基于PPAR<italic style="font-style: italic">γ</italic>信号通路探讨淫羊藿苷改善香烟烟雾提取物干预下肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍的作用机制

周哲旭; 武颖烁; 陈星; 王省; 刘洋; 胡啸博; 刘娅茹; 陈玉龙

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20230804

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基于PPARγ信号通路探讨淫羊藿苷改善香烟烟雾提取物干预下肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍的作用机制

药理 | 更新时间：2023-10-20

- 基于PPARγ信号通路探讨淫羊藿苷改善香烟烟雾提取物干预下肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍的作用机制
- Icariin Ameliorates Efferocytosis Dysfunction of Alveolar Macrophages Stimulated by Cigarette Smoke Extract via PPARγ Signaling Pathway
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第22期页码：47-55
- 作者机构：
  
  河南中医药大学中医药科学研究院，河南省中医方证信号传导重点实验室，河南省中医方证信号传导国际联合重点实验室，郑州 450046
- 作者简介：
  
  周哲旭，在读硕士，从事分子生物学与中医方证信号传导研究，E-mail：zhouzhexu1@126.com
  陈玉龙，博士，教授，从事分子生物学与中医方证信号传导研究，E-mail：cyl72621@163.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金面上项目(81873285);河南省特色骨干学科中医学学科建设项目（重点项目）(STG-ZYXKY-2020022);河南中医药大学研究生科研创新类项目(2021KYCX012)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230804
  中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- 收稿日期：2022-11-17，
  
  网络出版日期：2023-03-29，
  
  纸质出版日期：2023-11-20
- 稿件说明：
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周哲旭,武颖烁,陈星等.基于PPARγ信号通路探讨淫羊藿苷改善香烟烟雾提取物干预下肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍的作用机制[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(22):47-55.

ZHOU Zhexu,WU Yingshuo,CHEN Xing,et al.Icariin Ameliorates Efferocytosis Dysfunction of Alveolar Macrophages Stimulated by Cigarette Smoke Extract via PPARγ Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(22):47-55.
周哲旭,武颖烁,陈星等.基于PPARγ信号通路探讨淫羊藿苷改善香烟烟雾提取物干预下肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍的作用机制[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(22):47-55. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230804.

ZHOU Zhexu,WU Yingshuo,CHEN Xing,et al.Icariin Ameliorates Efferocytosis Dysfunction of Alveolar Macrophages Stimulated by Cigarette Smoke Extract via PPARγ Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(22):47-55. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230804.

摘要

目的

探讨淫羊藿苷基于过氧化物酶体增殖物激活受体

（PPAR

）信号通路改善香烟烟雾提取物（CSE）诱导下肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍及炎症反应的作用机制。

方法

大鼠肺泡巨噬细胞NR8383分为空白组、10%香烟烟雾提取物干预后分为模型组、淫羊藿苷低、中、高浓度组（10、20、40 μmol·L

-1

）、PPAR

抑制剂组、PPAR

抑制剂联合淫羊藿苷低、中、高浓度组。Alamar Blue法检测淫羊藿苷对NR8383细胞增殖及抑制作用；流式细胞术检测NR8383细胞胞葬功能；酶联免疫吸附测定法检测肿瘤坏死因子-

（TNF-

）、转化生长因子-

（TGF-

）、乳脂球表皮生长因子8（MFG-E8）含量；蛋白免疫印迹法检测PPAR

、CD36、Ras相关C3肉毒菌毒素底物1（Rac1）蛋白的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测PPAR

、CD36、Rac1 mRNA的表达。

结果

香烟烟雾提取物建立NR8383细胞胞葬功能障碍模型，与空白组比较，模型组胞葬率降低（

0.05），TNF-

表达明显升高（

0.05），TGF-

、MFG-E8表达显著降低（

0.01），明显下调PPAR

、CD36、Rac1 mRNA及蛋白表达（

0.05，

0.01）；与模型组比较，应用淫羊藿苷后各组胞葬率明显升高（

0.05，

0.01），TNF-

表达显著降低（

0.01），TGF-

、MFG-E8表达明显增加（

0.05），上调PPAR

、CD36、Rac1蛋白及mRNA表达（

0.05，

0.01）；与淫羊藿苷单独用药组比较，PPAR

抑制剂联合淫羊藿苷组胞葬率明显降低（

0.05），PPAR

蛋白及mRNA表达明显降低（

0.05，

0.01），低浓度联合组CD36蛋白显著降低（

0.01）低浓度及中浓度联合组Rac1蛋白表达明显增加（

0.05）。

结论

淫羊藿苷改善香烟烟雾提取物导致的肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍，其机制与调控PPAR

信号通路及细胞骨架结构重排相关。

Abstract

Objective

To investigate the mechanism of icariin in ameliorating efferocytosis dysfunction and inflammatory response of alveolar macrophages induced by cigarette smoke extract via the peroxisome proliferator-activated receptor gamma （PPAR

） signaling pathway.

Method

The untreated rat alveolar macrophages （NR8383） were taken as the blank group. The NR8383 cells treated with 10% cigarette smoke extract were divided into model， low-， medium-， and high-dose （10， 20， 40 μmol·L

-1

） icariin， PPAR

inhibitor， and PPAR

inhibitor + low-， medium-， and high-dose icariin groups. Alamar blue colorimetry was employed to examine the proliferation and toxicity of icariin on NR8383 cells. The efferocytosis rate of NR8383 cells was detected by flow cytometry. Enzyme-linked immunosorbent assay was employed to measure the levels of tumor necrosis factor-alpha （TNF-

）， transforming growth factor-

（TGF-

）， and milk fat globule-epidermal growth factor 8 （MFG-E8）. Western blot and Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR） were employed to determine the protein and mRNA levels， respectively， of PPAR

， CD36， and RAS-related C3 botulinum toxin substrate 1 （Rac1）.

Result

The efferocytosis dysfunction model of NR8383 was established with the cigarette smoke extract. Compared with the blank control group， the model group showed decreased efferocytosis rate （

0.05）， elevated TNF-

level （

0.05）， lowered TGF-

and MFG-E8 levels （

0.01）， and down-regulated mRNA and protein levels of PPAR

， CD36， and Rac1 （

0.05，

0.01）. Compared with the model group， the treatment with icariin increased the efferocytosis rate （

0.05，

0.01）， lowered the TNF-

level （

0.01）， elevated TGF-

and MFG-E8 levels （

0.05）， and up-regulated the protein and mRNA levels of PPAR

， CD36， and Rac1 （

0.05，

0.01）. Compared with icariin alone， PPAR

inhibitor + icariin decreased the efferocytosis rate （

0.05） and down-regulated the protein and mRNA levels of PPAR

（

0.05，

0.01）. In addition， PPAR

inhibitor + low-dose icariin down-regulated the protein level of CD36 （

0.01） and PPAR

inhibitor + low-/medium-dose icariin up-regulated the protein level of Rac1 （

0.05）.

Conclusion

Icariin ameliorates the cigarette smoke extract-induced efferocytosis dysfunction of alveolar macrophage by regulating the PPAR

signaling pathway and cytoskeletal structure rearrangement.

关键词

Keywords

references

GBD Chronic Respiratory Disease Collaborators . Prevalence and attributable health burden of chronic respiratory diseases，1990-2017：A systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2017 ［J］. Lancet Respir Med ， 2020 ， 8 ： 585 - 596 .

LUGG S T ， SCOTT A ， PAREKH D ， et al . Cigarette smoke exposure and alveolar macrophages：mechanisms for lung disease ［J］. Thorax ， 2022 ， 77 （ 1 ）： 94 - 101 .

SOLEIMANI F ， DOBARADARAN S ， DE-LA-TORRE G E ， et al . Content of toxic components of cigarette，cigarette smoke vs cigarette butts：A comprehensive systematic review ［J］. Sci Total Environ ， 2022 ， 813 ： 152667 .

RENNARD S I . Cigarette smoke in research ［J］. Am J Respir Cell Mol Biol ， 2004 ， 31 （ 5 ）： 479 - 480 .

BARNES P J . Immunology of asthma and chronic obstructive pulmonary disease ［J］. Nat Rev Immunol ， 2008 ， 8 （ 3 ）： 183 - 192 .

ZHENG D J ， ABOU TAKA M ， HEIT B . Role of apoptotic cell clearance in pneumonia and inflammatory lung disease ［J］. Pathogens ， 2021 ， 10 （ 2 ）： 134 .

VANDIVIER R W ， HENSON P M ， DOUGLAS I S . Burying the dead：The impact of failed apoptotic cell removal （efferocytosis） on chronic inflammatory lung disease ［J］. Chest ， 2006 ， 129 （ 6 ）： 1673 - 1682 .

HENSON P M ， COSGROVE G P ， VANDIVIER R W . State of the art.Apoptosis and cell homeostasis in chronic obstructive pulmonary disease ［J］. Proc Am Thorac Soc ， 2006 ， 3 （ 6 ）： 512 - 516 .

ZHOU X M ， HOU G ， GU D X ， et al . Peroxisome proliferator-activated receptor- γ in induced sputum is correlated with MMP-9/TIMP-1 imbalance and formation of emphysema in COPD patients ［J］. J Thorac Dis ， 2017 ， 9 （ 10 ）： 3703 - 3710 .

SOLLETI S K ， SIMON D M ， SRISUMA S ， et al . Airway epithelial cell PPAR γ modulates cigarette smoke-induced chemokine expression and emphysema susceptibility in mice ［J］. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol ， 2015 ， 309 （ 3 ）： L293 - L304 .

LIU Z Q . Icariin：A special antioxidant to protect linoleic acid against free-radical-induced peroxidation in micelles ［J］. J Phys Chem A ， 2006 ， 110 （ 19 ）： 6372 - 6378 .

孙玉姣，李祎群，李莉 . 淫羊藿苷对慢性阻塞性肺疾病模型的抗炎和抗氧化作用［J］. 湖北中医药大学学报， 2015 ， 17 （ 4 ）： 4 - 7 .

XU C Q ， LIU B J ， WU J F ， et al . Icariin attenuates LPS-induced acute inflammatory responses：Involvement of PI3K/Akt and NF-kappaB signaling pathway ［J］. Eur J Pharmacol ， 2010 ， 642 （ 1-3 ）： 146 - 53 .

LI L ， SUN J ， XU C ， et al . Icariin ameliorates cigarette smoke induced inflammatory responses via suppression of NF-kappaB and modulation of GR in vivo and in vitro ［J］. PLoS One ， 2014 ， 9 （ 8 ）： e102345 .

HU L ， LIU F ， LI L ， et al . Effects of icariin on cell injury and glucocorticoid resistance in BEAS-2B cells exposed to cigarette smoke extract ［J］. Exp Ther Med ， 2020 ， 20 （ 1 ）： 283 - 292 .

PACE E ， FERRARO M ， SIENA L ， et al . Cigarette smoke increases Toll-like receptor 4 and modifies lipopolysaccharide-mediated responses in airway epithelial cells ［J］. Immunology ， 2008 ， 124 （ 3 ）： 401 - 11 .

DEWHURST J A ， LEA S ， HARDAKER E ， et al . Characterisation of lung macrophage subpopulations in COPD patients and controls ［J］. Sci Rep ， 2017 ， 7 （ 1 ）： 7143

BYRNE A J ， MATHIE S A ， GREGORY L G ， et al . Pulmonary macrophages：Key players in the innate defence of the airways ［J］. Thorax ， 2015 ， 70 （ 12 ）： 1189 - 1196 .

BAZZAN E ， TURATO G ， TINE M ， et al . Dual polarization of human alveolar macrophages progressively increases with smoking and COPD severity ［J］. Respir Res ， 2017 ， 18 （ 1 ）： 40 .

JACOBSON M D ， WEIL M ， RAFF M C . Programmed cell death in animal development ［J］. Cell ， 1997 ， 88 （ 3 ）： 347 - 354 .

SAVILL J ， FADOK V . Corpse clearance defines the meaning of cell death ［J］. Nature ， 2000 ， 407 （ 6805 ）： 784 - 788 .

SAVILL J ， DRANSFIELD I ， GREGORY C ， et al . A blast from the past：Clearance of apoptotic cells regulates immune responses ［J］. Nat Rev Immunol ， 2002 ， 2 （ 12 ）： 965 - 975 .

HENGARTNER M O . Apoptosis：Corralling the corpses ［J］. Cell ， 2001 ， 104 （ 3 ）： 325 - 328 .

RICHENS T R ， LINDERMAN D J ， HORSTMANN S A ， et al . Cigarette smoke impairs clearance of apoptotic cells through oxidant-dependent activation of RhoA ［J］. Am J Respir Crit Care Med ， 2009 ， 179 （ 11 ）： 1011 - 1021 .

MCPHILLIPS K ， JANSSEN W J ， GHOSH M ， et al . TNF-alpha inhibits macrophage clearance of apoptotic cells via cytosolic phospholipase A2 and oxidant-dependent mechanisms ［J］. J Immunol ， 2007 ， 178 （ 12 ）： 8117 - 8126 .

GAIPL U S ， SHERIFF A ， FRANZ S ， et al . Inefficient clearance of dying cells and autoreactivity ［J］. Curr Top Microbiol Immunol ， 2006 ， 305 ： 161 - 176 .

LUCAS M ， STUART L M ， SAVILL J ， et al . Apoptotic cells and innate immune stimuli combine to regulate macrophage cytokine secretion ［J］. J Immunol ， 2003 ， 171 （ 5 ）： 2610 - 2615 .

SHAPIRO S D . The macrophage in chronic obstructive pulmonary disease ［J］. Am J Respir Crit Care Med ， 1999 ， 160 （ 5 Pt 2 ）： S29 - S32 .

PONS A R ， SAULEDA J ， NOGUERA A ， et al . Decreased macrophage release of TGF-beta and TIMP-1 in chronic obstructive pulmonary disease ［J］. Eur Respir J ， 2005 ， 26 （ 1 ）： 60 - 66 .

POON I K ， LUCAS C D ， ROSSI A G ， et al . Apoptotic cell clearance：Basic biology and therapeutic potential ［J］. Nat Rev Immunol ， 2014 ， 14 （ 3 ）： 166 - 180 .

NEPAL S ， TIRUPPATHI C ， TSUKASAKI Y ， et al . STAT6 induces expression of Gas6 in macrophages to clear apoptotic neutrophils and resolve inflammation ［J］. Proc Natl Acad Sci USA ， 2019 ， 116 （ 33 ）： 16513 - 16518 .

WANG Y ， LUO G ， CHEN J ， et al . Cigarette smoke attenuates phagocytic ability of macrophages through down-regulating Milk fat globule-EGF factor 8 （MFG-E8） expressions ［J］. Sci Rep ， 2017 ， 7 ： 42642 .

HANAYAMA R ， TANAKA M ， MIYASAKA K ， et al . Autoimmune disease and impaired uptake of apoptotic cells in MFG-E8-deficient mice ［J］. Science ， 2004 ， 304 （ 5674 ）： 1147 - 1150 .

SCHNEIDER C ， NOBS S P ， KURRER M ， et al . Induction of the nuclear receptor PPAR-gamma by the cytokine GM-CSF is critical for the differentiation of fetal monocytes into alveolar macrophages ［J］. Nat Immunol ， 2014 ， 15 （ 11 ）： 1026 - 1037 .

ASADA K ， SASAKI S ， SUDA T ， et al . Antiinflammatory roles of peroxisome proliferator-activated receptor gamma in human alveolar macrophages ［J］. Am J Respir Crit Care Med ， 2004 ， 169 （ 2 ）： 195 - 200 .

NOBS S P ， KOPF M . PPAR-gamma in innate and adaptive lung immunity ［J］. J Leukoc Biol ， 2018 ， 104 （ 4 ）： 737 - 741 .

YOON Y S ， KIM S Y ， KIM M J ， et al . PPARgamma activation following apoptotic cell instillation promotes resolution of lung inflammation and fibrosis via regulation of efferocytosis and proresolving cytokines ［J］. Mucosal Immunol ， 2015 ， 8 （ 5 ）： 1031 - 1046 .

丁浩，冯涛 . PPAR γ 及其在巨噬细胞中的作用［J］. 生命的化学， 2005 ， 25 （ 5 ）： 377 - 379 .

李智慧，余学庆，杨曙光，等 . 中药有效成分治疗特发性肺纤维化的机制研究进展［J/OL］. 中国实验方剂学杂志： 1 - 11 ［ 2023-02-21 ］. https：//doi.org/10.13422/j.cnki.syfjx.20230605 https://doi.org/10.13422/j.cnki.syfjx.20230605 .

袁江，程申，李岚 . 补肾平喘方对过敏性哮喘小鼠气道炎症改善效果的实验研究［J］. 浙江中医杂志， 2021 ， 56 （ 7 ）： 469 - 471 .

CHIMINI G ， CHAVRIER P . Function of Rho family proteins in actin dynamics during phagocytosis and engulfment ［J］. Nat Cell Biol ， 2000 ， 2 （ 10 ）： E191 - E196 .

ASPENSTROM P ， LINDBERG U ， HALL A . Two GTPases，Cdc42 and Rac，bind directly to a protein implicated in the immunodeficiency disorder Wiskott-Aldrich syndrome ［J］. Curr Biol ， 1996 ， 6 （ 1 ）： 70 - 75 .

ASPENSTROM P . Effectors for the Rho GTPases ［J］. Curr Opin Cell Biol ， 1999 ， 11 （ 1 ）： 95 - 102 .

IDEN S ， COLLARD J G . Crosstalk between small GTPases and polarity proteins in cell polarization ［J］. Nat Rev Mol Cell Biol ， 2008 ， 9 （ 11 ）： 846 - 859 .

TAKENAWA T ， SUETSUGU S . The WASP-WAVE protein network：Connecting the membrane to the cytoskeleton ［J］. Nat Rev Mol Cell Biol ， 2007 ， 8 （ 1 ）： 37 - 48 .

胡淑婷，夏强，曾晓丽，等 . 磷脂酰肌醇3-激酶δ-Ras同源基因家族成员A通路在慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能障碍中的作用［J］. 中华结核和呼吸杂志， 2017 ， 40 （ 7 ）： 520 - 526 .

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