一种适用于不同发育期山楂果实总RNA提取的方法

闫述模; 袁媛; 杨滨; 陈敏

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.2016140039

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一种适用于不同发育期山楂果实总RNA提取的方法

资源与鉴定 | 更新时间：2024-01-04

- 一种适用于不同发育期山楂果实总RNA提取的方法
- Good Method for Isolating Total RNA from Crataegi Fructus at Different Developmental Stages
- 中国实验方剂学杂志 2016年22卷第14期页码：39-43
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
  
  国家高技术研究发展计划项目（2014AA022201）
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.2016140039
  中图分类号： R284.2
- 纸质出版日期：2016
- 稿件说明：
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闫述模, 袁媛, 杨滨, 等. 一种适用于不同发育期山楂果实总RNA提取的方法[J]. 中国实验方剂学杂志, 2016,22(14):39-43.

YAN Shu-mo, YUAN Yuan, YANG Bin, et al. Good Method for Isolating Total RNA from Crataegi Fructus at Different Developmental Stages[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2016, 22(14): 39-43.
闫述模, 袁媛, 杨滨, 等. 一种适用于不同发育期山楂果实总RNA提取的方法[J]. 中国实验方剂学杂志, 2016,22(14):39-43. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.2016140039.

YAN Shu-mo, YUAN Yuan, YANG Bin, et al. Good Method for Isolating Total RNA from Crataegi Fructus at Different Developmental Stages[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2016, 22(14): 39-43. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.2016140039.

摘要

目的：筛选从不同发育期山楂果实中提取RNA的最佳方法。方法：对不同发育期山楂果实总RNA提取法进行了探索，考察了Trizol法、改良Trizol法、经典十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法和改良CTAB法提取RNA的效果，采用琼脂糖凝胶电泳和核酸蛋白定量仪检测RNA质量。结果：Trizol法、改良Trizol法对成熟期山楂果实RNA提取效果不佳，琼脂糖凝胶电泳检测几乎看不到条带；经典CTAB法对各发育期样本RNA提取质量均不理想；改良CTAB法对不同发育期山楂果实总RNA有良好的提取效果，A260nm/A280nm均在2.0左右，28S和18S条带完整，满足反转录和聚合酶链式反应（PCR）扩增反应的需求。结论：建立的改良CTAB法是一种有效的山楂果实总RNA提取方法，适用于不同发育期山楂果实RNA的提取，为开展山楂有效成分的生物合成研究奠定了基础。

Abstract

Objective: To choose the best RNA extraction for Crataegi Fructus from different stage. Method: In this paper

the Trizol

the modified Trizol

the cetyltrie thylammnonium bromide (CTAB) and the modified CTAB methods were compared to extract high purity and integrity RNA from Crataegi Fructus at different developmental stage. And the quality of RNA was analyzed by electrophoresis detection and the spectrophotometer. Result: According to the result

high-grade RNA

with clear 18 S and 28 S

and the value of A260 nm/A280 nm was about 2.0

was isolated by using the modified CTAB method. Furthermore

the isolated RNAs from samples at different developmental stages were successfully used for the reverse transcription- polymerase chain reaction (RT-PCR) of the ACTIN in hawthorn. Conclusion: It suggested that the modified CTAB method was useful for isolating RNA from Crataegi Fructus at different developmental stage.

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