五虎汤加味对RSV感染哮喘小鼠气道炎症及肺组织Muc5AC、STAT3、NF-<italic style="font-style: italic">κ</italic>B、NLRP3蛋白表达的影响

于琳琳; 王婧; 邹亚; 程伟伟; 景晓平

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20231322

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五虎汤加味对RSV感染哮喘小鼠气道炎症及肺组织Muc5AC、STAT3、NF-κB、NLRP3蛋白表达的影响

药理 | 更新时间：2023-09-08

- 五虎汤加味对RSV感染哮喘小鼠气道炎症及肺组织Muc5AC、STAT3、NF-κB、NLRP3蛋白表达的影响
- Modified Wuhutang Alleviates Airway Inflammation and Down-regulates Expression of Muc5AC， STAT3， NF-κB， and NLRP3 in Lung Tissues of RSV-infected Asthmatic Mice
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第19期页码：108-115
- 作者机构：
  
  1.上海中医药大学，上海 201203
  2.上海市儿童医院，上海交通大学医学院附属儿童医院，上海 200062
  3.上海中医药大学附属普陀医院，上海 200062
- 作者简介：
  
  于琳琳，硕士，从事中医药治疗儿童肺、肾疾病研究，E-mail：yulinlin9762@163.com
  景晓平，博士，副主任医师，硕士生导师，从事中医药治疗儿童肺、肾疾病研究，E-mail：xiaopingjdoctor@126.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金面上项目(81674020);上海市科学技术委员会“科技创新行动计划”项目(21Y11921700);上海市儿童医院院级课题国家自然科学基金培育专项(2021YGZM01);上海市普陀区中心医院院级课题(2020311B)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231322
  中图分类号： R2-0;R22;R242;R2-031;R285.5
- 收稿日期：2023-03-10，
  
  网络出版日期：2023-05-30，
  
  纸质出版日期：2023-10-05
- 稿件说明：
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于琳琳,王婧,邹亚等.五虎汤加味对RSV感染哮喘小鼠气道炎症及肺组织Muc5AC、STAT3、NF-κB、NLRP3蛋白表达的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(19):108-115.

YU Linlin,WANG Jing,ZOU Ya,et al.Modified Wuhutang Alleviates Airway Inflammation and Down-regulates Expression of Muc5AC， STAT3， NF-κB， and NLRP3 in Lung Tissues of RSV-infected Asthmatic Mice[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(19):108-115.
于琳琳,王婧,邹亚等.五虎汤加味对RSV感染哮喘小鼠气道炎症及肺组织Muc5AC、STAT3、NF-κB、NLRP3蛋白表达的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(19):108-115. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231322.

YU Linlin,WANG Jing,ZOU Ya,et al.Modified Wuhutang Alleviates Airway Inflammation and Down-regulates Expression of Muc5AC， STAT3， NF-κB， and NLRP3 in Lung Tissues of RSV-infected Asthmatic Mice[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(19):108-115. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231322.

摘要

目的

探讨五虎汤加味对呼吸道合胞病毒（RSV）感染哮喘小鼠气道炎症及黏蛋白（Muc）5AC、转录激活因子3（STAT3）、核转录因子-

B（NF-

B）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）蛋白表达的影响。

方法

70只雄性6~8周龄BALB/c小鼠，每组10只，随机分为正常组、哮喘组（卵清蛋白，OVA）、RSV感染哮喘组（OVA+RSV）、五虎汤加味组（高、中、低剂量分别为4.08、2.04、1.02 g·kg

-1

·d

-1

）、地塞米松组（0.1 g·kg

-1

·d

-1

）。OVA致敏及雾化激发哮喘模型，经RSV滴鼻连续3次感染（1.0×10

PFU·mL

-1

，50 μL），构建RSV感染哮喘模型；五虎汤加味组予五虎汤加味灌胃；地塞米松组给予地塞米松注射液腹腔注射；正常组予等量生理盐水灌胃。末次激发24 h，在2.5%戊巴比妥钠麻醉下，留取肺组织进行苏木素-伊红（HE）、苦味酸-酸性品红（VG）染色观察气道炎症反应，免疫组织化学检测Muc5AC蛋白表达情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷酸化（p）-STAT3、STAT3、p-NF-

B、NF-

B、NLRP3蛋白表达情况。

结果

与正常组比较，OVA组小鼠气道炎性细胞浸润，组织充血水肿，胶原纤维沉积；OVA+RSV组小鼠气道炎性细胞浸润，组织充血水肿较OVA组更显著；与OVA+RSV组比较，五虎汤加味组能显著改善气道周围炎性细胞浸润，组织充血水肿，胶原纤维沉积明显减轻，其中高剂量组作用更加明显。免疫组化结果显示，与正常组比较，OVA组和OVA+RSV组Muc5AC蛋白表达水平均显著升高（

0.01）；与OVA+RSV组比较，五虎汤加味组可明显降低Muc5AC蛋白表达水平，其中高剂量组作用更加明显（

0.05）；与五虎汤加味高剂量组比较，地塞米松组可明显降低Muc5AC蛋白表达水平（

0.05）。在蛋白表达水平，与正常组比较，OVA组、OVA+RSV组p-STAT3、p-NF-

B、NLRP3蛋白表达明显升高（

0.05，

0.01）；与OVA+RSV组比较，五虎汤加味组可显著降低p-STAT3、p-NF-

B、NLRP3蛋白表达水平（

0.01）；与五虎汤加味高剂量组比较，地塞米松组可显著升高p-STAT3、p-NF-

B蛋白表达水平（

0.01）。

结论

五虎汤加味可以明显减轻RSV感染哮喘小鼠气道炎症，降低Muc5AC、p-STAT3、p-NF-

B、NLRP3蛋白的表达，提示五虎汤加味减轻RSV感染哮喘气道炎症可能与调控STAT3/NF-

B信号通路抑制NLRP3蛋白表达相关。

Abstract

Objective

To explore effect of modified Wuhutang on airway inflammation and expression of mucin （Muc） 5AC， signal transducer and activator of transcription 3 （STAT3）， nuclear factor kappa B （NF-

B）， and NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3 （NLRP3） in respiratory syncytial virus （RSV）-infected asthmatic mice.

Method

Seventy male BALB/c mice of 6-8 weeks old were randomized into normal control （CON）， asthma （ovalbumin， OVA）， RSV infection-induced asthma （OVA+RSV）， high-， medium-， and low-dose （4.08， 2.04， 1.02 g·kg

-1

·d

-1

， respectively） modified Wuhutang， and dexamethasone （Dxms， 0.1 g·kg

-1

） groups （

=10）. The model of asthma was established by sensitization and atomization inhalation with OVA. The RSV infection-induced asthma model was established by three consecutive RSV nasal infusions （1.0 × 10

PFU·mL

-1

， 50 μL）. Wuhutang was administrated by gavage， and Dxms by intraperitoneal injection

The CON group was given the same amount of normal saline by gavage. The mice were anesthetized with 2.5% pentobarbital sodium 24 h after the last administration， and then the lung tissue was stained by hematoxylin-eosin （HE） and Van Gieson （VG） for observation of airway inflammation. The immunohistochemical assay was employed to detect the expression of Muc5AC. Western blot was employed to determine the protein levels of phosphorylated （p）-STAT3， STAT3， p-NF-

B， NF-

B， and NLRP3.

Result

Compared with the CON group， the OVA group presented airway inflammatory cell infiltration， tissue hyperemia and edema， and collagen fiber deposition. The OVA+RSV group showed severer airway inflammatory cell infiltration and tissue hyperemia and edema than the OVA group. Compared with the OVA+RSV group， modified Wuhutang alleviated the airway inflammatory cell infiltration， tissue hyperemia and edema， and collagen fiber deposition， and the high-dose group had the best performance. Compared with the CON group， the OVA group and the OVA+RSV group showed increased expression level of Muc5AC （

0.01）. Compared with the OVA+RSV group， modified Wuhutang reduced the expression level of Muc5AC， and the reduction was significant in the high-dose group （

0.05）. Compared with the high-dose modified Wuhutang group， Dxms lowered the expression level of Muc5AC （

0.05）. Compared with the CON group， the OVA and OVA+RSV groups showed up-regulated protein levels of p-STAT3， p-NF-

B， and NLRP3 （

0.05，

0.01）. Compared with the OVA+RSV group， modified Wuhutang down-regulated the protein levels of p-STAT3， p-NF-

B， and NLRP3 （

0.01）. Compared with the high-dose modified Wuhutang group， the Dxms group showed up-regulated levels of p-STAT3， p-NF-

B proteins （

0.01）.

Conclusion

Modified Wuhutang can reduce airway inflammation and down-regulate the expression of Muc5AC， p-STAT3， p-NF-

B， and NLRP3 in RSV-infected asthmatic mice， which suggests that Wuhutang reduces airway inflammation in RSV-infected asthma by regulating the STAT3/NF-

B signaling pathway.

关键词

Keywords

references

NYIRO J U ， MUNYWOKI P ， KAMAU E ， et al . Surveillance of respiratory viruses in the outpatient setting in rural coastal Kenya： Baseline epidemiological observations ［J］. Wellcome Open Res ， 2018 ， doi： 10.12688/wellcomeopenres.14662.1 http://dx.doi.org/10.12688/wellcomeopenres.14662.1 .

ANDERSON L J ， JADHAO S J ， PADEN C R ， et al . Functional features of the respiratory syncytial virus G protein ［J］. Viruses ， 2021 ， 13 （ 7 ）： 1214 .

REZAEE F ， LINFIELD D T ， HARFORD T J ， et al . Ongoing developments in RSV prophylaxis： A clinician's analysis ［J］. Curr Opin Virol ， 2017 ， 24 ： 70 - 78 .

ROCCA A ， BIAGI C ， SCARPINI S ， et al . Passive immunoprophylaxis against respiratory syncytial virus in children： Where are we now？［J］. Int J Mol Sci ， 2021 ， 22 （ 7 ）： 3703 .

BONSER L R ， ERLE D J . Airway mucus and asthma： The role of Muc5AC and Muc5B ［J］. J Clin Med ， 2017 ， 6 （ 12 ）： 112 .

MARTINON F ， BURNS K ， TSCHOPP J . The inflammasome： A molecular platform triggering activation of inflammatory caspases and processing of proIL-beta ［J］. Mol Cell ， 2002 ， 10 （ 2 ）： 417 - 426 .

CHOUDHURY S M ， MA X ， ABDULLAH S W ， et al . Activation and inhibition of the NLRP3 inflammasome by RNA viruses ［J］. J Inflamm Res ， 2021 ， 14 ： 1145 - 1163 .

AN Y ， ZHANG H ， WANG C ， et al . Activation of ROS/MAPKs/NF- κ B/NLRP3 and inhibition of efferocytosis in osteoclast-mediated diabetic osteoporosis ［J］. FASEB J ， 2019 ， 33 （ 11 ）： 12515 - 12527 .

HILLMER E J ， ZHANG H ， LI H S ， et al . STAT3 signaling in immunity ［J］. Cytokine Growth Factor Rev ， 2016 ， 31 ： 1 - 15 .

凌晓颖，孙逊，李维峰，等 . 清肺口服液黄酮类成分改善RSV感染小鼠肺上皮屏障损伤的机制研究［J］. 南京中医药大学学报， 2022 ， 38 （ 6 ）： 490 - 495 .

李梦雯，范欣生，周丽萍，等 . 麻杏石甘汤及拆方对RSV加重型哮喘气道炎症的保护作用及调控TRPV1的机制研究［J］. 中国中药杂志， 2022 ， 47 （ 21 ）： 5872 - 5881 .

于琳琳，王婧，丁惠玲，等 . HPLC法同时测定五虎汤加味中6种成分［J］. 中成药， 2023 ， 45 （ 2 ）： 386 - 389 .

于琳琳，王婧，叶智祺，等 . 五虎汤加味治疗儿童哮喘急性发作期痰热阻肺证的临床随机对照观察［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 5 ）： 95 - 101 .

江平康，刘群，杨松沛，等 . 中药复方总化学成分（浸膏）提取工艺研究［J］. 中国畜牧兽医， 2011 ， 38 （ 7 ）： 242 - 245 .

YU L ， WANG J ， ZOU Y ， et al . Qingfei oral liquid inhibited autophagy to alleviate inflammation via mTOR signaling pathway in RSV-infected asthmatic mice ［J］. Biomed Pharmacother ， 2021 ， 138 ： 111449 .

SUN J ， LI L ， WU J ， et al . Effects of baicalin on airway remodeling in asthmatic mice ［J］. Planta Med ， 2013 ， 79 （ 3/4 ）： 199 - 206 .

黄纯，周林英，谭丽琴，等 . 儿童支气管哮喘发病机制及相关治疗新进展［J］. 中国社区医师， 2019 ， 35 （ 32 ）： 6 - 8，10 .

包海鹏，史琦，阎玥，等 . 支气管哮喘的干预现状研究与展望［J］. 中华中医药学刊， 2020 ， 38 （ 11 ）： 164 - 166 .

REDDEL H K ， BACHARIER L B ， BATEMAN E D ， et al . Global Initiative for Asthma Strategy 2021： Executive summary and rationale for key changes ［J］. Eur Respir J ， 2022 ， 59 （ 1 ）： 2102730 .

儿童支气管哮喘规范化诊治建议（2020年版）［J］. 中华儿科杂志， 2020 ， 58 （ 9 ）： 708 - 717 .

QURESHI U A ， BILQUES S ， UL HAQ I ， et al . Epidemiology of bronchial asthma in school children （10-16 years） in Srinagar ［J］. Lung India ， 2016 ， 33 （ 2 ）： 167 - 173 .

O'BYRNE P M ， PEDERSEN S ， LAMM C J ， et al . Severe exacerbations and decline in lung function in asthma ［J］. Am J Respir Crit Care Med ， 2009 ， 179 （ 1 ）： 19 - 24 .

全国儿科哮喘协作组 . 2000年与1990年儿童支气管哮喘患病率的调查比较［J］. 中华结核和呼吸杂志， 2004 ， 27 （ 2 ）： 112 - 116 .

全国儿科哮喘协作组，中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所 . 第三次中国城市儿童哮喘流行病学调查［J］. 中华儿科杂志， 2013 ， 51 （ 10 ）： 729 - 735 .

陆玮 . 加味五虎汤治疗成人社区获得性肺炎（非重症）痰热壅肺证患者的临床研究［D］. 南京：南京中医药大学， 2021 .

董秀兰，许华，张雪丽，等 . 加味五虎汤对小儿支原体肺炎临床疗效及T细胞亚群的影响［J］. 世界中医药， 2021 ， 16 （ 3 ）： 458 - 462，466 .

武进华，贾林萍 . 加味五虎汤联合药物贴敷治疗痰热闭肺型小儿支原体肺炎［J］. 中医学报， 2018 ， 33 （ 10 ）： 1878 - 1881 .

迟天燕，纪雪飞，夏明钰，等 . 五虎汤6种活性成分对离体豚鼠气管平滑肌的作用［J］. 中国实验方剂学杂志， 2009 ， 15 （ 3 ）： 52 - 55 .

孟珊珊，吕芳芳，胡晓光，等 . 柚皮素对RSV A2株感染引起气道黏液高分泌的抑制作用［J］. 温州：温州医科大学学报， 2015 ， 45 （ 9 ）： 631 - 635 .

张培旭 . 基于NF- κ B信号通路研究小青龙汤对肺癌H292细胞分泌Muc5AC的调控机制［D］. 郑州：河南中医药大学， 2018 .

邢琼琼，赵霞，杨睿雪，等 . 固本防哮饮对支气管哮喘缓解期小鼠嗜酸性粒细胞及黏液分泌相关因子的影响［J］. 中医杂志， 2017 ， 58 （ 18 ）： 1581 - 1584 .

陈竹，彭玉，陶琼，等 . 清气化痰汤对哮喘小鼠肺组织TLR4和MUC5AC表达影响［J］. 安徽医科大学学报， 2018 ， 53 （ 8 ）： 1203 - 1209，1216 .

丁伊，王孟清，罗银河，等 . 五虎汤抑制STAT3蛋白调控树突细胞自噬治疗RSV诱发哮喘小鼠［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021 ， 27 （ 9 ）： 9 - 18 .

JIANG Y ， YANG W ， GUI S . Procyanidin B2 protects rats from paraquat-induced acute lung injury by/ inhibiting NLRP3 inflammasome activation ［J］. Immunobiology ， 2018 ， 223 （ 10 ）： 555 - 561 .

JO E K ， KIM J K ， SHIN D M ， et al . Molecular mechanisms regulating NLRP3 inflammasome activation ［J］. Cell Mol Immunol ， 2016 ， 13 （ 2 ）： 148 - 159 .

HOSSEINIAN N ， CHO Y ， LOCKEY R F ， et al . The role of the NLRP3 inflammasome in pulmonary diseases ［J］. Ther Adv Respir Dis ， 2015 ， 9 （ 4 ）： 188 - 197 .

周凛梅 . MCC950干预对哮喘小鼠气道粘蛋白Muc5ac水平的影响及机制研究［D］. 遵义：遵义医科大学， 2022 .

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