Wirkung der Formel Yishen Huayu auf die Autophagie von transdifferenzierten TCMK-1-Zellen basierend auf dem SIRT1/FoxO1-Signalweg

LI Qingru ,  

ZHANG Linqi ,  

LI Binyi ,  

GE Zihao ,  

摘要

Das Ziel dieser Studie war es, die schützende Wirkung und die möglichen Wirkungswege der Formel Yishen Huayu auf die Transdifferenzierung der epithelialen Zellen des Nierenröhrchens der Maus (TCMK-1) zu untersuchen, die durch den Transforming Growth Factor-β1 (TGF-β1) induziert wurde. Methoden: Ein Modell zur Transdifferenzierung von TCMK-1-Zellen wurde unter Verwendung einer massiven Konzentration von 10 μg·L-1 TGF-β1 zur Induktion der TCMK-1-Zellen etabliert, mit einer Kontrollgruppe, einer Modellgruppe, einer Formel Yishen Huayu-Gruppe (Blutserum mit 10% Formel Yishen Huayu), einer Losartan-Gruppe (Blutserum mit 10% Losartan), einer EX527+TGF-β1-Gruppe, einer EX527+Formel Yishen Huayu-Gruppe und einer EX527-Gruppe. Die Expression der Proteine glatte Muskelaktin (α-SMA), E-Cadherin und das mit Mikrotubuli assoziierte Protein 1 leichte Kette 3 (LC3) wurde durch Immunfluoreszenz nachgewiesen. Die Expressionen von Proteinen und mRNA im Zusammenhang mit der Transdifferenzierung, der Autophagie und den Signalwegen wurden mittels Western Blot und Echtzeit-PCR gemessen. Ergebnisse: Die Ergebnisse der Echtzeit-PCR und des Western Blots zeigten, dass im Vergleich zur Kontrollgruppe die Expressionen von α-SMA, des mit Ubiquitin verbundenen Proteins p62 und von Ac-FoxO1 in den Modellgruppen, EX527+TGF-β1 und EX527 signifikant erhöht waren (P<0.01); im Vergleich zur Modellgruppe waren die Expressionen von α-SMA und des Proteins p62 in der Formel Yishen Huayu-Gruppe und der Losartan-Gruppe signifikant reduziert (P<0.05, P<0.01), und der Ac-FoxO1-Spiegel in der Formel Yishen Huayu-Gruppe war signifikant reduziert (P<0.05), während es in der Losartan-Gruppe keine signifikante Veränderung gab; im Vergleich zur Formel Yishen Huayu-Gruppe gab es signifikante Unterschiede in der Expression von p62-mRNA, α-SMA und p62 in der Losartan-Gruppe (P<0.05); im Vergleich zur unbehandelten Kontrollgruppe waren die Expressionen von LC3, Beclin1, SIRT1 (Silencing Information Regulator Factor 1) und FoxO1 in den Modellgruppen, EX527+TGF-β1 und EX527 signifikant reduziert (P<0.01); die Expressionen von E-Cadherin in den Modellgruppen, EX527+TGF-β1 sowie EX527 waren signifikant reduziert (P<0.01), und in der EX527-Gruppe erreichten die Veränderungen keine statistische Signifikanz; im Vergleich zur Modellgruppe waren die Expressionen von E-Cadherin, LC3, Beclin1, SIRT1 und FoxO1 in der Formel Yishen Huayu-Gruppe und der Losartan-Gruppe signifikant erhöht (P<0.05, P<0.01); im Vergleich zur Formel Yishen Huayu-Gruppe waren die Expressionen von LC3, SIRT1 und FoxO1-mRNA in der Losartan-Gruppe signifikant unterschiedlich (P<0.05, P<0.01). Die Ergebnisse der Immunfluoreszenz waren konsistent mit den Ergebnissen des Western Blots und der Echtzeit-PCR. Schlussfolgerung: Die Formel Yishen Huayu könnte die Transdifferenzierung von TCMK-1-Zellen durch Aktivierung des SIRT1/FoxO1-Signalwegs zur Förderung der Autophagie und Entlastung des Autophagie-Wegs abschwächen.

关键词

Formel Yishen Huayu; Epithelzellen des Nierenröhrchens (TCMK-1); SIRT1/FoxO1-Signalweg; Transdifferenzierung; Autophagie

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