加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织Occludin，ZO-1，Claudin-1蛋白及其mRNA表达的影响

唐冰镕; 李花; 刘旺华; 胡康丽

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20191201

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加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织Occludin，ZO-1，Claudin-1蛋白及其mRNA表达的影响

经典名方 | 更新时间：2021-02-09

- 加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织Occludin，ZO-1，Claudin-1蛋白及其mRNA表达的影响
- Effect of Modified Sijunzi Tang on Protein and mRNA Expressions of Occludin, ZO-1 and Claudin-1 in Cerebral Ischemia Rats
- 中国实验方剂学杂志 2019年25卷第15期页码：57-63
- 作者机构：
  
  湖南中医药大学　中医诊断学湖南省重点实验室，长沙　 410208
- 作者简介：
  
  唐冰镕，在读硕士，从事《内经》治则治法与心脑血管病防治研究，E-mail：327998056@qq.com
  李花，博士，副教授，硕士生导师，从事《内经》治则治法与心脑血管病防治研究，E-mail: 420039931@qq.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81202632;81473567);湖南省教育厅优秀青年基金项目(14B134);湖南省高校创新平台开放基金项目(15K092);湖南省中医药科研计划项目(201723)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20191201
  中图分类号： R2-0; R22; R285.5; R289
- 收稿日期：2018-11-19，
  
  网络出版日期：2019-03-01，
  
  纸质出版日期：2019-08-05
- 稿件说明：
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唐冰镕, 李花, 刘旺华, 等. 加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织Occludin，ZO-1，Claudin-1蛋白及其mRNA表达的影响[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019,25(15):57-63.

Bing-rong TANG, Hua LI, Wang-hua LIU, et al. Effect of Modified Sijunzi Tang on Protein and mRNA Expressions of Occludin, ZO-1 and Claudin-1 in Cerebral Ischemia Rats[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2019, 25(15): 57-63.
唐冰镕, 李花, 刘旺华, 等. 加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织Occludin，ZO-1，Claudin-1蛋白及其mRNA表达的影响[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019,25(15):57-63. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20191201.

Bing-rong TANG, Hua LI, Wang-hua LIU, et al. Effect of Modified Sijunzi Tang on Protein and mRNA Expressions of Occludin, ZO-1 and Claudin-1 in Cerebral Ischemia Rats[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2019, 25(15): 57-63. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20191201.

摘要

目的：

探讨加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织闭合蛋白(Occludin)，密封蛋白-1(Claudin-1)，闭锁连接蛋白-1(ZO-1)表达的影响，并探讨相关的作用机制。

方法：

将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组，模型组，依达拉奉组(3.2×10

－3

g·kg

－1

)，加味四君子汤加减低、中、高剂量组(4.77，9.54，19.08 g·kg

－1

)。采用线栓法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型，治疗7 d后处死，运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠缺血侧脑皮质区Occludin，ZO-1，Claudin-1蛋白的表达，运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠缺血侧脑皮质区Occludin，ZO-1，Claudin-1 mRNA表达。

结果：

与假手术组比较，模型组Occludin，Claudin-1，ZO-1蛋白显著减少(

0.01)；与模型组比较，依达拉奉组、加味四君子汤各剂量组Occludin，Claudin-1，ZO-1蛋白均显著增高(

0.01)。与假手术组比较，模型组大鼠Occludin，Claudin-1，ZO-1 mRNA表达下调(

0.01)；与模型组比较，依达拉奉组、加味四君子汤各剂量组大鼠Occludin，Claudin-1，ZO-1 mRNA表达上升(

0.01)。

结论：

加味四君子汤可能通过增加紧密连接蛋白Occludin，ZO-1，Claudin-1的表达，保护血脑屏障，减轻缺血性脑卒中大鼠脑水肿。

Abstract

Objective:

To investigate the effect of modified Sijunzi Tang on protein and mRNA expressions of Occludin

Claudin-1 and zonula occludens-1(ZO-1) in cerebral ischemia rats.

Method:

Totally 60 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham operation group

model group

edaravone group

small-dose modified Sijunzi Tang group

middle-dose modified Sijunzi Tang group and high-dose modified Sijunzi Tang group. The middle cerebral artery occlusion (MCAO) model was prepared by suture method. After 7 days of treatment

the modeling group was put to death. Western blot was used to detect the contents of Occludin

Claudin-1 and ZO-1 in the ischemic cerebral cortex of rats. Detection of Occludin

ZO-1

Claudin-1 mRNA expression in the ischemic cortex of rats by Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (Real-time PCR).

Result:

Compared with the sham operation group

protein expressions of Occludin

Claudin-1

and ZO-1 in the model group were significantly down-regulated (

0.01). Compared with the model group

protein expressions of Occludin

ZO-1

Claudin-1 in the positive control group and modified Sijunzi Tang groups increased significantly

with statistically significant differences (

0.01). Compared with the Sham operation group

the expression of Occludin

Claudin-1

and ZO-1 mRNA in the model group was down-regulated (

0.01). Compared with the model group

mRNA expressions of Occludin

Claudin-1

ZO-1 in the positive control group and modified Sijunzi Tang groups increased

with statistically significant differences (

0.01).

Conclusion:

Modified Sijunzi Tang may protect the blood-brain barrier and reduce brain edema in ischemic stroke rats by increasing the expression of tight junction proteins Occludin

ZO-1 and Claudin-1.

关键词

Keywords

references

Mac Gregor D G , Avshalumov M V , Rice M E , et al . Brain edema induced by in vitro ischemia causal factors and neuroprotection [J]. Neurochem , 2003 , 85 ( 6 ): 1402 - 1411 .

YANG Y , Estrada E Y , Thompson J F , et al . Matrix metalloproteinase-mediated disruption of tight junction proteins in cerebral vessels is reversed by synthetic matrix metalloproteinase inhibitor in focal is chemia in rat [J]. J Cereb Blood Flow Metab , 2007 , 27 ( 4 ): 697 - 709 .

Lamas M , Gonzalez-Mariscal I , Gutierrez R , et al . Presence of claudins mRNA in the brain.Selective modulation of expression by kindling epilepsy [J]. Brain Res Mol Res , 2002 , 104 ( 2 ): 250 - 254 .

李花，刘旺华，廖亮英，等．健脾补土方药治疗缺血性脑卒中后遗症疗效观察 [J]．中国中医药信息杂志， 2010 ， 17 ( 3 )： 73 - 74 ．

李花，刘旺华，廖亮英，等．健脾补土法对大鼠脑缺血再灌注后层黏连蛋白降解的影响 [J]．中华老年心脑血管病杂志， 2010 ， 12 ( 7 )： 645 - 647 ．

李花，刘旺华，周小青，等．健脾补土法对脑缺血再灌注大鼠脑组织MMP-2的表达及血脑屏障通透性的影响 [J]．湖南中医杂志， 2013 ， 29 ( 2 )： 115 - 117 ．

付小金，刘旺华，李花，等．健脾补土方对脑缺血/再灌注损伤大鼠NF-κB和IκBα蛋白表达水平的影响 [J]．湖南中医药大学学报， 2015 ， 35 ( 3 )： 10 - 12 ．

钟银玲，李花，刘旺华，等．健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织t-PA、PAI-1、Col Ⅳ的影响 [J]．中国中医急症， 2016 ， 25 ( 12 )： 2213-2215，2267 ．

钟银玲，李花，刘旺华，等．健脾补土法组方对脑缺血/再灌注大鼠脑组织INTβ3、ILK及FAK mRNA及蛋白表达的影响 [J]．时珍国医国药， 2017 ， 28 ( 3 )： 513 - 516 ．

胡康丽，李花，刘旺华，等．四君子汤加减对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织ERK1/2，Akt，Bax表达的影响 [J]．中国实验方剂学杂志， 2018 ， 24 ( 13 )： 152 - 158 ．

Longa E Z , Weinstein P R , Carlson S , et al . Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats [J]. Stoke , 1989 , 20 ( 1 ): 84 - 91 .

Haseloff R F , Dithmer S , Winkler L , et al . Transmembrane proteins of the tight junctions at the blood-brain barrier: structural and functional aspects [J]. Semin Cell Dev Biol , 2015 , 38 ( 1 ): 16 - 25 .

王振华，刘云会，马腾，等．大鼠局灶性脑缺血再灌注早期血脑屏障通透性变化的研究 [J]．中国医科大学学报， 2012 ， 41 ( 12 )： 1073 - 1076 ．

Hawkins B T , Davis T P . The blood-brain barrier neurovascular unit in health and disease [J]. Pharmacol Rev , 2005 , 57 ( 2 ): 173 - 185 .

Matter K , Balda M S . Functional analysis of tight junctions [J]. Methods , 2003 , 30 ( 3 ): 228 - 234 .

GU Z , CUI J , Brown S , et al . A highly specific inhibitor of matrix metalloproteinase-9 rescues laminin from proteolysisj and neurons from apoptosis in transient focal cerebral ischemia [J]. J Neurosci , 2005 , 25 ( 27 ): 6401 - 6408 .

Hering N A , Fromm M , Schulzke J D . Determinants of colonic barrier function in inflammatory bowel disease and potential therapeutics [J]. J Physiol , 2012 , 590 ( 5 ): 1035 - 1044 .

WEN H , Watry D D , Marcodes M C , et al . Selective decrease in paracellular conductance of tight junctions: role of the first extracellular domain of claudin-5 [J]. Mol Cell Biol , 2004 , 24 ( 19 ): 8408 - 8417 .

郑春雷．活血健脾利水方联合西药治疗脑出血后脑水肿临床观察 [J]．中国中医急症， 2013 ， 22 ( 10 )： 1773 - 1774 ．

戴伟娟，王国芳，林丽文，等．温脾汤提取物对小鼠记忆功能及脑内SOD和MDA的影响 [J]．中华行为医学与脑科学杂志， 2013 ， 22 ( 11 )： 982 - 984 ．

林鑫．健脾益智法对MCAO大鼠VIP、NT、NPY、SP的影响 [D]．福州：福建中医药大学， 2014 ．

牛犇，张卉，杨铁骊．补气健脑通络汤对气虚血瘀证缺血性脑卒中恢复期运动障碍的改善 [J]．中国实验方剂学杂志， 2016 ， 22 ( 5 )： 206 - 210 ．

林汉杰，张金卫，卢月，等．四君子汤对UC模型大鼠的治疗作用及其对紧密连接蛋白Occludin表达的影响 [J]．中国实验方剂学杂志， 2016 ， 22 ( 13 )： 112 - 117 ．

何爱明，张涛．四君子汤对溃疡性结肠炎模型小鼠claudin-1/3的影响 [J]．医药导报， 2016 ， 35 ( 11 )： 1190 - 1194 ．

陈春富，郭述苏，冯林，等．黄芪对大鼠脑缺血血脑屏障及脑血流的影响 [J]．卒中与神经疾病， 1998 ， 5 ( 3 )： 132 - 134 ．

罗玉敏，秦震．黄芪甲甙对局灶性脑缺血小鼠脑组织超氧化物歧化酶活性的影响 [J]．中华神经科杂志， 1999 ， 32 ( 1 )： 46，62 ．

田建明，刘洁，李浩，等．人参皂苷RG2对动物脑循环及脑水肿的影响 [J]．中国新药杂志， 2009 ， 10 ( 17 )： 1664 - 1666 ．

肖开，苗明三．薏苡仁现代研究分析 [J]．中医学报， 2014 ， 29 ( 9 )： 1348 - 1350 ．

王珺，徐俊杰．山药多糖的组成及其药理作用的研究进展 [J]．吉林医药学院学报， 2018 ， 39 ( 4 )： 304 - 306 ．

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