黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关Bax和Caspase-12的影响

张岩; 龙泓竹; 王曦鹏; 曹伟芳; 吴丽丽; 刘铜华; 周静鑫

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20231328

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黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关Bax和Caspase-12的影响

中医药防治代谢性疾病专题 | 更新时间：2023-07-18

- 黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关Bax和Caspase-12的影响
- Effect of Modified Huangqi Guizhi Wuwutang on Apoptosis-related Bax and Caspase-12 of Sciatic Nerve Cells in Diabetes Rats
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第16期页码：58-64
- 作者机构：
  
  1.首都医科大学附属北京友谊医院，北京 100050
  2.中日友好医院中医肺病二部，北京 100029
  3.北京第二外国语学院校医院，北京 100024
  4.中国医学科学院基础医学研究所，北京 100007
  5.北京中医药大学中医学院，北京 100029
  6.北京中医药大学东直门医院，北京 100700
- 作者简介：
  
  张岩，主治医师，从事中医药防治糖尿病及其并发症临床和基础研究，E-mail： lyla11@126.com
  周静鑫，博士，副主任医师，从事中医药干预内分泌系统疾病的临床与基础研究，E-mail： zhoujingxin2000@126.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81804091)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231328
  中图分类号： R2-0;R22;R242;R2-031;R285.5
- 收稿日期：2023-03-24，
  
  网络出版日期：2023-06-13，
  
  纸质出版日期：2023-08-20
- 稿件说明：
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张岩,龙泓竹,王曦鹏等.黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关Bax和Caspase-12的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(16):58-64.

ZHANG Yan,LONG Hongzhu,WANG Xipeng,et al.Effect of Modified Huangqi Guizhi Wuwutang on Apoptosis-related Bax and Caspase-12 of Sciatic Nerve Cells in Diabetes Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(16):58-64.
张岩,龙泓竹,王曦鹏等.黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关Bax和Caspase-12的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(16):58-64. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231328.

ZHANG Yan,LONG Hongzhu,WANG Xipeng,et al.Effect of Modified Huangqi Guizhi Wuwutang on Apoptosis-related Bax and Caspase-12 of Sciatic Nerve Cells in Diabetes Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(16):58-64. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231328.

摘要

目的

研究黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）和胱天蛋白酶-12（Caspase-12）蛋白与mRNA表达的影响，以探究黄芪桂枝五物汤加减治疗糖尿病周围神经病变的作用机制。

方法

选用动物实验方法进行研究，将60只雄性SD大鼠通过高糖高脂饲料喂养联合链尿佐菌素（STZ）腹腔注射诱导成糖尿病大鼠动物模型，连续3 d随机血糖≥16.7 mmol·L

-1

者为糖尿病大鼠造模成功，将48只造模成功的糖尿病大鼠随机分为模型组、

-硫辛酸组（0.026 8 g·kg

-1

·d

-1

）、中药高、低剂量组（2.5、1.25 g·kg

-1

·d

-1

），每组各12只，并设正常组10只。监测大鼠体质量和随机血糖水平；干预16周末通过Key point肌电采集系统检测大鼠坐骨神经传导速度；分别通过蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠坐骨神经中Bax和Caspase-12蛋白与mRNA的表达。

结果

与正常组比较，模型组大鼠体质量显著下降（

0.01），随机血糖水平显著升高（

0.01）；干预16周，与模型组比较，中药高剂量组大鼠体质量明显升高（

0.05），其他给药组体质量变化差异无统计学意义；各给药组随机血糖水平均显著降低（

0.01）。与正常组比较，干预16周，模型组大鼠运动和感觉神经传导速度显著降低（

0.01）；与模型组比较，各给药组大鼠运动和感觉神经传导速度均明显升高（

0.05，

0.01）。与正常组比较，模型组大鼠坐骨神经Bax和Caspase-12蛋白表达显著升高（

0.01）；与模型组比较，各给药组大鼠坐骨神经Bax和Caspase-12蛋白表达均显著降低（

0.01）。与正常组比较，模型组大鼠坐骨神经Bax和Caspase-12 mRNA表达显著升高（

0.01）；与模型组比较，

-硫辛酸组、中药高剂量组大鼠坐骨神经Bax mRNA表达明显降低（

0.05，

0.01），中药低剂量组坐骨神经Bax mRNA表达降低有下降趋势；各给药组大鼠坐骨神经Caspase-12 mRNA表达显著降低（

0.01）。

结论

黄芪桂枝五物汤加减可能通过抑制坐骨神经细胞凋亡来改善和修复糖尿病大鼠坐骨神经损伤。

Abstract

Objective

To investigate the effect of modified Huangqi Guizhi Wuwutang （MHGW） on the protein and mRNA expression of B-cell lymphoma-2-associated X protein （Bax） and cysteinyl aspartate specific proteinase-12 （Caspase-12） related to the apoptosis of sciatic nerve cells in diabetes rats to explore the mechanism of MHGW in the treatment of peripheral neuropathy in diabetes.

Method

Animal experiments were conducted. A diabetes model was induced in sixty male sprague-dawley （SD） rats by feeding on a high-sugar and high-fat diet combined with streptozotocin （STZ） intraperitoneal injection. Rats with random blood glucose levels ≥ 16.7 mmol·L

-1

for three consecutive days were considered to have successfully developed diabetes. Forty-eight rats that successfully developed diabetes were randomly divided into a model group， an

-lipoic acid group （0.026 8 g·kg

-1

·d

-1

）， a high-dose MHGW group （2.5 g·kg

-1

·d

-1

）， and a low-dose MHGW group （1.25 g·kg

-1

·d

-1

）， with 12 rats in each group. Another 10 rats were assigned to the normal group. Body weight and random blood glucose levels of the rats were monitored. At the end of a 16-week intervention period， the sciatic nerve conduction velocity of the rats was measured using the Key point electromyography collection system. The protein and mRNA expression of Bax and Caspase-12 in the sciatic nerve cells was detected by Western blot analysis and real-time quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR）， respectively.

Result

Compared with the normal group， the model group showed a significant decrease in body weight （

0.01） and a significant increase in random blood glucose levels （

0.01）. After a 16-week intervention， compared with the model group， the high-dose MHGW group exhibited a significant increase in body weight （

0.05）， while there were no statistically significant differences in body weight changes among the other treatment groups. Random blood glucose levels significantly decreased in all treatment groups （

0.01）. After 16 weeks of intervention， compared with the normal group， the model group had significantly reduced motor and sensory nerve conduction velocities （

0.01）. Compared with the model group， all treatment groups showed significant increases in motor and sensory nerve conduction velocities （

0.05，

0.01）. The expression of Bax and Caspase-12 proteins in the sciatic nerve cells was significantly elevated in the model group compared with that in the normal group （

0.01）. In contrast， all treatment groups showed significant reductions in the expression of Bax and Caspase-12 proteins in the sciatic nerve cells as compared with that in the model group （

0.01）. The expression of Bax and Caspase-12 mRNA in the sciatic nerve cells significantly increased in the model group compared with that in the normal group （

0.01）. Compared with the model group， the

-lipoic acid group and the high-dose MHGW group showed significant reductions in the expression of Bax mRNA in the sciatic nerve cells （

0.05，

0.01）， while the low-dose MHGW group showed a decreasing trend in the expression of Bax mRNA. The expression of Caspase-12 mRNA in the sciatic nerve cells significantly decreased in all treatment groups （

0.01）.

Conclusion

MHGW may improve and repair sciatic nerve damage in diabetes rats by inhibiting sciatic nerve cell apoptosis.

关键词

Keywords

references

中华中医药学会糖尿病分会 . 糖尿病周围神经病变中医临床诊疗指南（2016年版）［J］. 中医杂志， 2017 ， 58 （ 7 ）： 625 - 630 .

中华医学会糖尿病学分会 . 中国2型糖尿病防治指南（2013年版）［J］. 中华糖尿病杂志， 2014 （ 7 ）： 447 - 498 .

VINIK A I . Diabetic sensory and motor neuropathy ［J］. N Engl J Med ， 2016 ， 374 （ 15 ）： 1455 - 1464 .

RICHNER M ， FERREIRA N ， DUDELE A ， et al . Functional and structural changes of the blood-nerve-barrier in diabetic neuropathy ［J］. Front Neurosci ， 2019 ， doi： 10.3389/fnins.2018.01038 http://dx.doi.org/10.3389/fnins.2018.01038 .

YAO W ， YANG X ， ZHU J ， et al . IRE1 α siRNA relieves endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis and alleviates diabetic peripheral neuropathy in vivo and in vitro ［J］. Sci Rep ， 2018 ， 8 （ 1 ）： 2579 .

CAO Z ， HUANG D ， TANG C ， et al . Pyroptosis in diabetes and diabetic nephropathy ［J］. Clin Chim Acta ， 2022 ， 531 ： 188 - 196 .

陈彦旭，何流，宋小彪，等 . 雪旺细胞凋亡与糖尿病周围神经病变的相关性［J］. 生命的化学， 2022 ， 42 （ 1 ）： 27 - 33 .

张明珠，李娜，虞梅 . 中医药治疗糖尿病周围神经病变临床研究进展［J］. 山西中医， 2021 ， 37 （ 2 ）： 61 - 62 .

裘越，喻嵘，武文洁 . 中医药治疗糖尿病周围神经病变的用药及Meta分析［J］. 实用中医内科杂志， 2022 ， 36 （ 8 ）： 11-14， 148 - 150 .

张岩 . 基于调控NF- κ B/Nrf2信号通路糖痹康改善糖尿病周围神经病变作用机理研究［D］. 北京：北京中医药大学， 2016 .

易文明，孙文，郭翔宇，等 . 糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠氧化应激及细胞凋亡的影响［J］. 环球中医药， 2015 ， 8 （ 7 ）： 798 - 802 .

穆晓红，刘铜华，孙文，等 . 糖痹康对高糖培养雪旺细胞自噬相关蛋白的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2018 ， 24 （ 10 ）： 90 - 94 .

张岩，赵丹，王曦鹏，等 . 糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经p-JNK和Bcl-2表达的影响［J］. 北京中医药， 2022 ， 41 （ 11 ）： 1216 - 1221 .

朱翠翠，张社峰 . 糖尿病周围神经病变中医临床研究进展［J］. 中医研究， 2020 ， 33 （ 6 ）： 75 - 78 .

赵天奇，张兰 . 糖尿病周围神经病变中西医诊治研究进展［J］. 辽宁中医药大学学报， 2018 ， 20 （ 11 ）： 216 - 219 .

WANG X ， XU G ， LIU H ， et al . Inhibiting apoptosis of Schwann cell under the high-glucose condition： A promising approach to treat diabetic peripheral neuropathy using Chinese herbal medicine ［J］. Biomed Pharmacother ， 2023 ， doi： 10.1016/j.biopha.2022.114059 http://dx.doi.org/10.1016/j.biopha.2022.114059 .

国家中医药管理局 . 22个专业95个病种中医诊疗方案［M］. 北京：中国中医药出版社， 2010 ： 177 .

张宏，刘铜华 . 论“毒”与糖尿病周围神经病变［J］. 吉林中医药， 2011 ， 31 （ 9 ）： 817 - 819 .

张露 . 糖痹康对糖尿病小鼠周围神经PTEN介导DNA氧化损伤的作用与机制研究［D］. 北京：北京中医药大学， 2018 .

张岩，穆晓红，孙文，等 . 糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经Keap1/Nrf2信号的作用机制［J］. 中华中医药杂志， 2016 ， 31 （ 5 ）： 1822 - 1827 .

张亚奇，秦灵灵，白惠中，等 . 基于网络药理学和实验验证探讨糖痹康颗粒治疗糖尿病周围神经病变的分子机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2023 ， 29 （ 9 ）： 81 - 90 .

白惠中，秦灵灵，张亚奇，等 . 糖痹康颗粒调控AMPK/NF- κ B通路改善糖尿病大鼠坐骨神经炎症反应［J］. 中国实验方剂学杂志， 2023 ， 29 （ 9 ）： 91 - 98 .

李婷，陈旭辉，张玥，等 . 糖尿病周围神经病变及痛性糖尿病神经病变机制新方向［J］. 中国疼痛医学杂志， 2019 ， 25 （ 9 ）： 643 - 647 .

朱笳悦，姚伟洁，许利平，等 . 糖络宁含药血清对高糖环境下RSC96细胞Keap1/Nrf2/Bcl-2途径的作用机制研究［J］. 北京中医药， 2019 ， 38 （ 2 ）： 106 - 113 .

董艳，刘咏梅，王阶 . 冠心病相关细胞凋亡及中药抗凋亡机制的研究进展［J］. 中西医结合心脑血管病杂志， 2020 ， 18 （ 14 ）： 2242 - 2247 .

WALENSKY L D . Targeting Bax to drug death directly ［J］. Nat Chem Biol ， 2019 ， 15 （ 7 ）： 657 - 665 .

董雅洁，高维娟 . Bcl-2、Bax、Caspase-3在细胞凋亡中的作用及其关系［J］. 中国老年学杂志， 2012 ， 32 （ 21 ）： 4828 - 4830 .

HASTAK K ， GUPTA S ， AHMAD N ， et al . Role of p53 and NF-kappaB in epigallocatechin-3-gallate-induced apoptosis of LNCaP cells ［J］. Oncogene ， 2003 ， 22 （ 31 ）： 4851 - 4859 .

HE X ， SUN J ， HUANG X . Expression of caspase-3， Bax and Bcl-2 in hippocampus of rats with diabetes and subarachnoid hemorrhage ［J］. Exp Ther Med ， 2018 ， 15 （ 1 ）： 873 - 877 .

练毅，宫丽荣，余剑波，等 . 内质网应激介导的细胞凋亡与急性肺损伤的研究进展［J］. 中国中西医结合外科杂志， 2021 ， 27 （ 2 ）： 358 - 360 .

AOYAMA K ， BURNS D M ， SUH S W ， et al . Acidosis causes endoplasmic reticulum stress and caspase-12-mediated astrocyte death ［J］. J Cereb Blood Flow Metab ， 2005 ， 25 （ 3 ）： 358 - 370 .

BROWNLEE M . The pathobiology of diabetic complications： A unifying mechanism ［J］. Diabetes ， 2005 ， 54 （ 6 ）： 1615 - 1625 .

MANTUANO E ， HENRY K ， YAMAUCHI T ， et al . The unfolded protein response is a major mechanism by which LRP1 regulates Schwann cell survival after injury ［J］. J Neurosci ， 2011 ， 31 （ 38 ）： 13376 - 13385 .

冉丽莎，吴亚曾，劳筱清，等 . 糖尿病周围神经病变细胞凋亡机制及中医药干预研究进展［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 5 ）： 256 - 265 .

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