

损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞氧化应激及Tau蛋白磷酸化的影响及其与雌激素受体（ER）及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路的关系。

方法

采用A

25-35

干预PC12细胞制备损伤模型。实验分为空白组、模型组、柚皮素（400，40，4，0.4，0.04，4×10

-3

，4×10

-4

，4×10

-5

μmol·L

-1

）组、阳性药雌二醇（E

）（1 nmol·L

-1

）+A

25-35

组、柚皮素（0.4，0.04，4×10

-3

，4×10

-4

，4×10

-5

μmol·L

-1

）+A

25-35

组，E

25-35

+ER拮抗剂（ICI182780）（1 μmol·L

-1

）组，柚皮素+A

25-35

+ICI182780组，E

25-35

+PI3K阻断剂（LY294002）（50 μmol·L

-1

）组、柚皮素+A

25-35

+LY294002组。噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖率，2'，7'-二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）作为荧光探针检测细胞中总活性氧（ROS）含量，硫代巴比妥酸（TBA）法和氧化酶法分别检测细胞中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞中磷酸化Tau蛋白/总Tau蛋白（p-Tau/t-Tau）的表达。

结果

根据MTT实验结果，筛选0.4 μmol·L

-1

为柚皮素最佳有效浓度；与空白组比较，模型组细胞增殖率显著降低（

0.01），与模型组比较，柚皮素+A

25-35

组细胞增殖率显著升高（

0.01）。此外，与空白组比较，模型组细胞中ROS，MDA的含量及p-Tau/t-Tau表达显著升高（

0.01），SOD活性显著降低（

0.01），与模型组比较，柚皮素+A

25-35

组细胞中ROS，MDA的含量及p-Tau/t-Tau表达显著降低（

0.01），SOD活性显著升高（

0.01），与柚皮素+A

25-35

组比较，ICI182780，LY294002的加入显著逆转了柚皮素在上述指标中的作用（

0.01）。柚皮素的作用效果与E

相似。

结论

柚皮素可提高细胞增殖率，对A

25-35

损伤PC12细胞有保护作用，其作用可能是通过激活ER及PI3K/Akt信号通路降低A

25-35

损伤PC12细胞中ROS，MDA含量及p-Tau/t-Tau表达、促进SOD活性来实现的。

Abstract

Objective

To investigate the effects of naringenin on oxidative stress and Tau protein phosphorylation of adrenal pheochromocytoma（PC12） cells injured by

-amyloid（A

）

25-35

and its relationship with estrogen receptor（ER） and phosphatidylinositol -3 kinase/protein kinase B（PI3K/Akt） signaling pathway.

Method

The PC12 cells were intervened with A

25-35

to prepare the injury model. The experiment was divided into blank group， model group， naringenin（400，40，4，0.4，0.04，4×10

-3

，4×10

-4

，4×10

-5

μmol·L

-1

）group， positive drugs estradiol（E

）（1 nmol·L

-1

）+A

25-35

group， naringenin（0.4，0.04，4×10

-3

，4×10

-4

，4×10

-5

μmol·L

-1

）+A

25-35

group， E

25-35

+ER antagonist（ICI182780）（1 μmol·L

-1

） group， naringenin+A

25-35

+ICI182780 group， E

25-35

+PI3K blocker（LY294002）（50 μmol·L

-1

） group， naringenin+A

25-35

+LY294002 group. Methye thiazolye telrazlium（MTT）method was used to detect the cell proliferation index， 2'，7'-Dichlorodi -hydrofluorescein diacetate（DCFH-DA） was used as a fluorescent probe to detect the content of reactive osygen species（ROS）， the content of malondialdehyde（MDA） and the activity of superoxide dismutase（SOD） were measured by thiobarbituric acid（TBA） and oxidase methods， Western blot was used to detect the expression of phosphorylated Tau protein/total Tau protein（p-Tau/t-Tau）.

Result

According to the results of MTT experiment， 0.4

μmol·L

-1

was selected as the best effective concentration of naringenin， compared with the blank group， the cell proliferation index of model group decreased significantly （

0.01）， compared with model group， the cell proliferation index of naringenin+A

25-35

group increased significantly （

0.01）. In addition， compared with blank group， the content of ROS， MDA and the expression of p-Tau/t-Tau in the model group increased significantly （

0.01）， and the activity of SOD decreased significantly （

0.01）， compared with model group， the content of ROS， MDA and the expression of p-Tau/t-Tau in naringenin+A

25-35

group decreased significantly （

0.01）， and the activity of SOD increased significantly （

0.01）， compared with naringenin+A

25-35

group， the addition of ICI182780 and LY294002 significantly reversed the role of naringenin in the above indicators （

0.01）. The effect of naringenin was similar to that of E

Conclusion

Naringenin can improve the cell proliferation index and protect PC12 cells from A

25-35

injury， which may be achieved by activating ER and PI3K/Akt signaling pathway to reduce ROS， MDA content， p-Tau/t-Tau expression and promote SOD activity.

关键词

Keywords

references

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