三黄泻心汤抑制危险脂肪因子7-keto诱导血管内皮NLRP3活化引起的功能紊乱的机制分析

林逸科; 谢银燕; 骆林喆; 郑新月; 郑怡佳; 陈扬

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20192401

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三黄泻心汤抑制危险脂肪因子7-keto诱导血管内皮NLRP3活化引起的功能紊乱的机制分析

经典名方 | 更新时间：2021-02-09

- 三黄泻心汤抑制危险脂肪因子7-keto诱导血管内皮NLRP3活化引起的功能紊乱的机制分析
- Effect of Sanhuang Xiexintang in Inhibiting 7-Ketocholesterol-induced Endothelial Disfunctional by NIRP3 Inflammasome Pathway
- 中国实验方剂学杂志 2020年26卷第1期页码：31-36
- 作者机构：
  
  1.广州中医药大学　中药学院，广州　 510006
  2.广州中医药大学　基础医学院，广州　 510006
- 作者简介：
  
  [第一作者]　林逸科，在读硕士，从事心血管药理研究，E-mail：linyike9527@163.com
  *陈扬，博士，研究员，从事心血管药理研究，E-mail：ychen8@gzucm.edu.cn
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金青年基金项目(81603587);广东省杰出青年科学基金项目(2018B030306027);“攀登计划”广东大学生科技创新培育专项(pdjhb0122;pdjhb0123);国家大学生创新训练项目(201810572026;S201910572006)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20192401
  中图分类号： R2-0; R22; R285.5; R289
- 收稿日期：2019-05-15，
  
  网络出版日期：2019-09-06，
  
  纸质出版日期：2020-01-05
- 稿件说明：
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林逸科, 谢银燕, 骆林喆, 等. 三黄泻心汤抑制危险脂肪因子7-keto诱导血管内皮NLRP3活化引起的功能紊乱的机制分析[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(1):31-36.

Yi-ke LIN, Yin-yan XIE, Lin-zhe LUO, et al. Effect of Sanhuang Xiexintang in Inhibiting 7-Ketocholesterol-induced Endothelial Disfunctional by NIRP3 Inflammasome Pathway[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2020, 26(1): 31-36.
林逸科, 谢银燕, 骆林喆, 等. 三黄泻心汤抑制危险脂肪因子7-keto诱导血管内皮NLRP3活化引起的功能紊乱的机制分析[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(1):31-36. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20192401.

Yi-ke LIN, Yin-yan XIE, Lin-zhe LUO, et al. Effect of Sanhuang Xiexintang in Inhibiting 7-Ketocholesterol-induced Endothelial Disfunctional by NIRP3 Inflammasome Pathway[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2020, 26(1): 31-36. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20192401.

摘要

目的：

研究三黄泻心汤(SHXXT)能否通过抑制7-酮基胆固醇(7-keto)诱导的血管内皮细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)活化恢复内皮功能。

方法：

培养小鼠主动脉血管环组织，实验组分为正常组，模型7-keto组，三黄泻心汤含药血清1%，2%，5%不同浓度给药组，观察小鼠血管舒张功能；培养微血管内皮细胞，按照上述实验分组，另设置NLRP3抑制剂异甘草素(ISO)，通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测内皮一氧化氮合酶(eNOS)，NLRP3，含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)，白细胞介素-1

(IL-1

)蛋白表达量的变化，除此之外，利用一氧化氮(NO)定量试剂盒检测NO的浓度。

结果：

与正常组比较，模型组显著降低血管环内皮依赖性舒张功能(

0.01)，给药组明显恢复内皮依赖性血管舒张功能，且成浓度依赖性(

0.05，

0.01)；同时研究显示，与正常组比较，模型组微血管内皮细胞eNOS蛋白表达明显降低(

0.05)，NLRP3，Caspase-1，IL-1

蛋白表达明显升高(

0.05，

0.01)，NO浓度显著降低(

0.01)；与模型组比较，给予三黄泻心汤血清治疗后，明显升高eNOS蛋白表达和NO浓度，明显降低NLRP3，Caspase-1，IL-1

蛋白表达(

0.05，

0.01)。

结论：

三黄泻心汤能改善7-keto引起的内皮依赖性血管功能损伤，且是通过抑制内皮NLRP3炎症小体活化介导的NO信号通路实现的。

Abstract

Objective:

To study whether Sanhuang Xiexintang (SHXXT) can restore endothelial function by inhibiting the activation of NOD-like receptor protein 3 (NIRP3) induced by 7-ketocholesterol (7-keto) in vascular endothelial cells.

Method:

The aortic rings of mice were cultured in normal group

model (7-keto) group

SHXXT groups (1%

2% and 5% drug-containing serum). Vasodilation function of mice was observed. Microvascular endothelial cells were cultured according to the above experimental groups

and NIRP3 inhibitor isoglycyrrhizin (ISO) group

was also set. Western blot was used to detect the expressions of endothelial nitric oxide synthase (eNOS)

NIRP3

cysteinyl aspartate specific proteinase-1 (Caspase-1)

interleukin-1

(IL-1

) protein. In addition

nitric oxide (NO) quantitative kit was used to detect the concentration of NO.

Result:

Compared with the normal group

the endothelium-dependent vasodilation function of vascular rings was significantly reduced in model group (

0.01)

and the drug group significantly restored the endothelium-dependent vasodilation function in a concentration-dependent manner (

0.05

0.01). Meanwhile

microvascular endothelial cells were also studied. Compared with the normal group

the content of eNOS protein in the model group decreased (

0.05)

while the concentration of NO decreased significantly (

0.01). After treatment with SHXXT serum

eNOS and NO could be restored

with significant differences in the concentration of NO with 5% (

0.05) and 10% (

0.01) SHXXT serum. At the same time

the expressions of NIRP3 (

0.05)

cle-Caspase-1 activation (

0.01) and IL-1

production (

0.01) in endothelium were significantly increased under 7-keto stimulation

and the SHXXT serum could significantly inhibit the expression and activation of relevant proteins. Subsequently

endothelial cells were treated with NIRP3 inhibitor ISO. Compared with the model group

eNOS expression increased

and NO concentration increased significantly (

0.01) after treatment with ISO

but ISO had no synergistic effect on SHXXT serum.

Conclusion:

SHXXT can improve endothelium-dependent vascular dysfunction induced by 7-keto

which is achieved by NO signaling pathway mediated by inhibiting the activation of endothelial NIRP3-related proteins.

关键词

Keywords

references

孟焕，宋洁，孙彦平，等．老年心血管病患者衰弱现状、影响因素及干预的研究进展 [J]．现代临床护理， 2017 ， 16 ( 9 )： 69 - 73 .

Y CHEN ， A L Pitzer ， X LI ， et al . Instigation of endothelial Nlrp3 inflammasome by adipokine visfatin promotes inter-endothelial junction disruption: role of HMGB1 [J]. J Cell Mol Med ， 2015 ， 19 ( 12 ): 2715 - 2727 .

Y CHEN ， X LI ， K M Boini , et al . Endothelial Nlrp3 inflammasome activation associated with lysosomal destabilization during coronary arteritis [J]. Biochim Biophys Acta ， 2015 ， 1853 ( 2 )： 396 - 408 .

林巧云 . 周仲瑛教授从“痰瘀”辨治高脂血症的临床经验及学术思想研究 [D]．南京：南京中医药大学， 2017 .

王钰雄，刘伟伟，李雪萍，等．三黄泻心汤体外抑制耐药金黄色葡萄球菌活性测定 [J]．实用中医药杂志， 2018 ， 34 ( 4 )： 500 - 501 .

殷小杰，马晓静，王岚，等．三黄泻心汤“炮制配伍”活血化瘀优势方抗大鼠动脉粥样硬化作用的研究 [J]．中国药物警戒， 2017 ， 14 ( 9 )： 518 - 522，526 .

马晓静，王岚，殷小杰，等．三黄泻心汤“炮制配伍”解热优势方药效及其作用机制研究 [J]．中国药物警戒， 2016 ， 13 ( 8 )： 449 - 451，463 .

邓翀，张艺，孟宪丽，等．三黄泻心汤血清药物化学初步研究 [J]．陕西中医学院学报， 2009 ， 32 ( 6 )： 57 - 59 .

殷小杰，马晓静，王岚，等．三黄泻心汤活血化瘀优势方抗动脉粥样硬化的作用机制 [J]．中国实验方剂学杂志， 2018 ， 24 ( 22 )： 83 - 88 .

潘祥龙，郝二伟，谢金玲，等．活血化瘀中药调节血瘀证的分子机制研究进展 [J]．中国实验方剂学杂志， 2018 ， 24 ( 24 )： 227 - 234 .

C Manicam ， N Ginter ， H LI ， et al . Compensatory vasodilator mechanisms in the ophthalmic artery of endothelial nitric oxide synthase gene knockout mice [J]. Sci Rep , 2017 , 7 ( 1 )： 7111 .

王红梅，周建明，吕耀中，等 . 龙血通络胶囊对氧化低密度脂蛋白损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用 [J]. 中国中药杂志， 2018 ， 43 ( 6 )： 1241 - 1246 .

卢文丹，李莉，申艳佳，等 . 基于血管舒缩相关GPCR靶点的小续命汤网络药理学研究 [J]. 中国中药杂志， 2018 ， 43 ( 23 )： 4698 - 4708 .

T Suvorava , S Pick , G Kojda . Selective impairment of blood pressure reduction by endothelial nitric oxide synthase dimer destabilization in mice [J]. J Hypertens ， 2017 ， 35 ( 1 )： 76 - 88 .

T J Guzik , R M Touyz . Oxidative stress, inflammation, and vascular aging in hypertension [J]. Hypertension , 2017 , 70 ( 4 )： 660 .

Q N Dinh , G R Drummond , C G Sobey , et al . Roles of inflammation, oxidative stress, and vascular dysfunction in hypertension [J]. Biomed Res Int , 2014 , doi: 10.1155/2014/406960 http://dx.doi.org/10.1155/2014/406960 .

A C Montezano , M Dulak-Lis , S Tsiropoulou , et al . Oxidative stress and human hypertension: vascular mechanisms, biomarkers, and novel therapies [J]. Can J Cardiol , 2015 , 31 ( 5 )： 631 - 641 .

R ZHOU , A S Yazdi , P Menu , et al . A role for mitochondria in NLRP3 inflammasome activation [J]. Nature , 2011 , 475 ( 7354 )： 122 - 122 .

E P Luís , C L Diego , A G Elísabet , et al . NLRP3-inflammasome inhibition prevents high fat and high sugar diets-induced heart damage through autophagy induction [J]. Oncotarget ， 2017 ， 8 ( 59 )： 99740 - 99756 .

M Furuoka ， K I Ozaki ， D Sadatomi ， et al . TNF- α induces Caspase-1 activation independently of simultaneously induced NLRP3 in 3T3-L1 cells [J]. J Cell Physiol , 2016 ， 231 ( 12 )： 2761 - 7 .

S T YAO , F CAO , J L CHEN , et al . NLRP3 is required for complement-mediated Caspase-1 and IL-1beta Activation in ICH [J]. J Mol Neurosci , 2017 , 61 ( 3 )： 385 - 395 .

E SONG , J W Jahng , L P CHONG , et al . Lipocalin-2 induces NLRP3 inflammasome activation via HMGB1 induced TLR4 signaling in heart tissue of mice under pressure overload challenge [J]. Am J Transl Res , 2017 , 9 ( 6 )： 2723 - 2735 .

王雪，修成奎，杨静，等．人参-三七-川芎提取物对高糖高脂诱导血管内皮细胞衰老的影响 [J]．中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 ( 1 )： 124 - 129 .

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