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1.成都中医药大学,成都 611137
2.山西中医药大学,太原 030024
3.遵义医药高等专科学校,贵州 遵义 563006
赵乐,在读博士,从事方剂相关配伍理论的研究,E-mail: Zleva2012@126.com
*李艳彦,博士,教授,从事方证相关物质基础的研究,Tel: 0351-8618180,E-mail: liyy1002@163.com
收稿日期:2018-07-12,
网络出版日期:2018-11-16,
纸质出版日期:2019-02-05
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赵乐, 李艳彦, 王永辉, 等. 黄芪桂枝五物汤对骨关节炎大鼠血管新生的作用[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019,25(3):87-93.
Le ZHAO, Yan-yan LI, Yong-hui WANG, et al. Effect of Huangqi Guizhi Wuwu Tang on Angiogenesis in Osteoarthritis[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2019, 25(3): 87-93.
赵乐, 李艳彦, 王永辉, 等. 黄芪桂枝五物汤对骨关节炎大鼠血管新生的作用[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019,25(3):87-93. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190338.
Le ZHAO, Yan-yan LI, Yong-hui WANG, et al. Effect of Huangqi Guizhi Wuwu Tang on Angiogenesis in Osteoarthritis[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2019, 25(3): 87-93. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190338.
目的:
2
研究黄芪桂枝五物汤对阳虚寒凝骨关节炎(osteoarthritis
OA)模型大鼠血管内皮生长因子(VEGF)及相关因子的影响。
方法:
2
60只SPF级SD大鼠随机分为正常组,模型组,塞来昔布组(20.82 mg·kg
-1
),黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组(3.24,6.48,12.96 g·kg
-1
)。除正常组外,其余各组通过冷固法复合寒冷环境刺激42 d,复制OA模型。造模后,给药组分别灌胃相应药物,正常组和模型组给同等剂量蒸馏水,每天1次,连续28 d。末次给药24 h后,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中VEGF,前列腺素E
2
(PGE
2
),转化生长因子
β
1
(TGF-
β
1
)水平;免疫组化染色检测左膝关节滑膜和软骨内VEGF表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测右膝关节滑膜白细胞介素-17(IL-17)和VEGF mRNA表达。
结果:
2
与正常组比较,模型组血清、软骨和滑膜组织中VEGF表达均显著性升高(
P
<
0.01),同时,血清中PGE
2
和TGF-
β
1
,滑膜组织IL-17水平均显著升高(
P
<
0.01);与模型组比较,各用药组血清、软骨和滑膜组织中VEGF表达均显著性降低(
P
<
0.05),同时,血清中PGE
2
和TGF-
β
1
水平,滑膜组织中IL-17水平亦显著降低(
P
<
0.05);各用药组间比较,黄芪桂枝五物汤高剂量组膝关节滑膜组织IL-17较塞来昔布组升高(
P
<
0.05),黄芪桂枝五物汤中、高剂量组VEGF较塞来昔布组显著升高(
P
<
0.01),其余各组间比较均无显著性差异。
结论:
2
黄芪桂枝五物汤可能通过减轻骨关节炎大鼠血管新生相关细胞因子PGE
2
和TGF-
β
1
等的表达而作用于VEGF,从而抑制膝骨关节处血管新生,减轻软骨损伤。
Objective:
2
To study the effect of Huangqi Guizhi Wuwu Tang on angiogenesis of osteoarthritis with Yang deficiency and cold coagulation.
Method:
2
Totally 60 female SD rats were randomly divided into control group
model group
celecoxib group (20.82 mg·kg
-1
) and low
medium
high-dose Huangqi Guizhi Wuwu Tang groups (3.24
6.48
12.96 g·kg
-1
). All groups
except for control group
were involved in duplicating the osteoarthritis(OA) model through frozen and knee fixation
as well as 42-day cold environmental stimulation. After modeling
all drug-group rats were respectively administrated with corresponding drugs for 28 days
once a day. Meanwhile
control group and model group were given equivalent distilled water by gavage. 24 hours after the last gavage
vascular endothelial growth factor (VEGF)
prostaglandin E
2
(PGE
2
) and transforming growth factor-
β
1
(TGF-
β
1
) in serum were detected with enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) method
VEGF expressions in cartilage and synovial with immunohistochemical method
and interleukin-17(IL-17) and VEGF levels in synovial with Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction(Real-time PCR).
Result:
2
Compared with normal group
the expression of VEGF in serum
cartilage and synovial were significantly increased (
P
<
0.01)
and PGE
2
and TGF-
β
1
expressions
IL-17 level were increased significantly (
P
<
0.01) as well. Compared with model group
VEGF in serum
cartilage and synovial were significantly decreased in the 4 drug groups. Meanwhile
PGE
2
TGF-
β
1
and IL-17 level were decreased significantly (
P
<
0.05). Among drug groups
IL-17 of high-dose group in synovial was higher than that of celecoxib group (
P
<
0.05)
and VEGF of medium and high-dose Huangqi Guizhi Wuwu Tang groups in synovial was higher than that of celecoxib group (
P
<
0.05). There was no significant difference among other drug groups.
Conclusion:
2
Huangqi Guizhi Wuwu Tang has an effect in suppressing angiogenesis of knee and alleviate cartilage lesion by regulating VEGF and its upstream cytokines PGE
2
and TGF-
β
1
.
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