人参败毒散调控自噬修复溃疡性结肠炎黏膜的机制

熊珮宇; 陈旭; 张薇; 刘俊宇; 刘兴隆; 王一童; 贾波

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20231039

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

人参败毒散调控自噬修复溃疡性结肠炎黏膜的机制

人参败毒散治疗溃疡性结肠炎机制研究专题 | 更新时间：2023-09-08

- 人参败毒散调控自噬修复溃疡性结肠炎黏膜的机制
- Renshen Baidusan Regulates Autophagy to Repair Mucosa in Ulcerative Colitis
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第19期页码：34-41
- 作者机构：
  
  成都中医药大学基础医学院，成都 610075
- 作者简介：
  
  熊珮宇，在读博士，从事溃疡性结肠炎中医药治疗与作用机制研究，E-mail：649716671@qq.com
  贾波，教授，博士生导师，从事脾胃病证的方剂配伍理论与临证运用研究，E-mail：jiabocdutcm@126.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金面上项目(82074327)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231039
  中图分类号： R2-0;R33;R289;R318.14
- 收稿日期：2023-06-27，
  
  网络出版日期：2023-08-11，
  
  纸质出版日期：2023-10-05
- 稿件说明：
移动端阅览
熊珮宇,陈旭,张薇等.人参败毒散调控自噬修复溃疡性结肠炎黏膜的机制[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(19):34-41.

XIONG Peiyu,CHEN Xu,ZHANG Wei,et al.Renshen Baidusan Regulates Autophagy to Repair Mucosa in Ulcerative Colitis[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(19):34-41.
熊珮宇,陈旭,张薇等.人参败毒散调控自噬修复溃疡性结肠炎黏膜的机制[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(19):34-41. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231039.

XIONG Peiyu,CHEN Xu,ZHANG Wei,et al.Renshen Baidusan Regulates Autophagy to Repair Mucosa in Ulcerative Colitis[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(19):34-41. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231039.

摘要

目的

从调控自噬清除过氧化物角度，探究人参败毒散修复溃疡性结肠炎（UC）肠黏膜的机制。

方法

自由饮用3.0%葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液诱导UC小鼠模型，雄性C57BL/6J小鼠共60只，随机分为正常组、模型组、阳性药美沙拉嗪组（0.3 g·kg

-1

）、人参败毒散高、中、低剂量组（12.35、8.22、4.11 g·kg

-1

），每组10只，连续给药灌胃7 d。选用苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病变，阿利新蓝-过碘酸雪夫氏（PAS/AB）染色观察杯状细胞改变。免疫荧光法检测结肠组织活性氧自由基（ROS）荧光表达；生化法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织细胞增殖核抗原（PCNA）、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5（LGR5）、p62的表达水平。

结果

与正常组比较，UC模型组结肠HE染色见黏膜上皮结构大量缺失，肠腺破坏，炎性细胞大量浸润，结肠病理损伤评分（TDI）明显上调（

0.05），杯状细胞大量丢失，SOD活性及LC3Ⅱ/Ⅰ、PCNA下调（

0.05），而p62、MDA、ROS、LGR5水平上调（

0.05）；与模型组比较，不同剂量的人参败毒散组结肠TDI评分均明显下降（

0.05），PAS/AB染色见大量新生的杯状细胞。PCNA、LGR5、SOD活性及LC3Ⅱ/Ⅰ明显上升（

0.05），而p62、MDA、ROS含量明显降低（

0.05），以人参败毒散低剂量组最佳（

0.05）。

结论

人参败毒散可促肠上皮修复，其机制可能与启动肠道自噬，减轻氧化应激损伤，促使肠干细胞增殖、分化有关。

Abstract

Objective

To explore the mechanism of Renshen Baidusan in repairing intestinal mucosa in ulcerative colitis （UC） by regulating autophagy to scavenge peroxides.

Method

The mouse model of UC was induced by free drinking of 3.0% dextran sulphate sodium （DSS） solution. Sixty male C57BL/6J mice were randomized into normal， model， mesalazine （0.3 g·kg

-1

）， and high-， medium-， and low-dose （12.35， 8.22， 4.11 g·kg

-1

， respectively） Renshen Baidusan groups （

=10）. The mice were administrated with corresponding drugs by gavage for 7 consecutive days. The colon tissue was stained with hematoxylin-eosin （HE） to reveal the pathological changes， and Alcian blue-Periodic acid Scheff （PAS/AB） staining was employed to observe the goblet cell changes. The fluorescence expression of reactive oxygen species （ROS） in the colon tissue was detected by the immunofluorescence assay. The activity of superoxide dismutase （SOD） and the content of malondialdehyde （MDA） were measured by the biochemical methods. Western blot was employed to determine the expression levels of proliferating cell nuclear antigen （PCNA）， microtubule-associated protein 1 light chain 3 （LC3）， leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 5 （LGR5）， and p62.

Result

Destroyed mucosal epithelial structure， intestinal gland destruction， loss of goblet cells， and massive infiltration of inflammatory cells appeared in the model group. Compared with the normal group， the model group showed increased tissue damage injury （TDI） score of the colon tissue， decreased SOD activity and LC3Ⅱ/Ⅰ， PCNA value， and elevated levels of p62， MDA， ROS， and LGR5 （

0.05）. Compared with the model group， different doses of Renshen Baidusan decreased the TDI score， promoted the generation of new goblet cells， elevated the levels of PCNA， LGR5， SOD， and LC3Ⅱ/Ⅰ， and lowered the levels of p62， MDA， and ROS （

0.05）. Moreover， the low dose group showed the best performance （

0.05）.

Conclusion

Renshen Baidusan can promote intestinal epithelial repair by activating intestinal autophagy， alleviating oxidative stress， and promoting intestinal stem cell proliferation and differentiation.

关键词

Keywords

references

AGRAWAL M ， SPENCER E A ， COLOMBEL J F ， et al . Approach to the management of recently diagnosed inflammatory bowel disease patients：A user's guide for adult and pediatric gastroenterologists ［J］. Gastroenterology ， 2021 ， 161 （ 1 ）： 47 - 65 .

DE LANGE K M ， BARRETT J C . Understanding inflammatory bowel disease via immunogenetics ［J］. J Autoimmun ， 2015 ， 64 ： 91 - 100 .

ANNESE V ， DAPERNO M ， RUTTER M D ， et al . European evidence based consensus for endoscopy in inflammatory bowel disease ［J］. J Crohns Colitis ， 2013 ， 7 （ 12 ）： 982 - 1018 .

曹勇，王东旭，孙妍，等 . miR-26a在溃疡性结肠炎中的表达及对自噬的影响［J］. 中国医科大学学报， 2018 ， 47 （ 9 ）： 807 - 811 .

ZHOU M ， XU W ， WANG J ， et al . Boosting mTOR-dependent autophagy via upstream TLR4-MyD88-MAPK signalling and downstream NF- κ B pathway quenches intestinal inflammation and oxidative stress injury ［J］. EBioMedicine ， 2018 ， 35 ： 345 - 360 .

黄茂光，谢胜，王金鑫，等 . 自噬在溃疡性结肠炎中的作用及中药干预研究进展［J］. 中国实验方剂学杂志， 2023 ， doi： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230428 http://dx.doi.org/10.13422/j.cnki.syfjx.20230428 .

GEREMIA A ， BIANCHERI P ， ALLAN P ， et al . Innate and adaptive immunity in inflammatory bowel disease ［J］. Autoimmun Rev ， 2014 ， 13 （ 1 ）： 3 - 10 .

熊珮宇，钟春，张培旭，等 . 基于AMPK/ULK1自噬通路探讨人参败毒散对溃疡性结肠炎黏膜屏障的干预机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2023 ， doi： 10.13422/j.cnki.syfjx.20222142 http://dx.doi.org/10.13422/j.cnki.syfjx.20222142 .

ASANO J ， SATO T ， ICHINOSE S ， et al . Intrinsic autophagy is required for the maintenance of intestinal stem cells and for irradiation-induced intestinal regeneration ［J］. Cell Rep ， 2017 ， 20 （ 5 ）： 1050 - 1060 .

郭静，莫友胜，王奇，等 . 当归补血汤对内皮祖细胞氧化应激损伤的保护作用［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 20 ）： 39 - 45 .

张薇，熊珮宇，刘俊宇，等 . 经典名方人参败毒散的历史沿革与现代临床应用［J］. 中国实验方剂学杂志， 2023 ， doi： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230443 http://dx.doi.org/10.13422/j.cnki.syfjx.20230443 .

太平惠民和剂局方［M］. 北京：人民卫生出版社， 1985 ： 51 .

范佳佳，刘阳，刘旎，等 . 《太平惠民和剂局方》中煮散剂的使用特点［J］. 中医杂志， 2019 ， 60 （ 4 ）： 291 - 294 .

焦其树，郝丽霞，吴治丽，等 . 经典名方中煮散和散剂粒度探讨［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021 ， 27 （ 1 ）： 1 - 6 .

刘起华，孙玉雯，刘凤麟，等 . 浅析《太平惠民和剂局方》中“散”的运用［J］. 辽宁中医杂志， 2015 ， 42 （ 2 ）： 369 - 371 .

陈晨，姜树民，石宇，等 . 基于MAPK通路探讨消痈止痢汤对溃疡性结肠炎大鼠的抗炎机制［J］. 时珍国医国药， 2022 ， 33 （ 7 ）： 1540 - 1545 .

彭成 . 中医药动物实验方法学［Ｍ］. 北京：人民卫生出版社， 2008 ： 119 - 120 .

AKCAN A ， MUHTAROGLU S ， AKGUN H ， et al . Ameliorative effects of bombesin and neurotensin on trinitrobenzene sulphonic acid-induced colitis， oxidative damage and apoptosis in rats ［J］. World J Gastroenterol ， 2008 ， 14 （ 8 ）： 1222 - 1230 .

KING J A ， UNDERWOOD F E ， PANACCIONE N ， et al . Trends in hospitalisation rates for inflammatory bowel disease in western versus newly industrialised countries：A population-based study of countries in the organisation for economic co-operation and development ［J］. Lancet Gastroenterol Hepatol ， 2019 ， 4 （ 4 ）： 287 - 295 .

KAPLAN G G . The global burden of IBD：From 2015 to 2025 ［J］. Nat Rev Gastroenterol Hepatol ， 2015 ， 12 （ 12 ）： 720 - 727 .

王钦，刘维新，李冬，等 . 高脂饮食下核因子 κ B调控自噬在小鼠溃疡性结肠炎中的作用及其机制［J］. 中国医科大学学报， 2022 ， 51 （ 5 ）： 420 - 424，428 .

吴玉泓 . 基于自噬JNK-Beclin1/Bcl-2信号通路探讨温补脾肾法治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究［D］. 兰州：甘肃中医药大学， 2022 .

司晓丽，王烨，王卓，等 . 芍药苷对DSS诱导大鼠慢性溃疡性结肠炎IL-17表达的影响［J］. 中国免疫学杂志， 2021 ， 37 （ 8 ）： 946 - 950 .

熊珮宇，陈岚，陈旭，等 . 基于“逆流挽舟”法探索人参败毒散对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障的干预作用［J］. 世界科学技术—中医药现代化， 2021 ， 23 （ 7 ）： 2285 - 2293 .

叶峻宏，韩宪伟，吕雯，等 . 苦参碱调控Sirt1/AMPK自噬通路减少白癜风小鼠黑素细胞丢失的机制研究［J］. 中药材， 2022 ， 45 （ 11 ）： 2749 - 2754 .

张哲，王杏，杨林泉，等 . 利拉鲁肽通过调控AMPK/mTOR自噬信号减轻糖尿病大鼠心肌炎症和氧化应激损伤［J］. 中国药理学通报， 2022 ， 38 （ 9 ）： 1308 - 1314 .

杨坤，孟捷，高霞，等 . 姜黄素联合阿托伐他汀对溃疡性结肠炎小鼠的保护作用及机制研究［J］. 世界中医药， 2022 ， 17 （ 2 ）： 182 - 186 .

田耀博，赵大庆，李香艳，等 . 人参多糖通过抑制ROS水平和凋亡保护H 2 O 2 诱导的心肌细胞氧化应激损伤［J］. 华中师范大学学报：自然科学版， 2018 ， 52 （ 2 ）： 240 - 247 .

熊艳玲，钟薏文，陈雅茜，等 . 基于抗炎和氧化应激角度研究参苓白术颗粒对脾虚湿困溃疡性结肠炎大鼠的作用机制［J］. 中药新药与临床药理， 2021 ， 32 （ 2 ）： 149 - 157 .

韩莹，蔡庆宇，张岩 . 香连丸对急性溃疡性结肠炎小鼠氧化应激介导的细胞自噬的影响研究［J］. 中国中医急症， 2019 ， 28 （ 5 ）： 851 - 853，862 .

LIU M ， RAO H ， LIU J ， et al . The histone methyltransferase SETD2 modulates oxidative stress to attenuate experimental colitis ［J］. Redox Biol ， 2021 ， 43 ： 102004 .

NAGAI H ， TATARA H ， TANAKA-FURUHASHI K ， et al . Homeostatic regulation of ROS-triggered hippo-yki pathway via autophagic clearance of Ref（2）P/p62 in the drosophila intestine ［J］. Dev Cell ， 2021 ， 56 （ 1 ）： 81 - 94 .

LEVY A ， STEDMAN A ， DEUTSCH E ， et al . Innate immune receptor NOD2 mediates LGR5 + intestinal stem cell protection against ROS cytotoxicity via mitophagy stimulation ［J］. Proc Natl Acad Sci USA ， 2020 ， 117 （ 4 ）： 1994 - 2003 .

BOAL CARVALHO P ， COTTER J . Mucosal Healing in Ulcerative colitis：A comprehensive review ［J］. Drugs ， 2017 ， 77 （ 2 ）： 159 - 173 .

SNIPPERT H J ， VAN DER FLIER L G ， SATO T ， et al . Intestinal crypt homeostasis results from neutral competition between symmetrically dividing LGR5 stem cells ［J］. Cell ， 2010 ， 143 （ 1 ）： 134 - 144 .

ALIPOUR M ， ZAIDI D ， VALCHEVA R ， et al . Mucosal barrier depletion and loss of bacterial diversity are primary abnormalities in paediatric ulcerative colitis ［J］. J Crohns Colitis ， 2016 ， 10 （ 4 ）： 462 - 471 .

闫凤娟，周琳，周海蓉 . 毛囊间充质干细胞移植治疗大鼠溃疡性结肠炎的实验研究［J］. 国际消化病杂志， 2021 ， 41 （ 6 ）： 451 - 456，465 .

张永锋，吴正治，熊鹰，等 . 结肠康泰对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜细胞增殖及周期的影响［J］. 中国中西医结合消化杂志， 2008 ， 16 （ 1 ）： 18 - 20 .

罗文捷，张启芳，孟云超，等 . 骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎小鼠受损肠黏膜修复作用的探究［J］. 安徽医科大学学报， 2019 ， 54 （ 12 ）： 1882 - 1887 .

陈梦梦，朱曙东 . 黄芪多糖对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜组织再生、修复的影响［J］. 中医临床研究， 2019 ， 11 （ 31 ）： 1 - 6 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

基于AMPK/ULK1自噬通路探讨人参败毒散对溃疡性结肠炎黏膜屏障的干预机制

中药调控Nrf2信号通路干预溃疡性结肠炎的研究进展

二十五味鬼臼丸激活PI3K/Akt/mTOR介导的自噬缓解去势大鼠骨质疏松作用