Molekulare quantitative Bestimmung von Angelika-Rohstoffen und deren verarbeiteten Produkten basierend auf der Herb-Q-Methode

ZHANG Mingyu ,  

JIANG Wenjun ,  

JI Baoyu ,  

WANG Yue ,  

ZHANG Haitao ,  

ZHANG Haobo ,  

FENG Xue ,  

LI Xiwen ,  

摘要

Ziel: Die Angelika (当归) ist ein häufig verwendetes und großes Arzneimittel mit doppeltem Lebensmittel- und Nutzencharakter, bei dem es auf dem Markt häufig zu Verfälschungen kommt, die die klinische Wirksamkeit der Präparate erheblich beeinträchtigen. Die qualitative Identifikation von Verfälschungen ist inzwischen gut entwickelt, jedoch fehlen quantitative Nachweismethoden für Verfälschungen in verarbeiteten Produkten. Diese Studie führt eine quantitative Untersuchung an Angelika und ihrer leicht verwechselbaren nahen Verwandten „Tu Dang Gui“ (koreanische Angelika) durch, mit dem Ziel, eine molekulare quantitative Nachweismethode für Arzneipflanzen (Herb-Q) zu etablieren, die als Demonstration für die Entwicklung quantitativer Nachweistechniken für Angelikawurzeln und verwandte Gesundheitsprodukte dient. Die Methode basiert auf der Auswahl spezifischer Einzelnukleotid-Polymorphismen (SNPs) im vollständigen Plastidengenom von Angelika und koreanischer Angelika. Spezifische Angelika-Positionen wurden mit unterschiedlich verfälschten Arzneipflanzenpulvern für quantitative methodische Untersuchungen (Linearität, Quantifizierungsgrenze, Nachweisgrenze und Reproduzierbarkeit) ausgewählt. Drei verschiedene Verfälschungsgrade (15%, 25%, 35%) des aktiven schmerzstillenden Pulvers wurden verwendet, um die Genauigkeit der Herb-Q-Methode bei der quantitativen Bestimmung klinischer chinesischer Arzneimittel mit Angelika zu überprüfen. Ergebnisse: Durch den Vergleich von 123 Plastidengenomsequenzen der Gattung Angelika wurden basierend auf innerartlicher Konservierung, artenübergreifender Spezifität und den Anforderungen der Pyrophosphat-Hochdurchsatzsequenzierung die Positionen 9674 (A/G) in NC_042826.1 und 38592 (T/C) in NC_029393.1 als spezifische molekulare Identifikationsstellen für Angelika und koreanische Angelika bestimmt. Die für Angelika spezifische Position 9674 (A/G) wurde für die etablierte Herb-Q-Linienbeziehung verwendet, mit einem R²-Wert von 0,9974 (>0,99), was eine gute Linearität zeigt. Quantifizierungs- und Nachweisgrenze liegen jeweils bei 2,0%, die Reproduzierbarkeit ist gut (relativ Standardabweichung (RSD) <2,0%). Das auf der Herb-Q-Methode basierende quantitative System ermittelte für den Anteil der koreanischen Angelikafälschung im aktiven schmerzstillenden Pulver eine mittlere Abweichung von 1,3% bei drei molekularen Wiederholungen. Fazit: Die Studie zeigt, dass die auf der Position 9674 (A/G) im Plastidengenom NC_042826.1 basierende Herb-Q-Methode eine gute Anwendbarkeit, Objektivität und Genauigkeit bei Angelika, „Tu Dang Gui“ und deren verarbeiteten Produkten aufweist und damit technische Unterstützung für die quantitative Analyse handelsüblicher Produkte aus Angelika wie chinesischer Arzneimittel, diätetischer Nahrungsergänzungsmittel und Gesundheitsprodukte bieten kann.

关键词

Molekulare quantitative Detektionsmethode für Kräuter (Herb-Q); Angelika; Verfälschung; Pyrophosphat-Sequenzierung; quantitative Studie

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