Xixintang-medicated Serum Regulates A<italic style="font-style: italic">β</italic><sub>25-35</sub>-induced Polarization of BV-2 Microglial Cells

YANG Chaokai; DIWU Yongchang; WU Yangyang; XING Xia; WANG Dengkun

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20250103

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Xixintang-medicated Serum Regulates Aβ_25-35-induced Polarization of BV-2 Microglial Cells

更新时间：2025-03-04

- Xixintang-medicated Serum Regulates Aβ_25-35-induced Polarization of BV-2 Microglial Cells
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 31, Issue 6, Pages: 18-26(2025)
- 作者机构：
  
  1.陕西中医药大学第一临床医学院，陕西咸阳 712046
  2.陕西中医药大学基础医学院，陕西咸阳 712046
  3.陕西中医药大学附属医院，陕西咸阳 712000
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20250103
  CLC： R289;R285;R259
- Received：02 October 2024，
  
  Accepted：25 December 2024，
  
  Published Online：27 December 2024，
  
  Published：20 March 2025
- 稿件说明：
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杨朝凯,第五永长,武阳洋等.洗心汤含药血清对Aβ_25-35诱导的BV-2小胶质细胞极化的调控作用[J].中国实验方剂学杂志,2025,31(06):18-26.

YANG Chaokai,DIWU Yongchang,WU Yangyang,et al.Xixintang-medicated Serum Regulates Aβ_25-35-induced Polarization of BV-2 Microglial Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2025,31(06):18-26.
杨朝凯,第五永长,武阳洋等.洗心汤含药血清对Aβ_25-35诱导的BV-2小胶质细胞极化的调控作用[J].中国实验方剂学杂志,2025,31(06):18-26. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20250103.

YANG Chaokai,DIWU Yongchang,WU Yangyang,et al.Xixintang-medicated Serum Regulates Aβ_25-35-induced Polarization of BV-2 Microglial Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2025,31(06):18-26. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20250103.

摘要

目的

通过体外研究，探索洗心汤（XXT）含药血清对

淀粉样蛋白（A

）

25-35

诱导的BV-2小胶质细胞极化的影响，以揭示该方在防治阿尔茨海默病中的潜在

机制，为临床治疗提供科学依据。

方法

将BV-2小胶质细胞传代培养后，使用细胞增殖和活性检测（CCK-8）法筛选出最适浓度的XXT含药血清和A

25-35

。实验设置空白组、模型组（浓度为40 μmol·L

-1

的A

25-35

）、XXT含药血清组（浓度为40 μmol·L

-1

的A

25-35

+10% XXT含药血清）和空白血清组（浓度为40 μmol·L

-1

的A

25-35

+10%空白血清处理组）。各组细胞孵育24 h后，采用免疫荧光法检测离子化钙结合适配分子1（IBA1）、CD16/32及CD206的表达；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测CD206、CD163、诱导型一氧化氮合成（iNOS）、精氨酸酶-1（Arg-1） mRNA表达水平；通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测NGF、iNOS、Arg-1的含量。采用硝酸还原酶法测定NO含量。

结果

与空白组比较，模型组IBA1、CD16/32表达显著升高（

0.01），CD206的表达明显降低（

0.05），iNOS mRNA表达水平显著上调（

0.01），含量明显增高（

0.05），CD206、CD163、Arg-1的mRNA表达水平明显下调（

0.05，

0.01），Arg-1、NGF含量明显降低（

0.05），NO含量明显升高（

0.05）。与模型组比较，XXT含药血清组IBA1，CD16/32表达明显降低（

0.05，

0.01），CD206的表达显著升高（

0.01）；iNOS含量和mRNA表达水平明显下调（

0.05，

0.01），同时CD206、CD163、Arg-1的mRNA表达水平显著上调（

0.01），Arg-1、NGF含量明显升高（

0.05），NO含量明显降低（

0.05）。与模型组比较，空白血清组各指标差异无统计学意义。

结论

XXT含药血清可通过抑制M1型小胶质细胞极化并促进M2型极化，发挥抗炎和神经营养作用。

Abstract

Objective

To investigate the effects of Xixintang （XXT）-medicated serum on the amyloid

-protein （A

）

25-35

-induced polarization of BV-2 microglial cells by a cell experiment and uncover the potential mechanisms of this formula in the prevention and treatment of Alzheimer's disease （AD）， thus providing scientific evidence for the clinical application of XXT.

Methods

BV-2 microglial cells were subcultured. The optimal concentrations of XXT-medicated serum and A

25-35

were determined via the cell-counting kit-8 （CCK-8） assay. The cell experiment was carried out with the following groups： blank control， model （A

25-35

at 40 μmol·L

-1

）， XXT-medicated serum （A

25-35

at 40 μmol·L

-1

+ 10% XXT-medicated serum）， and blank serum （A

25-35

at 40 μmol·L

-1

+ 10% blank serum）. After 24 hours of cell incubation， immunofluorescence was used to detect the expression of ionized calcium-binding adaptor molecule 1 （IBA1）， CD16/32， and CD206. Real-time PCR was performed to measure the mRNA levels of CD206， CD163， inducible nitric oxide synthase （iNOS）， and arginase 1 （Arg-1）. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was employed to quantify the levels of nerve growth factor （NGF）， iNOS， and Arg-1. The nitric oxide （NO） concentration was determined via the nitrate reductase method.

Results

Compared with the blank control group， the model group showed increased expression of IBA1 and CD16/32 （

0.01）， decreased expression of CD206 （

0.05）， upregulation in the mRNA level （

0.01） and content （

0.05） of iNOS， downregulation in the mRNA levels of CD206， CD163， and Arg-1 （

0.05，

0.01）， lowered levels of Arg-1 and NGF （

0.05）， and an elevation in the NO level （

0.05）. Compared with the model group， the XXT-medicated serum group exhibited reduced expression of IBA1 and CD16/32 （

0.05，

0.01） and increased expression of CD206 （

0.01）. Both the content and mRNA level of iNOS were downregulated （

0.05，

0.01）， while the mRNA levels of CD206， CD163， and Arg-1 were upregulated （

0.01） in the XXT-medicated serum group. In addition， the XXT-medicated seru

m group showed elevated levels of Arg-1 and NGF （

0.05） and a lowered level of NO （

0.05）. The blank serum group showed no statistically significant differences in the measured parameters compared with the model group.

Conclusion

The XXT-medicated serum can inhibit the polarization toward the M1 phenotype and promote the polarization toward the M2 phenotype， exerting anti-inflammatory and neurotrophic effects.

关键词

Keywords

references

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