基于LC/Q-TOF-MS整合网络药理学探讨潜阳育阴颗粒防治高血压肾损害的药效物质基础与作用机制

吴信华; 李长印; 曹园; 瞿慧; 韩洋; 方祝元

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20202047

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

基于LC/Q-TOF-MS整合网络药理学探讨潜阳育阴颗粒防治高血压肾损害的药效物质基础与作用机制

药学基础 | 更新时间：2021-12-03

- 基于LC/Q-TOF-MS整合网络药理学探讨潜阳育阴颗粒防治高血压肾损害的药效物质基础与作用机制
- Investigation of Pharmacodynamic Material Basis and Mechanism of Qianyang Yuyin Granules Against Hypertensive Renal Damage Based on LC/Q-TOF-MS and Network Pharmacology
- 中国实验方剂学杂志 2021年27卷第2期页码：116-129
- 作者机构：
  
  南京中医药大学附属医院，南京 210029
- 作者简介：
  
  吴信华，硕士，从事中药化学与分析研究，E-mail：15951835852@163.com
  曹园，博士，研究员，硕士生导师，从事中药药效物质基础与质量标准研究，E-mail：caoy2002@126.com
  方祝元，博士，主任医师，博士生导师，从事中医内科心血管研究，Tel：025-86618472，E-mail：yfy0012@njucm.edu.cn
- 基金信息：
  
  江苏省中医药局科技项目(JD201813);南京中医药大学优势学科项目(ZYX03KF074)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20202047
  中图分类号： R22;R96;R28;O657.6
- 纸质出版日期：2021-01-20，
  
  网络出版日期：2020-07-20，
  
  收稿日期：2020-04-21，
- 稿件说明：
扫描看全文
吴信华,李长印,曹园等.基于LC/Q-TOF-MS整合网络药理学探讨潜阳育阴颗粒防治高血压肾损害的药效物质基础与作用机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(02):116-129.

WU Xin-hua,LI Chang-yin,CAO Yuan,et al.Investigation of Pharmacodynamic Material Basis and Mechanism of Qianyang Yuyin Granules Against Hypertensive Renal Damage Based on LC/Q-TOF-MS and Network Pharmacology[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(02):116-129.
吴信华,李长印,曹园等.基于LC/Q-TOF-MS整合网络药理学探讨潜阳育阴颗粒防治高血压肾损害的药效物质基础与作用机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(02):116-129. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202047.

WU Xin-hua,LI Chang-yin,CAO Yuan,et al.Investigation of Pharmacodynamic Material Basis and Mechanism of Qianyang Yuyin Granules Against Hypertensive Renal Damage Based on LC/Q-TOF-MS and Network Pharmacology[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(02):116-129. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202047.

摘要

目的

系统研究潜阳育阴颗粒的化学成分，探讨其发挥药效的主要活性成分和作用机制。

方法

采用液相色谱/四级杆-飞行时间质谱法（LC/Q-TOF-MS）对潜阳育阴颗粒中的化学成分进行全面分析，检测条件为Agilent Poroshell 120 SB-C

色谱柱（3.0 mm×100 mm，2.7 μm），流速0.4 mL·min

-1

，电喷雾离子源（ESI），正、负离子模式扫描，扫描范围

25~1 000；正离子模式的流动相A为水+10 mmol·L

-1

甲酸铵+0.125%甲酸+0.1%甲醇，B为乙腈-水（9∶1）+10 mmol·L

-1

甲酸铵+0.125%甲酸；负离子模式的流动相A为水+10 mmol·L

-1

甲酸铵+0.1%甲醇，B为乙腈-水（9∶1）+10 mmol·L

-1

甲酸铵；梯度洗脱程序均设定为0~3.5 min，5%B；3.5~4 min，5%~10%B；4~9 min，10%~25%B；9~18 min，25%~30%B；18~25 min，30%~50%B；25~27 min，50%~90%B；27~32 min，90%B；32~33 min，90%~5%B；33~39 min，5%B。根据化合物的一级、二级质谱信息，与对照品或文献数据比对，快速识别化学成分。结合网络药理学方法对潜阳育阴颗粒的化学成分进行靶标分析、功能富集，初步筛选出主要药效物质，并探讨其作用机制。

结果

从潜阳育阴颗粒中共识别出99个化学成分，从中筛选出43个与高血压肾损害相关的活性成分及48个核心靶点。核心成分包括山柰酚，槲皮素，阿魏酸，木樨草素，咖啡酸甲酯，肉桂酸，芦荟大黄素，大黄素，

-反式-阿魏酰酪胺，没食子酸，异红草素，8-

-阿魏酰基哈巴苷，咖啡酸乙酯，异奥卡宁，杯苋甾酮，二苯乙烯苷，马钱苷，23-乙酰泽泻醇B和哈巴苷；核心靶点包括血管内皮生长因子A（VEGFA），丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1），Jun原癌基因（JUN），G蛋白

（GNB1），肿瘤蛋白p53（TP53），

-淀粉样前体蛋白（APP），丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）等。

结论

潜阳育阴颗粒主要从调控血管内皮、血管生成、炎症反应、氧化应激及免疫应答等方面发挥清肝补肾、化瘀通络的功效。

Abstract

Objective

To systematically study the chemical components of Qianyang Yuyin granules and explore its main pharmacodynamic substances and mechanism in the prevention and treatment of hypertensive renal damage.

Method

Liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry （LC/Q-TOF-MS） was employed to comprehensively analyze the chemical components of Qianyang Yuyin granules. Agilent Poroshell 120 SB-C

column （3.0 mm×100 mm， 2.7 μm） was used， flow rate was 0.4 mL·min

-1

， electrospray ionization （ESI） was applied and operated in positive and negative ion modes， the acquisition range was

25-1 000. Mobile phase in positive ion mode consisted of water+10 mmol·L

-1

ammonium formate+0.125% formic acid+0.1% methanol （A）-［acetonitrile-water （9∶1）+10 mmol·L

-1

ammonium formate+0.125% formic acid］（B）， and in negative ion mode consisted of water+10 mmol·L

-1

ammonium formate+0.1% methanol （A）-［acetonitrile-water （9∶1）+10 mmol·L

-1

ammonium formate］（B） with the gradient elution （0-3.5 min， 5%B； 3.5-4 min， 5%-10%B； 4-9 min， 10%-25%B； 9-18 min， 25%-30%B； 18-25 min， 30%-50%B； 25-27 min， 50%-90%B； 27-32 min， 90%B； 32-33 min， 90%-5%B； 33-39 min， 5%B）. According to the information of the accurate mass， the multistage fragment ions， the mass spectrometric data of the standard substances and the relative reference literature， the structures of the chemical components in Qianyang Yuyin granules were identified. Based on the identified components， network pharmacology study， including target prediction and functional enrichment was applied to screen out the main active substances against hypertensive renal damage， and explore the potential mechanism.

Result

A total of 99 chemical components were identified， from which 43 active substances and 48 key targets were screened out. The key components contained kaempferol， quercetin， ferulic acid， luteolin， caffeic acid methyl ester， cinnamic acid， aloe-emodin， emodin， gallic acid，

trans

-feruloyltyramine， isoorientin， 8-

-feruloylharpagide， ethyl caffeate， isookanin， cyasterone， 2，3，5，4'-tetrahydroxystilbene-2-

-glucopyranoside， loganin， alisol B-23-acetate and harpagide. The key targets included vascular endothelial growth factor A （VEGFA）， serine/threonine protein kinase 1 （AKT1）， Jun proto-oncogene （JUN）， etc.

Conclusion

Qianyang Yuyin granules mainly exert the effects of removing heat from the liver， tonifying the kidney and removing blood stasis via modulation of vascular endothelium， angiogenesis， inflammatory reaction， oxidative stress， immune response and so on.

关键词

潜阳育阴颗粒高血压肾损害网络药理学液相色谱/四级杆-飞行时间质谱法（LC/Q-TOF-MS）药效物质作用机制数据库

Keywords

Qianyang Yuyin granuleshypertensive renal damagenetwork pharmacologyliquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry （LC/Q-TOF-MS）pharmacodynamic substancesmechanismdatabase

references

《中国高血压防治指南》修订委员会，高血压联盟（中国，中华医学会心血管病学分会，等.中国高血压防治指南（2018年修订版）［J］.中国心血管杂志，2019，24（1）：24-56.

王碧晴，赵俊男，张颖，等.鬼针草的药理作用研究进展［J］.中医药导报，2019，25（18）：100-103，107.

COLLINS A J，FOLEY R N，CHAVERS B，et al.United States Renal Data System 2011 Annual Data Report：Atlas of chronic kidney disease & end-stage renal disease in the United States［J］.Am J Kidney Dis，2012，doi：10.1053/j.ajkd.2011.11.015http://dx.doi.org/10.1053/j.ajkd.2011.11.015.

浙江省食品药品监督管理局.浙江省中药炮制规范［M］.北京：中国医药科技出版社，2015：223.

邹冲，蒋卫民，方祝元.潜阳育阴基本方加减治疗阴虚阳亢型高血压病的经验体会［J］.光明中医，2017，32（1）：20-23.

陈怡，何安霞.基于二维斑点追踪成像技术定量评价潜阳育阴颗粒改善高血压左室功能早期损害的临床研究［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2018，16（19）：2761-2766.

陶炜伟，陆美娟，陈超，等.潜阳育阴颗粒改善高血压病亚临床心肌损害的价值探讨［J］.临床超声医学杂志，2019，21（11）：862-864.

刘健，李碧霞，杜金玲，等.潜阳育阴颗粒治疗阴虚阳亢型高血压早期肾损害患者的临床研究［J］.南京中医药大学学报，2019，35（3）：262-265.

黄亚威，钱芳，周慧娟，等.潜阳育阴颗粒定性定量研究［J］.亚太传统医药，2016，12（7）：24-26.

KIBBLE M，SAARINEN N，TANG J，et al.Network pharmacology applications to map the unexplored target space and therapeutic potential of natural products［J］.Nat Prod Rep，2015，32（8）：1249-1266.

GFELLER D，MICHIELIN O，ZOETE V.Shaping the interaction landscape of bioactive molecules［J］.Bioinformatics，2013，29（23）：3073-3079.

DAMIAN S，ANDREA F，STEFAN W，et al.STRING v10：protein-protein interaction networks，integrated over the tree of life［J］.Nucleic Acids Res，2014，doi：10.1093/nar/gku1003http://dx.doi.org/10.1093/nar/gku1003.

KEISER M J，ROTH B L，ARMBRUSTER B N，et al.Relating protein pharmacology by ligand chemistry［J］.Nat Biotechnol，2007，25（2）：197-206.

ZHOU Y Y，ZHOU B，PACHE L，et al.Metascape provides a biologist-oriented resource for the analysis of systems-level datasets［J］.Nat Commun，2019，10（1）：1523.

AMBERGER J S，BOCCHINI C A，SCHIETTECATTE F，et al.OMIM.org：Online Mendelian Inheritance in Man （OMIM®），an online catalog of human genes and genetic disorders［J］.Nucleic Acids Res，2015，doi：10.1093/nar/gku1205http://dx.doi.org/10.1093/nar/gku1205.

STELZER G，ROSEN N，PLASCHKES I，et al.The GeneCards suite：from gene data mining to disease genome sequence analyses［J］.Curr Protoc Bioinformatics，2016，doi：10.1002/cpbi.5http://dx.doi.org/10.1002/cpbi.5.

DAVIS A P，WIEGERS T C，WIEGERS J，et al.Chemical-induced phenotypes at CTD help inform the predisease state and construct adverse outcome pathways［J］.Toxicol Sci，2018，165（1）：145-156.

SZKLARCZYK D，GABLE A L，LYON D，et al.STRING v11：protein-protein association networks with increased coverage，supporting functional discovery in genome-wide experimental datasets［J］.Nucleic Acids Res，2018，47（D1）：D607-D613.

PIÑERO J，RAMÍREZ-ANGUITA J M，SAÜCH-PITARCH J，et al.The DisGeNET knowledge platform for disease genomics：2019 update［J］.Nucleic Acids Res，2020，48（D1）：D845-D855.

BURLEY S K，BERMAN H M，BHIKADIYA C，et al.RCSB Protein Data Bank：biological macromolecular structures enabling research and education in fundamental biology，biomedicine，biotechnology and energy［J］.Nucleic Acids Res，2019，47（D1）：D464-D474.

刘福和，陈少军，倪文娟.川芎中抗血栓活性成分的计算机虚拟筛选研究［J］.中国药房，2017，28（16）：2182-2186.

黄亚威，钱芳，周慧娟，等.潜阳育阴颗粒定性定量研究［J］.亚太传统医药，2016，12（7）：24-26.

LIANG X R，XU Q.Separation and identification of phenolic compounds in Bidens pilosa L. by ultra high performance liquid chromatography with quadrupole time-of-flight mass spectrometry［J］.J Sep Sci，2016，39（10）：1853-1862.

CHEN Y，LUO J，ZHANG Q，et al.Identification of active substances for dually modulating the renin-angiotensin system in Bidens pilosa by liquid chromatography-mass spectrometry-based chemometrics［J］.J Funct Foods，2016，21（1）：201-211.

CHEN Y H，QI J，HUA J，et al.Structural characterization and identification of major constituents in Radix Scrophulariae by HPLC coupled with electrospray ionization quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry［J］.Chin J Nat Med，2014，12（1）：47-54.

徐多多，庞欢欢，江美芳，等.玄参提取物化学成分及其大鼠血浆移行成分的LC-LTQ-Orbitrap分析［J］.中国中药杂志，2016，41（3）：521-527.

CAO G，ZHANG C R，ZHANG Y，et al.Screening and identification of potential active components in crude Fructus Corni using solid-phase extraction and LC-LTQ-linear ion trap mass spectrometry［J］.Pharm Biol，2012，50（3）：278-283.

邓岳，刘阿娜，王小明，等.HPLC-TOF-MS分析泽泻提取物中三萜类化合物［J］.化学分析计量，2015，24（6）：11-14.

KIM K，KIM S，MOH S H.et al.Kaempferol inhibits vascular smooth muscle cell migration by modulating BMP-mediated miR-21 expression［J］.Mol Cell Biochem，2015，407（1）：143-149.

SU J，XU H T，YU J J，et al.Luteolin ameliorates hypertensive vascular remodeling through inhibiting the proliferation and migration of vascular smooth muscle cells［J］.Evid Based Complement Alternat Med，2015，doi：10.1155/2015/364876http://dx.doi.org/10.1155/2015/364876.

侯国军，秦小江，侯晓敏，等.槲皮素对肾性高血压大鼠的降压作用及机制研究［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2016，14（2）：137-139.

ALAM M A，SERNIA C，BROWN L.Ferulic acid improves cardiovascular and kidney structure and function in hypertensive rats［J］.J Cardiovasc Pharmacol，2013，61（3）：240-249.

KIM K O，LEE D，HIEP N T，et al.Protective effect of phenolic compounds isolated from mugwort （Artemisia argyi） against contrast-induced apoptosis in kidney epithelium cell line LLC-PK1［J］.Molecules，2019，24（1）：195.

SOVA M.Antioxidant and antimicrobial activities of cinnamic acid derivatives［J］.Mini Rev Med Chem，2012，12（8）：749-767.

DOU F，LIU Y T，LIU L M，et al.Aloe-emodin ameliorates renal fibrosis via inhibiting PI3K/Akt/mTOR signaling pathway in vivo and in vitro［J］.Rejuvenation Res，2019，22（3）：218-229.

LI Y，XIONG W J，YANG J，et al.Attenuation of inflammation by emodin in lipopolysaccharide-induced acute kidney injury via inhibition of Toll-like receptor 2 signal pathway［J］.Iran J Kidney Dis，2015，9（3）：202-208.

KANG N，LEE J H，LEE W W，et al.Gallic acid isolated from Spirogyra sp. improves cardiovascular disease through a vasorelaxant and antihypertensive effect［J］.Environ Toxicol Pharmacol，2015，39（2）：764-772.

JIANG Y Y，YU L L，WANG M H.N-trans-feruloyltyramine inhibits LPS-induced NO and PGE2 production in RAW264.7 macrophages：involvement of AP-1 and MAP kinase signalling pathways［J］.Chem Biol Interact，2015，235：56-62.

LAN W，ZHANG H P，GAO X D.Bioactivity-guided fractionation of Cymbopogon caesius （Ness） stapf. revealed isoorientin as an antihypertensive agent［J］.Phcog Mag，2020，16（67）：61-67.

ZHANG W，XU X L，WANG Y Q，et al.Effects of 2，3，4'，5-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside on vascular endothelial dysfunction in atherogenic-diet rats［J］.Planta Med，2009，75（11）：1209-1214.

吕兴，许惠琴，吕高虹，等.AGEs/RAGE/SphK1信号通路介导马钱苷抗AGEs损伤GMCs的机制研究［J］.南京中医药大学学报，2017，33（4）：382-385.

丁康.潜阳育阴颗粒调控氧化应激及炎症信号通路治疗高血压肾损害机制研究［D］.南京：南京中医药大学，2015.

方媛.基于TGF-β1信号通路调控心、肾纤维化及潜阳育阴颗粒的干预作用［D］.南京：南京中医药大学，2019.

冯昱斌.基于AngⅡ/MAPK通路探讨潜阳育阴颗粒改善高血压肾损害的实验研究［D］.南京：南京中医药大学，2015.

SHEN C，KAELIN JR W G.The VHL/HIF axis in clear cell renal carcinoma［J］.Semin Cancer Biol，2013，23（1）：18-25.

钟利平，麻志恒，余柯娜，等.抗纤灵方通过PI3K/AKT/mTOR信号通路干预肾纤维化机制研究［J］.中国实验方剂学杂志，2015，21（18）：126-129.

OLE-PETTER R H，CHOUEIRI T K，TURCHIN A，et al.Clinical risk factors for the development of hypertension in patients treated with inhibitors of the VEGF signaling pathway［J］.Cancer，2014，121（2）：311-319.

方媛，丁康，方祝元.高血压肾损害相关上皮-间充质转化机制研究进展［J］.中华高血压杂志，2018，26（4）：312-316.

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

基于斑马鱼模型与网络药理学研究苦参碱治疗炎症性肠病的作用机制

基于网络药理学和实验验证探讨陈皮藿香汤治疗腹泻的作用机制

基于网络药理学和实验验证探讨香连化浊方对慢性萎缩性胃炎的作用机制

基于网络药理学和体内实验验证霍山石斛治疗胃溃疡的作用机制

温肾养血方调控PI3K/Akt/FoxO3A信号通路改善高龄雌鼠子宫内膜容受性的作用机制