经典名方开心散特征图谱及TLC鉴别方法的建立

高文雅; 冯敏; 高畅; 赵海誉; 周严严; 王宏洁; 于睿鹏; 赵依芃; 张丽丽; 高彦青; 肖艳红; 程翠娜; 魏晓露; 司南; 边宝林

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20230146

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

经典名方开心散特征图谱及TLC鉴别方法的建立

经典名方 | 更新时间：2023-06-02

- 经典名方开心散特征图谱及TLC鉴别方法的建立
- Establishment of Specific Chromatogram and Thin-layer Identification Method for Kaixinsan
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第13期页码：37-44
- 作者机构：
  
  1.中国中医科学院中药研究所，北京 100700
  2.葵花药业集团（唐山）生物制药有限公司，河北唐山 064400
  3.北京市药品检验研究院，北京 102206
- 作者简介：
  
  高文雅，在读博士，从事中药活性物质基础及生物学表征研究，E-mail：gaowenya0215@163.com
  司南，研究员，从事中药化学与分析研究，Tel：010-84041249，E-mail：nsi@icmm.ac.cn； *
  边宝林，研究员，从事中药活性成分研究，Tel：010-84041249，E-mail：blbian@icmm.ac.cn
- 基金信息：
  
  国家中医药管理局中医药防治新型冠状病毒感染的肺炎应急研究专项课题(2020ZYLCYJ02-9);国家中医药管理局青年岐黄学者项目;中国中医科学院中药研究所横向课题(H2020005-3);中国中医科学院科技创新工程项目(CI2021A04405;CI2021A04502);杭州市钱江特聘专家项目(2020)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230146
  中图分类号： R22;R28;R932;O657
- 收稿日期：2022-08-14，
  
  网络出版日期：2022-11-15，
  
  纸质出版日期：2023-07-05
- 稿件说明：
移动端阅览
高文雅,冯敏,高畅等.经典名方开心散特征图谱及TLC鉴别方法的建立[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(13):37-44.

GAO Wenya,FENG Min,GAO Chang,et al.Establishment of Specific Chromatogram and Thin-layer Identification Method for Kaixinsan[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(13):37-44.
高文雅,冯敏,高畅等.经典名方开心散特征图谱及TLC鉴别方法的建立[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(13):37-44. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230146.

GAO Wenya,FENG Min,GAO Chang,et al.Establishment of Specific Chromatogram and Thin-layer Identification Method for Kaixinsan[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(13):37-44. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230146.

摘要

目的

建立开心散样品的特征图谱及薄层鉴别方法，以阐明其关键质量属性，为该经典名方的质量评价提供参考。

方法

建立开心散的高效液相色谱法（HPLC）特征图谱分析方法，采用YMC Hydrosphere C

色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相选择乙腈（A）-0.2%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~15 min，2%~20%A；15~25 min，20%~25%A；25~30 min，25%~30%A；30~45 min，30%~31%A；45~50 min，31%~44%A；50~65 min，44%~45%A；65~73 min，45%~75%A；73~95 min，75%~100%A；95~105 min，100%A；105~105.1 min，100%~2%A；105.1~120 min，2%A），检测波长320 nm。采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱法（UHPLC-LTQ-Orbitrap MS）对开心散样品的化学成分进行鉴定，检测条件为电喷雾离子源，负离子模式检测，扫描范围

50~2 000。建立开心散样品中茯苓和人参的薄层色谱法（TLC）鉴别方法。

结果

开心散特征图谱共标定11个共有峰，归属远志、茯苓和石菖蒲，以9号峰（

-细辛脑）为参照峰，15批开心散样品相对保留时间的相对标准偏差均

0.2%。通过UHPLC-LTQ-Orbitrap MS分析，共鉴定了34个化合物，包括萜类、苯丙素类、寡糖类及酮类化合物。建立的TLC分离度良好，快速可靠、简便易行，适用于开心散中茯苓和人参的鉴别。

结论

建立的开心散特征图谱及TLC简便稳定、重复性好，通过MS指认及来源归属，基本明确了开心散样品的物质基础，可为该经典名方的复方制剂开发和质量控制提供参考依据。

Abstract

Objective

To establish the specific chromatogram and thin layer chromatography（TLC） identification method of Kaixinsan（KXS） samples， in order to clarify the key quality attributes and provide reference for the quality evaluation of KXS.

Method

High performance liquid chromatography（HPLC） specific chromatogram of KXS was developed with YMC Hydrosphere C

column（4.6 mm×250 mm， 5 μm）， the mobile phase was acetonitrile（A）-0.2% formic acid aqueous solution（B） for gradient elution（0-15 min， 2%-20%A； 15-25 min， 20%-25%A； 25-30 min， 25%-30%A； 30-45 min， 30%-31%A； 45-50 min， 31%-44%A； 50-65 min， 44%-45%A； 65-73 min， 45%-75%A； 73-95 min， 75%-100%A； 95-105 min， 100%A； 105-105.1 min， 100%-2%A； 105.1-120 min， 2%A）， the detection wavelength was 320 nm. Ultra high performance liquid chromatography-linear ion trap-electrostatic field orbitrap mass spectrometry（UHPLC-LTQ-Orbitrap MS） was used to identify the chemical components of KXS with electrospray ionization（ESI）， negative ion mode and scanning range of

50-2 000. TLC identification methods for Poria and Ginseng Radix et Rhizoma in KXS were established.

Result

There were 11 common peaks in the specific chromatogram of KXS， attributed to Polygalae Radix， Poria and Acori Tatarinowii Rhizoma. Taking peak 9（

-asarone） as the reference peak， the relative standard deviations of the retention times of 15 batches of KXS samples were

0.2%. A total of 34 compounds were identified by UHPLC-LTQ-Orbitrap MS， including terpenoids， phenylpropanoids， oligosaccharides and ketones. The established TLC had good separation and was rapid， reliable， simple， feasible， suitable for the identification of Poria and Ginseng Radix et Rhizoma in KXS.

Conclusion

The specific chromatogram and TLC of KXS are stable and reproducible. The material basis of KXS is basically clarified by MS， which can provide a reference for the development and quality control of KXS.

关键词

Keywords

references

何贵平，包祖晓，陈宝君，等 . 开心散及其类方方证特征分析［J］. 中华中医药学刊， 2012 ， 30 （ 3 ）： 583 - 584 .

杨依，桑旭星，方芳 . 开心散活性成分及药理作用研究进展［J］. 中华中医药学刊， 2018 ， 36 （ 6 ）： 1420 - 1424 .

郑美玲，秦竹 . 开心散的现代应用及研究进展［J］. 现代中医药， 2013 ， 33 （ 5 ）： 131 - 133 .

MU L H ， HUANG Z X ， LIU P ， et al . Acute and subchronic oral toxicity assessment of the herbal formula Kai-Xin-San ［J］. J Ethnopharmacol ， 2011 ， 138 （ 2 ）： 351 - 357 .

易腾达，李玉丽，牛林强，等 . 经典名方开心散及类方的古代文献考证［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021 ， 27 （ 5 ）： 8 - 15 .

赵佳琛，王艺涵，金艳，等 . 经典名方中茯苓的本草考证［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 10 ）： 327 - 336 .

刘江云 . 中药经方开心散抗老年性痴呆的物质基础研究［D］. 北京：中国协和医科大学， 2004 .

梁雪冰，吴杰，赵国平，等 . 运用HPLC和GC-MS研究开心散有效抗抑郁成分作用研究［J］. 辽宁中医杂志， 2012 ， 39 （ 6 ）： 1124 - 1126 .

高冰冰，徐淑萍，刘新民，等 . 开心散与去茯苓开心散改善拟AD动物学习记忆作用比较［J］. 中国比较医学杂志， 2010 ， 20 （ 7 ）： 57 - 62 .

WANG W ， LIAO Q P ， QUAN L H ， et al . The effect of Acorus gramineus on the bioavailabilities and brain concentrations of ginsenosides Rg 1 ，Re and Rb 1 after oral administration of Kai-Xin-San preparations in rats ［J］. J Ethnopharmacol ， 2010 ， 131 （ 2 ）： 313 - 320 .

陈灼，王豆，李涛，等 . 石菖蒲抗癫痫的药理机制研究进展［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 18 ）： 261 - 268 .

刘春芳，杨文志，刘珂弟，等 . HPLC/DAD/ESI-MS n 方法鉴定开心散的化学成分及其体内代谢产物［J］. 中国药学：英文版， 2012 ， 21 （ 6 ）： 569 - 576 .

许晓双，张艳花，王丹丹，等 . 基于UPLC/Q-TOF MS代谢组学技术分析影响远志商品药材质量的关键因素［J］. 山西医科大学学报， 2016 ， 47 （ 3 ）： 255 - 263 .

闫福源，许宁，王任晶，等 . 基于DART-MS技术的人参皂苷结构分析［J］. 长春中医药大学学报， 2018 ， 34 （ 6 ）： 1058 - 1062 .

AKIHISA T ， UCHIYAMA E ， KIKUCHI T ， et al . Anti-tumor-promoting effects of 25-methoxyporicoic acid A and other triterpene acids from Poria cocos ［J］. J Nat Prod ， 2009 ， 72 （ 10 ）： 1786 - 1792 .

邹叶廷，徐金娣，龙芳，等 . 整合UPLC-QTOF-MS/MS全扫描和模拟MRM方法综合评价茯苓乙醇提取物与后续乙酸乙酯萃取物三萜酸类组分化学一致性［J］. 药学学报， 2019 ， 54 （ 1 ）： 130 - 137 .

康安，郭锦瑞，谢彤，等 . UPLC-LTQ-Orbitrap质谱联用技术分析茯苓中的化学成分［J］. 南京中医药大学学报， 2014 ， 30 （ 6 ）： 561 - 565 .

国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：一部［M］. 北京：中国医药科技出版社， 2020 .

蒲雅洁，王丹丹，张福生，等 . 远志的本草考证［J］. 中草药， 2017 ， 48 （ 1 ）： 211 - 218 .

蒋介繁 . 本草择要纲目［M］. 上海：上海科学技术出版社， 1985 ， 105 .

ZHU K Y ， FU Q ， XIE H Q ， et al . Quality assessment of a formulated Chinese herbal decoction，Kaixinsan，by using rapid resolution liquid chromatography coupled with mass spectrometry：A chemical evaluation of different historical formulae ［J］. J Sep Sci ， 2010 ， 33 （ 23/24 ）： 3666 - 3674 .

丘光明，邱隆，杨平 . 中国科学技术史：度量衡卷［M］. 北京：科学出版社， 2017 ， 378 .

王国琛 . 唐代方书剂量考［J］. 江西中医学院学报， 2009 ， 21 （ 2 ）： 31 - 33 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

经典名方清心莲子饮特征图谱及TLC鉴别方法的建立

基于磷酸二酯酶抑制活性的清金化痰汤抗炎活性评价方法建立

经典名方中茯苓的本草考证

经典名方温经汤的基准样品特征图谱分析

经典名方中茯苓的本草考证