Gelian Tiaotang Pills Ameliorate Renal Fibrosis in db/db Mice via NLRP3/Caspase-1/GSDMD Pathway

FAN Lihui; WANG Zhigang; YANG Xia; MEI Xiaolong; ZHANG Kun

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20241319

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Gelian Tiaotang Pills Ameliorate Renal Fibrosis in db/db Mice via NLRP3/Caspase-1/GSDMD Pathway

更新时间：2025-03-04

- Gelian Tiaotang Pills Ameliorate Renal Fibrosis in db/db Mice via NLRP3/Caspase-1/GSDMD Pathway
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 31, Issue 6, Pages: 136-145(2025)
- 作者机构：
  
  1.甘肃中医药大学中医临床学院，兰州 730000
  2.天水市中医医院，甘肃天水 741000
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20241319
  CLC： R285;R289;R587.1
- Received：08 July 2024，
  
  Accepted：07 November 2024，
  
  Published Online：05 September 2024，
  
  Published：20 March 2025
- 稿件说明：
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樊俐慧,王志刚,杨霞等.基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨葛连调糖丸对2型糖尿病db/db小鼠肾脏纤维化的干预作用[J].中国实验方剂学杂志,2025,31(06):136-145.

FAN Lihui,WANG Zhigang,YANG Xia,et al.Gelian Tiaotang Pills Ameliorate Renal Fibrosis in db/db Mice via NLRP3/Caspase-1/GSDMD Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2025,31(06):136-145.
樊俐慧,王志刚,杨霞等.基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨葛连调糖丸对2型糖尿病db/db小鼠肾脏纤维化的干预作用[J].中国实验方剂学杂志,2025,31(06):136-145. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20241319.

FAN Lihui,WANG Zhigang,YANG Xia,et al.Gelian Tiaotang Pills Ameliorate Renal Fibrosis in db/db Mice via NLRP3/Caspase-1/GSDMD Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2025,31(06):136-145. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20241319.

摘要

目的

基于NOD样受体蛋白3（NLRP3）/胱天蛋白酶-1（Caspase-1）/消皮素D（GSDMD）信号通路探讨葛连调糖丸对2型糖尿病db/db小鼠肾脏纤维化的干预作用。

方法

将成模的40只db/db小鼠随机分为模型组、达格列净组和葛连调糖丸高、中、低剂量组，每组8只。另取8只db/m小鼠作为正常组。正常组和模型组给予等体积纯水，中药高、中、低剂量组分别给予葛连调糖丸混悬液灌胃（3.12、1.56、0.78 g·kg·d

-1

），达格列净组给予0.001 3 g·kg·d

-1

达格列净混悬液，各组小鼠每日灌胃1次，连续给药12周。每日观察小鼠一般情况；每4周检测小鼠空腹血糖及体质量，取材后称肾重，计算肾脏指数；全自动生化仪检测血清中甘油三酯（TG）、

血清总胆固醇（TC）、血肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）的表达情况；采用苏木素-伊红（HE）、过碘酸雪夫（PAS）和马松（Masson）染色法观察肾组织病理形态、细胞外基质沉积情况及纤维化程度；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肾组织白细胞介素（IL）-1

、IL-18的含量；免疫组化法（IHC）检测肾组织纤维连接蛋白（Fibronectin）、骨胶原Ⅰ（CollagenⅠ）的蛋白定位表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾组织NLRP3、Caspase-1、剪切的（cleaved）Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N的蛋白表达情况。

结果

与正常组比较，模型组小鼠一般状态较差，体质量、肾重、肾脏指数、空腹血糖（FBG）、TG、TC、SCr、BUN表达水平显著升高（

0.01）；肾小球固缩，基质增多，肾小管上皮细胞空泡样变性，间质伴有炎性细胞浸润（

0.01）；肾组织IL-1

、IL-18水平均显著升高（

0.01）；肾组织NLRP3、Caspase-1、cleaved Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、Fibronectin、Collagen Ⅰ蛋白表达水平均显著升高（

0.01）。经药物干预12周后，与模型组比较，各药物组体质量、肾重、肾脏指数、FBG、TG、TC、SCr、BUN表达水平及肾组织IL-1

、IL-18水平均明显降低（

0.05，

0.01），肾组织病变程度得到改善，且肾组织NLRP3、Caspase-1、cleaved Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、Fibronectin、Collagen Ⅰ蛋白表达水平均明显降低（

0.05，

0.01），以葛连调糖丸高剂量组效果最佳。

结论

葛连调糖丸可能通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路，抑制细胞焦亡，减轻炎症反应，进而延缓糖尿病肾脏纤维化的疾病进程。

Abstract

Objective

To investigate the effect of Gelian Tiaotang pills on renal fibrosis in db/db mice based on the nucleotide-binding domain leucine-rich repeat and pyrin domain-containing receptor 3 （NLRP3）/cysteinyl aspartate-specific proteinase （Caspase）-1/gasdermin D （GSDMD） signaling pathway.

Methods

Forty db/db mice were randomly assigned into model， positive control （0.001 3 g·kg·d

-1

dapagliflozin suspension）， and high-， medium-， and low-dose Gelian Tiaotang pills （3.12， 1.56， and 0.78 g·kg·d

-1

suspension of Gelian Tiaotang pills， respectively） groups， with 8 mice in each group. Eight db/m mice were selected as the normal group. The normal group and model group were given equal volumes of pure water， while the drug interventions groups were administrated with corresponding agents by gavage once

a day for 12 consecutive weeks. The general conditions of mice were observed daily. The fasting blood glucose （FBG） and body mass were measured every 4 weeks. Kidneys were weighed after sampling， and the kidney index was calculated. An automatic biochemical analyzer was used to measure the serum levels of triglyceride （TG）， total cholesterol （TC）， serum creatinine （SCr）， and blood urea nitrogen （BUN）. The pathological changes， extracellular matrix deposition， and renal fibrosis degree were examined by hematoxylin-eosin， periodic acid-schiff （PAS）， and Masson staining， respectively. Enzyme-linked immunosorbent assay was employed to measure the levels of interleukin （IL）-1

and IL-18 in the renal tissue. Immunohistochemistry （IHC） was used to detect the localization and expression of fibronectin and collagen Ⅰ in the renal tissue. Western blot was employed to determine the protein levels of NLRP3， Caspase-1， cleaved Caspase-1， GSDMD， and GSDMD-N in the renal tissue.

Results

Compared with the normal group， the model group generally had poor general states and increases in the body mass， kidney weight， kidney index， and levels of FBG， TG， TC， SCr， and BUN （

0.01）. In addition， glomerular pyknosis， increased matrix， vacuolar degeneration of renal tubular epithelial cells， and interstitial infiltration of inflammatory cells were observed in the model group （

0.01）， together with rises in the levels of IL-1

and IL-18 in the renal tissue （

0.01） and up-regulated protein levels of NLRP3， Caspase-1， cleaved Caspase-1， GSDMD， GSDMD-N， fibronectin， and collagen Ⅰ in the renal tissue （

0.01）. Compared with the model group， 12 weeks of drug interventions reduced the body mass， kidney weight， and kidney index and lowered the levels of FBG， TG， TC， SCr， and BUN in the serum and IL-1

and IL-18 in the renal tissue （

0.05，

0.01）. Furthermore， drug interventions ameliorated the renal lesions and down-regulated the protein levels of NLRP3， Caspase-1， cleaved Caspase-1， GSDMD， GSDMD-N， fibronectin， and collagen Ⅰ in the renal tissue （

0.05，

0.01）. The high-dose group of Gelian Tiaotang pills had the best effects.

Conclusion

Gelian Tiaotang pills may inhibit pyroptosis and reduce inflammatory responses by regulating the NLRP3/Caspase-1/GSDMD signaling pathway， thus delaying the process of renal fibrosis in diabetes.

关键词

Keywords

references

THOMAS M C ， BROWNLEl M ， SUSZTAK K ， et al . Diabetic kidney disease ［J］. Nat Rev Dis Primers ， 2015 ， 1 （ 1 ）： 1 - 20 .

LI X ， WANG L ， LIU M ， et al . Association between neutrophil-to-lymphocyte ratio and diabetic kidney disease in type 2 diabetes mellitus patients：A cross-sectional study ［J］. Front Endocrinol （Lausanne）， 2024 ， 14 ： 1285509 .

BARRRERA CHIMAL J ， JAISSER F . Pathophysiologic mechanisms in diadetic kidney disease：A focus on current and future the rapeutic targets ［J］. Diabetes Obesity and Metabolism ， 2020 ， 22 ： 16 - 31 .

杨婕，王志刚，杨霞，等 . 葛连降糖丸治疗湿热内蕴型2型糖尿病临床观察［J］. 光明中医， 2023 ， 38 （ 11 ）： 2058 - 2062 .

YANG J ， WANG Z G ， YANG X ， et al . Clinical observation on Gelian Tiangtang pill in treating type 2 diabetes with damp heat intrinsic type ［J］. Guangming J Chin Med ， 2023 ， 38 （ 11 ）： 2058 - 2062 .

樊俐慧，王志刚，杨霞 . 基于网络药理学与细胞实验探讨葛连调糖丸对2型糖尿病的预防作用［J］. 中成药， 2024 ， doi： 31.1368.R.20240425.1609.004 http://dx.doi.org/31.1368.R.20240425.1609.004 .

FAN L H ， WANG Z G ， YANG X . Based on network pharmacology and cell experiment， the preventive effect of Gelian Tiaotang pill on type 2 diabetes was studied ［J］. Chin Tradit Patent Mede ， 2024 ， doi： 31.1368.R.20240425.1609.004 http://dx.doi.org/31.1368.R.20240425.1609.004 .

宋纯东，宋丹，贾评评，等 . 雷公藤多苷通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路对糖尿病肾病大鼠肾损伤的影响［J］. 中国中药杂志， 2023 ， 48 （ 10 ）： 2639 - 2645 .

SONG C D ， SONG D ， JIA P P ， et al . Effect of multi-glycosides of Tripterygium wilfordii on renal injury in diabetic kidney disease rats through NLRP3/Caspase-1/GSDMD pyroptosis pathway ［J］. China J Chin Mater Med ， 2023 ， 48 （ 10 ）： 2639 - 2645 .

WONG S K ， CHIN K Y ， SUHAIMI F H ， et al . Animal models of metabolic syndrome：A review ［J］. Nutr Metab （Lond）， 2016 ， 13 ： 65 .

ZHUANG L G ， JIN G X ， QIONG W ， et al . Circular RNACOL1A2 mediates high glucose-induced oxidative stress and pyroptosis by regulating mi R-424-5p/SGK1 in diabetic nephropathy ［J］. Appl Biochem Biotechnol ， 2023 ， 23 （ 10 ）： 45 - 61 .

GUO S ， SUN J ， ZHUANG Y . Quercetin alleviates lipopolysaccharide-induced inflammatory responses by up-regulation miR-124 in human renal tubular epithelial cell line HK-2 ［J］. Biofactors ， 2020 ， 46 （ 3 ）： 402 - 410 .

ZHANG Q ， YANG M ， XIAO Y ， et al . Towards better drug repositioning：Targeted immunoinflammatory therapy for diabetic nephropathy ［J］. Curr Med Chem ， 2021 ， 28 （ 5 ）： 1003 - 1024 .

CHEN J X ， FANG Q J ， WAN Y G ， et al . Effects and mechanisms of total flavones of Abelmoschus manihot in inhibiting podocyte necroptosis and renal fibrosis in diabetic kidney disease ［J］. Chin J Chin Mater Med ， 2023 ， 48 （ 15 ）： 4137 - 4146 .

FU Y ， WANG Y ， LIU Y ， et al . p53/sirtuin 1/NF- κ B signaling axis in chronic inflammation and maladaptive kidney repair after cisplatin nephrotoxicity ［J］. Front Immunol ， 2022 ， 13 ： 925738 .

CHEN X ， DAI W ， LI H ， et al . Targeted drug delivery strategy：A bridge to the therapy of diabetic kidney disease ［J］. Drug Deliv ， 2023 ， 30 （ 1 ）： 2160518 .

PUGLISI S ， ROSSINI A ， POLI R ， et al . Effects of SGLT2 inhibitors and GLP-1 receptor agonists on renin-angiotensin-aldosterone system ［J］. Front Endocrinol （Lausanne）， 2021 ， 12 ： 738848 .

邹易彤，杨宇峰 . 糖尿病肾病中医病因病机学说基础探讨［J］. 辽宁中医药大学学报， 2023 ， 25 （ 4 ）： 185 - 189 .

ZOU Y T ， YANG Y F . Discussion on the basis of TCM etiology and pathogenesis theory of diabetic nephropathy ［J］. J Liaoning Univ Tradit Chin Med ， 2023 ， 25 （ 4 ）： 185 - 189 .

KOVACS S B ， MIAO E A . Gasdermins：Effectors of pyroptosis ［J］. Trends Cell Biol ， 2017 ， 27 （ 9 ）： 673 - 684 .

CADENA C ， KORNFELD O S ， LEE B L ， et al . Epigenetic and transcriptional control of gasdermins ［J］. Semin Immunol ， 2023 ， 70 ： 101841 .

SLAUFOVA M ， KARAKAYA T ， DI FILIPPO M ， et al . The gasdermins：A pore-forming protein family expressed in the epidermis ［J］. Front Immunol ， 2023 ， 14 ： 1254150 .

WEI S ， FENG M ， ZHANG S . Molecular characteristics of cell pyroptosis and its inhibitors：A review of activation，regulation，and inhibitors ［J］. Int J Mol Sci ， 2022 ， 23 （ 24 ）： 16115 .

MATIKAINEN S ， NYMAN T A ， CYPRYK W . Function and regulation of noncanonical Caspase-4/5/11 inflammasome ［J］. Immunol ， 2020 ， 204 （ 12 ）： 3063 - 3069 .

MOOSSAVI M ， PARSAMANESH N ， BAHRAMI A ， et al . Role of the NLRP3 inflammasome in cancer ［J］. Mol Cancer ， 2018 ， 17 （ 1 ）： 158 .

ELIAS E E ， LYONS B ， MURUVE D A . Gasdermins and pyroptosis in the kidney ［J］. Nat Rev Nephrol ， 2023 ， 19 （ 5 ）： 337 - 350 .

丁宝珠，丁英钧，马国平，等 . 肾消解毒通络方调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制糖尿病肾病金黄地鼠肾脏细胞焦亡的机制［J］. 中华中医药杂志， 2022 ， 37 （ 7 ）： 4086 - 4090 .

DING B Z ， DING Y J ， MA G P ， et al . Mechanism of Shenxiao Jiedu Tongluo recipe regulatingNLRP3-Caspase-1-GSDMD pathway to inhibit diabetic kidney disease golden hamster kidney cells pyroptosis ［J］. China J Tradit Chin Med Pharm ， 2022 ， 37 （ 7 ）： 4086 - 4090 .

贾评评，宋纯东，段凤阳，等 . 益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2023 ， 29 （ 1 ）： 75 - 81 .

JIA P P ， SONG C D ， DUAN F Y ， et al . Effect of Yiqi Yangyin Huoxue prescription on NLRP3/Caspase-1/GSDMD pyroptosis pathway in diabetic kidney disease rats ［J］. Chin J Exp Tradit Med Form ， 2023 ， 29 （ 1 ）： 75 - 81 .

TENG J F ， MEI Q B ， ZHOU X G ， et al . Polyphyllinⅵinduces Caspase-1-mediated pyroptosis via the induction of ROS/NF- κ B/NLRP3/GSDMD signal axis in non-small cell lung cancer ［J］. Cancers ， 2020 ， 12 （ 1 ）： 193 - 210 .

WANG D ， QIU Y ， FAN J ， et al . Upregulation of C/EBP homologous protein induced by er stress mediates epithelial to myofibroblast transformation in ADTKD-UMOD ［J］. Int J Med Sci ， 2022 ， 19 （ 2 ）： 364 - 376 .

FORBES M S ， THORNHILL B A ， GALARRETA C I ， et al . Chronic unilateral ureteral obstruction in the neonatal mouse delays maturation of both kidneys and leads to late formation of atubular glomeruli ［J］. Am J Physiol Renal Physiol ， 2013 ， 305 （ 12 ）： F1736 - 17F46 .

JUIN S K ， PUSHPAKUMAR S ， TYAGI S C ， et al . Glucosidase inhibitor， Nimbidiol ameliorates renal fibrosis and dysfunction in type-1 diabetes ［J］. Sci Rep ， 2022 ， 12 （ 1 ）： 21707 .

CHEN W ， ZHAO S ， XING J ， et al . BMAL1 inhibits renal fibrosis and renal interstitial inflammation by targeting the ERK1/2/ELK-1/Egr-1 axis ［J］. Int Immunopharmaco ， 2023 ， 125 ： 111140 .

郭晓媛，张程斐，吴悠，等 . 滋肾丸对糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞焦亡及上皮-间充质转化的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021 ， 27 （ 21 ）： 27 - 36 .

GUO X Y ， ZHANG C F ， WU Y ， et al . Effect of Zishenwan on pyroptosis and epithelial-mesenchymal transition of renal tubular epithelial cells in diabetic nephropathy mice ［J］. Chin J Exp Tradit Med Form ， 2021 ， 27 （ 21 ）： 27 - 36 .

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