Resümee
Ziel der Studie ist es, die Auswirkungen der Verabreichung von Hé Xiāoyáosǎn auf die Lern- und Gedächtnisleistungen von Alzheimer-Mausmodellen zu beobachten und den Wirkmechanismus durch den NLRP3/Caspase-1/Gasdermin-D (GSDMD)-Signalweg bei der neuroinflammatorischen Reaktion zu erforschen. Dazu wurden 4 Monate alte SPF-APP/PS1-Mäuse zufällig in eine Modellgruppe, eine MCC950-Gruppe und Hoch-, Mittel- und Niedrigdosis-Hé Xiāoyáosǎn-Gruppen aufgeteilt, und C57BL/6J-Mäuse dienten als Kontrollgruppe. Nach einer Anpassungsfütterung von 7 Tagen wurden die Mäuse in den verschiedenen Gruppen unterschiedlich interventioniert: Die Hoch-, Mittel- und Niedrigdosis-Hé Xiāoyáosǎn-Gruppen erhielten eine orale Verabreichung der entsprechenden Dosierung der Arzneiflüssigkeit (25,79, 12,90, 6,45 g·kg-1·d-1), die MCC950-Gruppe erhielt eine intraperitoneale Injektion (10 mg·kg-1·2 d-1), und die Kontrollgruppe erhielt eine orale Verabreichung einer äquivalenten Menge physiologischer Kochsalzlösung.HMEITS-Nach 90 Tagen Nach intervention wurden die Lern- und Gedächtnisleistungen durch Tests im Y-Maze und im Morris-Wasserlabyrinth getestet, die Veränderungen der Neuronenstruktur im Hippocampus durch Hämatoxylin-Eosin-Färbung beobachtet, der Expressionsgrad des Amyloidvorläuferproteins (APP) im CA3-Bereich des Hippocampus durch Immunhistochemie untersucht, das Expressionsniveau der Interleukine (IL) -10, IL-18 und IL-1β in den Hippokamustextures durch enzymgebundenes Immunosorbens-Assay (ELISA) gemessen, die Expression von NLRP3, Caspase-1, GSDMD und GSDMD-N in den Hippokamustexturen durch Western-Blot untersucht und die Koexpression von GSDMD-N und des Calcium-bindenden Moleküls-1 (Iba-1) durch Immunfluoreszenz nachgewiesen. Die Ergebnisse zeigten, dass ① im Y-Maze-Test die spontane Wechselrate (P <0,01) signifikant anstieg in den Hoch- und Niedrigdosis-Hé Xiāoyáosǎn-Gruppen im Vergleich zur Kontrollgruppe.Das ② im Morris-Wasserlabyrinth-Test zeigte, dass die Latenzzeit des Vermeidens im 1- bis 4-Tage-Ortungsnavigationstest mit zunehmender Trainingszeit für alle Gruppen verkürzt wurde. Am 4. Tag stieg die Vermeidungszeit im Modell erheblich an (P <0,05) im Vergleich zur Kontrollgruppe， wobei die MCC950-Gruppe und die Niedrigdosis-Hé Xiāoyáosǎn-Gruppe im Vergleich mit dem Modell die Vermeidungszeit (P <0,05) verkürzten. Im Raumforschungstest im 1, ② 个空 叠,与 空 白 与 空 白 与 空 白 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 增 加 增 (P <0,01) 。 ③ Die Hämatoxylin-Eosin-Färbung zeigte Zellschäden im CA3-Bereich des Hippocampus der Modellgruppe， während die verschiedenen Dosierungen von MCC950 und Hé Xiāoyáosǎn die Zellschäden im CA3-Bereich des Hippocampus der APP/PS1-Mäuse in variabler Weise verbesserten. ④ Die immunhistochemischen Ergebnisse zeigten， dass die Expression von APP im CA3-Bereich des Hippocampus in der Modellgruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant anstieg (P <0,01), und dass die verschiedenen Dosierungen von MCC950 und Hé Xiāoyáosǎn den Expression von APP im CA3-Bereich des Hippocampus reduzierten (P <0,01). Das ⑤ ELISA zeigte， dass die IL-18-, IL-1β- und IL-10-Spiegel im Hippocampus im Vergleich zur Kontrollgruppe jeweils erhöht und verringert wurden (P <0,01). Die IL-18-Spiegel im Hippocampus der MCC950-Gruppe und der Niedrigdosis-Hé Xiāoyáosǎn-Gruppe reduzierten sich im Vergleich zur Modellgruppe (P <0,01)， während die IL-1β-Spiegel im Hippocampus der MCC950-Gruppe und der Niedrigdosis-Hé Xiāoyáosǎn-Gruppe reduzierten sich (P <0,01)， und die IL-10-Spiegel im Hippocampus der MCC950-Gruppe und der Niedrigdosis-Hé Xiāoyáosǎn-Gruppe erhöhten sich (P <0,05、P <0,01). ⑥ Die Western-Blot-Ergebnisse zeigten， dass die Expression von NLRP3, Caspase-1, GSDMD und GSDMD-N im Hippocampus in der Modellgruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant anstieg (P <0,01). Die verschiedenen Behandlungen führten zu einem Rückgang des NLRP3- und des Caspase-1-Gehalts im Hippocampus (P <0,05,。 P <0,01)， einem Rückgang des GSDMD-Gehalts im Hippocampus bei hoher, mittlerer und niedriger Dosis Hé Xiāoyáosǎn (P <0,05,。 P <0,01)， und einem Rückgang des GSDMD-N-Gehalts im Hippocampus bei mittlerer und niedriger Dosis Hé Xiāoyáosǎn (P <0,05,。 P <0,01) im Vergleich zur Modellgruppe. ⑦ Die Ergebnisse der Immunfluoreszenz zeigten， dass die Koexpression von GSDMD-N und Iba-1 im Hippocampusbereich in der Modellgruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant anstieg (P <0,01). Die verschiedenen Behandlungen führten zu einem Rückgang der Koexpression von GSDMD-N und Iba-1 im Hippocampusbereich (P <0,01). Fazit: Hé Xiāoyáosǎn könnte die Freisetzung von Entzündungsmediatoren regulieren, indem der NLRP3/Caspase-1/GSDMD-Signalweg reguliert wird, was zu einer Linderung der neurologischen Entzündung, einer Verbesserung der histologischen Veränderungen im Hippocampus und der Lern- und Gedächtnisstörungen führt und die Alzheimer-Krankheit behandelt.
Schlüsselwort
Alzheimer-Krankheit; Hé Xiāoyáosǎn; neuroinflammation; NLRP3/Caspase-1/GSDMD-Signalweg; Experimentelle Studie
