Effect of Herbal Medicines in Wuzi Yanzong Wan Processed with Salt-water on Apoptosis of Spermatogenic Cells in Rats

Yu-jiao LIAO; Xi ZHANG; Ming-yue AO; Chang-jiang HU; Zhi-min CHEN; Run-chun XU

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20210946

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Effect of Herbal Medicines in Wuzi Yanzong Wan Processed with Salt-water on Apoptosis of Spermatogenic Cells in Rats

Classic Prescriptions | 更新时间：2021-04-20

- Effect of Herbal Medicines in Wuzi Yanzong Wan Processed with Salt-water on Apoptosis of Spermatogenic Cells in Rats
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 10, Pages: 1-7(2021)
- 作者机构：
  
  成都中医药大学药学院，成都 611137
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20210946
  CLC： R28;R943.1;Q2;Q657
- Received：31 December 2020，
  
  Published Online：09 February 2021，
  
  Published：20 May 2021
- 稿件说明：
移动端阅览
廖宇娇,张希,敖明月等.五子衍宗丸中所含药物盐制后组方对大鼠生精细胞凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(10):1-7.

LIAO Yu-jiao,ZHANG Xi,AO Ming-yue,et al.Effect of Herbal Medicines in Wuzi Yanzong Wan Processed with Salt-water on Apoptosis of Spermatogenic Cells in Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(10):1-7.
廖宇娇,张希,敖明月等.五子衍宗丸中所含药物盐制后组方对大鼠生精细胞凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(10):1-7. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210946.

LIAO Yu-jiao,ZHANG Xi,AO Ming-yue,et al.Effect of Herbal Medicines in Wuzi Yanzong Wan Processed with Salt-water on Apoptosis of Spermatogenic Cells in Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(10):1-7. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210946.

摘要

目的

观察由不同炮制品组方的五子衍宗丸对肾精亏虚大鼠生精细胞凋亡的影响，探讨其对生精细胞的保护作用。

方法

将SD大鼠随机分成空白组、模型组、全生品组、药典组、盐制组，每组8只。通过给予雷公藤多苷片复制肾精亏虚模型（剂量20 mg·kg

-1

），利用流式细胞术（FCM）分析睾丸中生精细胞凋亡情况，运用免疫组化（IHC）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测睾丸中B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达水平。采用高效液相色谱法（HPLC）比较由不同炮制品组方的五子衍宗丸中8个成分（绿原酸、鞣花酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷、紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲）的含量，流动相乙腈（A）-0.4%磷酸水溶液（B）梯度洗脱（0~5 min，5%~15%A；5~10 min，15%~17%A；10~25 min，17%A；25~35 min，17%~26%A，35~60 min，26%~56%A），检测波长254 nm。

结果

与模型组比较，各给药组对生精细胞总凋亡率，Bcl-2和Bax表达均有改善作用，且药典组与盐制组有显著作用（

0.01）；同时，药典组与盐制组的改善作用明显优于全生品组（

0.05）。药物炮制后组方的五子衍宗丸中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷含量增加；盐制组鞣花酸含量增加，但药典组鞣花酸含量减少；盐制组样品中毛蕊花糖苷、紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲的含量高于药典组样品。

结论

五子衍宗丸可能通过抑制Bax和促进Bcl-2的蛋白表达来减少大鼠睾丸中生精细胞的凋亡，发挥其补肾益精作用；组方药物炮制后抗生精细胞凋亡作用增强可能与炮制后化学成分含量的变化有关。

Abstract

Objective

To observe the effect of Wuzi Yanzong Wan made of different processed products on the apoptosis of spermatogenic cells in rats with kidney essence deficiency， and explore its protective effect on spermatogenic cells.

Method

SD rats were randomly divided into the blank group， model group， whole raw product group， pharmacopoeia group and salt-processed product group， with 8 rats in each group. The kidney essence deficiency model was replicated by giving tripterygium glycoside tablets （the dose of 20 mg·kg

-1

）. The flow cytometry （FCM） was used to analysis the apoptosis of spermatogenic cells in testis， the immunohistochemistry （IHC） and Western blot were used to detect the expression levels of B-cell lymphoma-2 （Bcl-2） and Bcl-2 associated X protein （Bax） in the testis. High performance liquid chromatography （HPLC） was used to compare the contents of eight components （chlorogenic acid， ellagic acid， hyperoside， isoquercitrin， verbascoside， astragalin， kaempferol and schisandrin） in Wuzi Yanzong Wan made of different processed products， the mobile phase was composed of acetonitrile （A）-0.4% phosphoric acid aqueous solution （B） for gradient elution （0-5 min， 5%-15%A； 5-10 min， 15%-17%A； 10-25 min， 17%A； 25-35 min， 17%-26%A； 35-60 min， 26%-56%A）， the detection wavelength was set at 254 nm.

Result

Compared with the model group， the total apoptosis rate of spermatogenic cells， protein expression of Bax and Bcl-2 in each administration group were improved. Among them， the pharmacopoeia group and salt-processed product group had significant effects （

0.01）， and the improvement effect of the pharmacopoeia group and salt-processed product group was significantly better than that of the whole raw product group （

0.05）. The contents of chlorogenic acid， hyperoside， isoquercitrin and verbascoside in Wuzi Yanzong Wan were increased after the herbal medicines being processed with salt-water. The content of ellagic acid in the salt-processed product group increased， while it decreased in the pharmacopoeia group. The contents of verbascoside， astragalin， kaempferol and schisandrin in samples from the salt-processed product group were greater than those in samples from the pharmacopoeia group.

Conclusion

Wuzi Yanzong Wan may reduce the apoptosis of spermatogenic cells in rat testis by inhibiting the expression of Bax and promoting the expression of Bcl-2， and exert its effect of nourishing kidney and enriching essence. The enhanced anti-spermatogenic effect of Wuzi Yanzong Wan after processing may be related to the changes in chemical composition content after processing.

关键词

Keywords

references

张时彻 . 摄生众妙方［M］. 北京：中医古籍出版社， 2004 ： 237 .

张希，廖宇娇，杨卓，等 . 五子衍宗丸补肾涩精有效部位的谱效关系［J］. 中成药， 2020 ， 42 （ 8 ）： 2150 - 2153 .

李浩，俞旭君，阳方，等 . 五子衍宗丸治疗男性不育症64例临床研究［J］. 中国性科学， 2020 ， 29 （ 10 ）： 123 - 126 .

曹圣，热增才旦，李永平，等 . 五子衍宗方及其拆方对大鼠糖尿病性勃起功能障碍、生精细胞凋亡及NO-cGMP通路的影响［J］. 中国高原医学与生物学杂志， 2018 ， 39 （ 2 ）： 112 - 117 .

丁劲，张耀圣，商建伟 . 五子衍宗丸治疗男性不育症的网络药理学探讨［J］. 中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 （ 20 ）： 25 - 35 .

柯明辉 . 基于支持细胞骨架研究补肾填精法治疗男性不育少精子症的效果和机制［D］. 北京：北京中医药大学， 2017 .

何萌萌 . 热激对大鼠睾丸生精细胞的凋亡作用与机制研究［D］. 北京：北京中医药大学， 2015 .

中华人民共和国卫生部药政管理局 . 全国中药炮制规范［M］. 北京：人民卫生出版社， 1988 ： 178 .

国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：一部［M］. 北京：中国医药科技出版社， 2020 ： 611 .

中医研究院中药研究所 . 中药制剂手册［M］. 北京：人民卫生出版社， 1975 ： 77 .

叶定江，原思通 . 中药炮制学辞典［M］. 上海：上海科学技术出版社， 2005 ： 372 .

陈修园 . 时方妙用·时方歌括［M］. 北京：中国中医药出版社， 2016 .

张希，廖宇娇，杨卓，等 . 覆盆子盐制前后化学成分及药效学变化研究［J］. 时珍国医国药， 2020 ， 31 （ 1 ）： 82 - 84 .

张希，杨卓，陈志敏，等 . 五子衍宗丸中药物盐制前后的药效分析［J］. 中成药， 2019 ， 41 （ 11 ）： 2706 - 2710 .

胡麟，吴珊珊，吴文辉，等 . 五子衍宗丸中药物盐制对补肾生精作用的影响［J］. 中医药导报， 2016 ， 22 （ 19 ）： 23 - 25，28 .

国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：四部［M］. 北京：中国医药科技出版社， 2020 ： 31 .

逄世峰，许世泉，孙成贺，等 . 盐炙北五味子最佳炮制工艺研究［J］. 特产研究， 2012 ， 34 （ 4 ）： 49 - 51，57 .

柯明辉，刘保兴，王传航，等 . 五子衍宗丸改善肾精亏虚证大鼠精液质量及机制研究［J］. 中国男科学杂志， 2016 ， 30 （ 9 ）： 30 - 33 .

KHATUN A ， RAHMAN M S ， PANG M G . Clinical assessment of the male fertility ［J］. Obstet Gynecol Sci ， 2018 ， 61 （ 2 ）： 179 - 191 .

刘媛，葛平玉 . 中医药治疗少、弱精子症的现状［J］. 贵阳中医学院学报， 2019 ， 41 （ 6 ）： 79 - 83 .

ZHAO Y S ， ZHANG S B . PGAM1 knockdown is associated with busulfaninduced hypospermatogenesis and spermatogenic cell apoptosis ［J］. Mol Med Rep ， 2019 ， 19 （ 4 ）： 2497 - 2502 .

刘红娟，吴德玲，童小慧，等 . 五子衍宗丸干预线粒体通透性转换孔抑制精子凋亡的机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 21 ）： 34 - 39 .

GIHAN A F ， MENNA A D ， DALIA I I ， et al . Histological study on the protective effect of endogenous stem cell mobilization in busulfan-induced testicular injury in albino rats ［J］. J Microsc Ultrstruct ， 2018 ， 6 （ 4 ）： 197 - 204 .

王卫东，陈正堂 . Bcl-2/Bax比率与细胞“命运 ”［J］. 中国肿瘤生物治疗杂志， 2007 ， 14 （ 4 ）： 393 - 396 .

沈美玲 . 人类生精细胞凋亡的调控因素［J］. 山东医学高等专科学校学报， 2009 ， 31 （ 3 ）： 166 - 168 .

刘立玲，苏晓慧，田雅格，等 . 两个厂家的雷公藤多苷片对CIA模型大鼠干预作用比较［J］. 中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 （ 14 ）： 84 - 92 .

XI C ， PENG S J ， WU Z P ， et al . Toxicity of triptolide and the molecular mechanisms involved ［J］. Biomed Pharmacother ， 2017 ， 90 ： 531 - 541 .

任献青，郑贵珍，苏杭，等 . 菟丝子黄酮对雷公藤多苷片致生精细胞周期阻滞、凋亡及相关蛋白表达降低的影响［J］. 药物评价研究， 2018 ， 41 （ 1 ）： 55 - 60 .

董秋菊，周园，冯薇，等 . 指纹图谱结合一测多评法在五子衍宗丸质量评价中的应用［J］. 中药材， 2019 ， 42 （ 3 ）： 579 - 583 .

HANY H A ， AMANY M G ， EBTEHAL M F ， et al . Ellagic acid attenuates testicular disruption in rheumatoid arthritis via targeting inflammatory signals，oxidative perturbations and apoptosis ［J］. Life Sci ， 2019 ， 239 ： 117012 .

Views

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

Effect of Different Fermentation Conditions on Fungal Community and Chemical Composition of Aurantii Fructus

Gypenoside L Regulates piR-hsa-2804461/FKBP8/Bcl-2 Axis to Promote Apoptosis and Inhibit Ovarian Cancer

Processing History and Modern Research of Jianghuanglian： A Review

Herbal Textual Research and Modern Research Progress of Ostreae Concha

Analysis of Chemical Composition in Puerariae Thomsonii Stem Base and Investigation of Its Effect on Liver Metabolites in Mice Based on UPLC-Q-TOF-MS/MS

Related Author

YAN Zhihong

LIU Xiumei

GUAN Qiuyan

SONG Yonggui

AI Zhifu

ZHU Genhua

PING Yuhui

YANG Ming

Related Institution

Key Laboratory of Depression Animal Model Based on Traditional Chinese Medicine（TCM）Syndrome of Jiangxi Province Administration of TCM，Key Research Office for Evaluation of TCM Efficacy（Prevention and Treatment of Mental Disorders and Brain Diseases） of Jiangxi Province Administration of TCM， Jiangxi University of Chinese Medicine

Jiangxi Guxiang Jinyun Comprehensive Health Industry Co. Ltd.

Liaoning University of Traditional Chinese Medicine（TCM）

Liaoning Provincial Hospital of TCM

Institute of Chinese Materia Medica，China Academy of Chinese Medical Sciences

AI问答

Postal code：100700
Tel：010-84076882 Email：syfjx_2010@188.com
Technical support is provided by Beijing Founder electronics co., LTD 京ICP备11006657号-10 京公网安备11010802024621
It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.

⁰