香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运机制分析

郭慧玲; 胡强; 胡律江; 高文军; 胡志方; 赵晓娟

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20191547

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香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运机制分析

药剂与炮制 | 更新时间：2021-02-09

- 香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运机制分析
- Analysis of Transport Mechanism of Cyperotundone in Caco-2 Cell Model
- 中国实验方剂学杂志 2019年25卷第23期页码：110-115
- 作者机构：
  
  1.江西中医药大学，南昌　 330004；
  2.江西中医药高等专科学校，江西　抚州　 344000
- 作者简介：
  
  郭慧玲，教授，博士生导师，从事中药制剂新剂型与新技术研究，E-mail：ghl6262@126.com
  胡律江，副教授，博士，硕士生导师，从事中药炮制与中药制剂研究，Tel：0791-86363831，E-mail：380085581@qq.com
- 基金信息：
  
  江西省科技厅项目(20161BBG70072);江西省高校落地计划产学研项目(KJLD14057);江西省教育厅科技项目(170721)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20191547
  中图分类号： R22; Q2; R28; C37; R945; O657
- 收稿日期：2018-12-29，
  
  网络出版日期：2019-04-15，
  
  纸质出版日期：2019-12-05
- 稿件说明：
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郭慧玲, 胡强, 胡律江, 等. 香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运机制分析[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019,25(23):110-115.

Hui-ling GUO, Qiang HU, Lyu-jiang HU, et al. Analysis of Transport Mechanism of Cyperotundone in Caco-2 Cell Model[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2019, 25(23): 110-115.
郭慧玲, 胡强, 胡律江, 等. 香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运机制分析[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019,25(23):110-115. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20191547.

Hui-ling GUO, Qiang HU, Lyu-jiang HU, et al. Analysis of Transport Mechanism of Cyperotundone in Caco-2 Cell Model[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2019, 25(23): 110-115. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20191547.

摘要

目的：

考察香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运机制，为香附的临床应用提供实验依据。

方法：

通过噻唑蓝(MTT)比色法考察不同质量浓度香附烯酮对Caco-2细胞的毒性，以确定转运试验的给药浓度。以香附烯酮表观渗透系数(

app

)和累积转运量为评价指标，采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)测定香附烯酮的含量，色谱条件为流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0～1.5 min，35%A；1.5～2 min，35%～90%A；2～4 min，90%A；4～4.1 min，90%～35%A；4.1～8 min，35%A)，流速0.3 mL·min

－1

，进样量1 μL，柱温30℃；质谱条件为电喷雾离子源(ESI)，正离子模式，香附烯酮及内标物蛇床子素的检测离子分别为

219.2～110.9，

245.0～189.0。探讨了香附烯酮质量浓度、给药时间、乙二胺四乙酸(EDTA)及P-糖蛋白(P-gp)抑制剂对香附烯酮在体外细胞模型上跨膜转运的影响。

结果：

香附烯酮质量浓度处于3～90 mg·L

－1

时，孵育4 h内对Caco-2细胞没有明显毒性。香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运存在一定的浓度及时间依赖性，其

app

1×10

－6

cm·s

－1

，说明药物吸收良好，外排率处于0.5～1.5；加入细胞旁路转运抑制剂EDTA及P-gp转运体抑制剂维拉帕米后，双向

app

没有显著性差异。

结论：

香附烯酮在Caco-2细胞模型转运机制主要是被动扩散，细胞旁路转运及P-gp不参与其转运。

Abstract

Objective:

To investigate transport mechanism of cyperotundone in Caco-2 cell model and provide experimental basis for clinical application of Cyperi Rhizoma.

Method:

The toxicity of cyperotundone with different concentrations to Caco-2 cells was investigated by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) colorimetry

in order to determine the concentration of administration in transport test. The content of cyperotundone was determined by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) with apparent permeability coefficient (

app

) and cumulative transport capacity as indexes. The chromatographic conditions were as following: mobile phase of acetonitrile (A)-water (B) for gradient elution (0-1.5 min

35%A; 1.5-2 min

35%-90%A; 2-4 min

90%A; 4-4.1

90%-35%A; 4.1-8 min

35%A)

the flow rate at 0.3 mL·min

-1

injection volume of 1 μL

and temperature of column at 30 ℃. The mass spectrometric conditions was electrospray ionization (ESI) and positive ion mode

the detection ions of cyperotundone and osthole (internal standard substance) were

219.2-110.9 and

245.0-189.0

respectively. Effect of concentration of cyperotundone

administration time

ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) and P-glycoprotein (P-gp) inhibitor on the transmembrane transport of cyperotundone on

in vitro

cell model were investigated.

Result:

Cyperotundone didn't have significant toxicity to Caco-2 cells at 3-90 mg·L

-1

after incubation for 4 h. The transportion of cyperotundone in Caco-2 cell model was related to the concentration and time to a certain extent

its

app

was higher than 1×10

-6

cm·s

-1

which indicated that absorption of cyperotundone was good

the efflux rate (ER) of cyperotundone was 0.5-1.5.There was no significant difference in bidirectional

app

of cyperotundone after the addition of cell bypass transport inhibitor (EDTA) and P-gp transport inhibitor (verapamil).

Conclusion:

The transport mechanism of cyperotundone in Caco-2 cell model is mainly passive diffusion

and cell bypass transport and P-gp are not involved in its transport.

关键词

Keywords

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