补中益气汤对刀豆蛋白A致小鼠急性肝衰竭的保护作用

朱鏐娈; 李蕊; 张剑平; 曾辉; 王宪波

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20200137

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

补中益气汤对刀豆蛋白A致小鼠急性肝衰竭的保护作用

经典名方 | 更新时间：2021-02-09

- 补中益气汤对刀豆蛋白A致小鼠急性肝衰竭的保护作用
- Protective Effect and Mechanism of Buzhong Yiqitang on Concanavalin A-induced Acute Liver Failure in Mice
- 中国实验方剂学杂志 2020年26卷第1期页码：10-16
- 作者机构：
  
  首都医科大学　附属北京地坛医院　传染病研究所新发突发传染病研究　北京市重点实验室，中西医结合中心，北京　 100015
- 作者简介：
  
  [第一作者]　朱鏐娈，博士，副教授，从事感染免疫工作，E-mail：zhuliuluan@ccmu.edu.cn
  *王宪波，博士，主任医师，教授，从事中西医结合肝病工作，E-mail：wangxianbo638@163.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81273743;81774234);北京市医管中心“青苗”计划项目(QML20161802)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20200137
  中图分类号： R2-0; R289; R285.5; R333.4
- 收稿日期：2019-07-04，
  
  网络出版日期：2019-09-18，
  
  纸质出版日期：2020-01-05
- 稿件说明：
移动端阅览
朱鏐娈, 李蕊, 张剑平, 等. 补中益气汤对刀豆蛋白A致小鼠急性肝衰竭的保护作用[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(1):10-16.

Liu-luan ZHU, Rui LI, Jian-ping ZHANG, et al. Protective Effect and Mechanism of Buzhong Yiqitang on Concanavalin A-induced Acute Liver Failure in Mice[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2020, 26(1): 10-16.
朱鏐娈, 李蕊, 张剑平, 等. 补中益气汤对刀豆蛋白A致小鼠急性肝衰竭的保护作用[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(1):10-16. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20200137.

Liu-luan ZHU, Rui LI, Jian-ping ZHANG, et al. Protective Effect and Mechanism of Buzhong Yiqitang on Concanavalin A-induced Acute Liver Failure in Mice[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2020, 26(1): 10-16. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20200137.

摘要

目的：

研究补中益气汤对刀豆蛋白A(ConA)致急性肝衰竭小鼠的保护作用及机制。

方法：

80只小鼠随机分为正常组，模型组，环孢素A(CsA)组，补中益气汤低、高剂量(10.5，21 g·kg

-1

)组，每组16只。除正常组外，其余各组静脉注射15 mg·kg

-1

ConA诱导小鼠急性肝衰竭模型。治疗组于ConA注射30 min后分别静脉注射50 mg·kg

-1

CsA，口服灌胃补中益气汤，正常组和模型组采用同时间、同体积双蒸水灌胃对照。造模3，10 h后取眼球血、肝脏、脾脏，采用流式微球技术检测血清肿瘤坏死因子-

(TNF-

)，白细胞介素(IL)-6，IL-12，

-干扰素(IFN-

)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平，采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性，苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化，流式细胞术分析脾脏CD4

＋

T淋巴细胞活化程度，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)，p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的表达及磷酸化水平。

结果：

与正常组比较，模型组小鼠血清ALT和AST水平均显著升高(

0.01)，肝组织病理损伤明显，血清炎性细胞因子TNF-

，IL-6，IL-12，IFN-

和MCP-1水平显著升高(

0.01)，脾脏CD4

＋

T淋巴细胞中IL-2，IFN-

和IL-4表达显著上调(

0.01)，肝脏ERK1/2和p38 MAPK磷酸化水平显著升高(

0.01)；与模型组比较，补中益气汤高剂量组血清ALT和AST水平明显降低(

0.05，

0.01)，肝组织病理损伤程度减轻，血清炎性细胞因子TNF-

，IL-6，IL-12，IFN-

和MCP-1水平明显降低(

0.05，

0.01)，脾脏CD4

＋

T淋巴细胞中IL-2和IFN-

表达明显下调(

0.05，

0.01)，肝脏ERK1/2和p38 MAPK磷酸化水平明显降低(

0.05，

0.01)。

结论：

补中益气汤对ConA诱导的急性肝衰竭小鼠具有明显的保护作用，其保护作用机制可能通过抑制ERK1/2和p38 MAPK信号通路，从而降低T淋巴细胞活化和炎性细胞因子分泌。

Abstract

Objective:

To explore the hepatoprotective effect and the mechanism of Buzhong Yiqitang (BZYQT) on mice with acute liver failure induced by Concanavalin A (ConA).

Method:

A total of 80 mice were randomly divided into normal group

model group

Cyclosporine A (CsA) group

BZYQT low and high dose group (10.5

21 g·kg

-1

)

16 mice per group. All the mice except for normal group were injected intravenously with 15 mg·kg

-1

ConA. The treatment group mice were orally administrated with BZYQT

or intravenously administrated with 50 mg·kg

-1

CsA 30 min post ConA injection

normal and model group mice were orally administrated with ddH

O at the same time. Blood

liver and spleen were collected 3 and 10 h post ConA injection. Cytokine levels of tumor necrosis factor alpha (TNF-

)

interleukin-6 (IL-6)

interleukin-12 (IL-12)

interferon-gamma (IFN-

) and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in the serum were detected with cytometric bead array. The alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) levels in the serum were analyzed with fully automatic biochemical analyzer. The pathological changes of liver tissues were observed by hematoxylin-eosin (HE) staining. The activation of splenic CD4

T lymphocytes was analyzed by flow cytometry. The expression and phosphorylation of extracellular regulated protein kinase 1/2(ERK1/2) and p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK) was analyzed by Western blot.

Result:

Compared with normal group

model group showed higher levels of ALT and AST in the serum (

0.01)

obvious pathological damage of liver tissue

higher levels of TNF-

IL-6

IL-12

IFN-

and MCP-1 in the serum (

0.01)

higher expression of IL-2

IFN-

and IL-4 CD4

T lymphocytes in the spleen (

0.01)

and elevated levels of phosphorylation of ERK1/2 and p38 MAPK (

0.01). Compared with the model group

BZYQT high dose group showed decreased levels of ALT and AST (

0.05

0.01)

reduced liver injury

decreased levels of TNF-

IL-6

IL-12

IFN-

and MCP-1 in the serum (

0.05

0.01)

reduced level of IL-2 and IFN-

CD4

T lymphocytes in the spleen (

0.05

0.01)

and reduced levels of phosphorylation of ERK1/2 and p38 MAPK (

0.05

0.01).

Conclusion:

BZYQT has a protective effect on mice with acute liver failure induced by ConA. The mechanism may be through inhibiting ERK1/2 and p38 MAPK signaling pathways

thereby reducing T lymphocyte activation and inflammatory cytokine secretion.

关键词

Keywords

references

B GAO ， W I Jeong ， Z TIAN . Liver：an organ with predominant innate immunity [J]. Hepatology ， 2008 ， 47 ( 2 )： 729 - 736 .

中华医学会感染病学分会肝衰竭与人工肝学组，中华医学会肝病学分会重型肝病与人工肝学组．肝衰竭诊治指南(2018年版) [J]．西南医科大学学报， 2019 ， 42 ( 2 )： 99 - 106 .

罗森，孟忠吉，龚作炯．慢加急性肝衰竭的免疫调节治疗研究进展 [J]．疑难病杂志， 2018 ， 17 ( 1 )： 101 - 106 .

王晓晶，张小平，宁琴．肝衰竭的免疫发病机制 [J]．临床肝胆病杂志， 2014 ， 30 ( 10 )： 984 - 991 .

杨晓丹．中蒙药对急性肝衰竭的作用及机制 [J]．中国民族医药杂志， 2019 ， 25 ( 4 )： 41 - 44 .

黄娜娜，孙蓉．适宜于中药抗急性肝损伤活性发现与药效评价的动物模型应用概况 [J]．中国药物警戒， 2015 ， 12 ( 11 )： 669 - 673 .

杨瑞华，李芹．中医药治疗肝衰竭研究进展 [J]．中西医结合研究， 2014 ， 6 ( 3 )： 158 - 162 .

张旸，吴银亚，谭善忠，等．基于正虚机制观察益气健脾法治疗慢性乙型肝炎肝衰竭的临床疗效 [J]．中国中医急症， 2012 ， 21 ( 6 )： 872 - 873，892 .

胡振斌，邓桂元，韦艾凌，等．中医药治疗肝衰竭的研究进展 [J]．中国中医药现代远程教育， 2011 ， 9 ( 4 )： 196 - 197 .

刘慧敏，王宪波，王融冰．基于解毒凉血法的中西医结合方案治疗乙型肝炎慢加急性肝衰竭疗效分析 [J]．中西医结合肝病杂志， 2011 ， 21 ( 4 )： 197 - 200 .

胡兵，安红梅，沈克平．补中益气汤现代药理学研究 [J]．中西医结合学报， 2008 ， 6 ( 7 )： 752 - 755 .

刘军彤，杨宇峰，王仁和，等．补中益气汤加减对糖尿病心肌病大鼠心功能及心肌细胞FABP3，PPAR γ 蛋白表达的影响 [J]．中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 ( 12 )： 35 - 42 .

王玉娥，席颖颖，李媛，等．补中益气汤配伍规律现代研究进展 [J]．中国实验方剂学杂志， 2017 ， 23 ( 7 )： 221 - 226 .

黄颖，蓝登科，李绵莎，等．补中益气汤治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期合并呼吸衰竭疗效研究 [J]．亚太传统医药， 2018 ， 14 ( 10 )： 191 - 193 .

吴艳菲，何海荣．补中益气汤合四妙丸加减联合重组人干扰素治疗宫颈HPV感染疗效观察 [J]．现代中西医结合杂志， 2019 ， 28 ( 2 )： 178 - 180，184 .

王媛．孟鲁司特片联合补中益气汤治疗对支气管哮喘缓解期患儿炎症指标、免疫功能的影响 [J]．亚太传统医药， 2017 ， 13 ( 24 )： 146 - 148 .

赵欣，周宁．补中益气汤加减治疗慢性萎缩性胃炎临床观察 [J]．实用中医药杂志， 2019 ， 35 ( 1 )： 28 - 29 .

王翠，马燕．补中益气汤治疗癌性发热疗效观察 [J]．临床医药文献电子杂志， 2019 ， 6 ( 5 )： 155 .

葛婷，周建伟，潘龙赐，等．补中益气汤治疗气虚发热型肿瘤性发热的临床疗效评价研究 [J]．浙江临床医学， 2018 ， 20 ( 4 )： 650 - 652 .

G Tiegs ， J Hentschel ， A Wendel ． A T cell-dependent experimental liver injury in mice inducible by concanavalin A [J]． J Clin Invest ， 1992 ， 90 ( 1 )： 196 - 203 .

周忠豪，郑伟强．肝衰竭预后评估模型的研究进展 [J]．海南医学， 2019 ， 30 ( 2 )： 245 - 251 .

张嘉宁．多谱学联合分析在干细胞救治暴发性肝衰竭中的应用 [D]．杭州：浙江大学， 2018 .

E Billerbeck ， R Wolfisberg ， U Fahnøe ， et al . Mouse models of acute and chronic hepacivirus infection [J]． Science ， 2017 ， 357 ( 6347 )： 204 - 208 .

M Maes ， M Vinken ， H Jaeschke . Experimental models of hepatotoxicity related to acute liver failure [J]. Toxicol Appl Pharmacol ， 2016 ， 290 ： 86 - 97 .

申弘，聂红明，叶青艳，等．免疫性肝损伤动物模型研究进展 [J]．肝脏， 2014 ， 19 ( 10 )： 790 - 792，796 .

凌银婵，刘海燕，黄巨恩，等．急性肝损伤实验动物模型的研究进展 [J]．解剖学杂志， 2012 ， 35 ( 3 )： 389 - 391 .

Z WU ， M HAN ， T CHEN . Acute liver failure: mechanisms of immune-mediated liver injury [J]. Liver International ， 2010 ， 30 ( 6 ) 782 - 794 .

B McDonald ， P Kubes . Innate immune cell trafficking and function during sterile inflammation of the liver [J]. Gastroenterology ， 2016 ， 151 ( 6 )： 1087 - 1095 .

C S Bonder ， M N Ajuebor ， L D Zbytnuik ， et al . Essential role for neutrophil recruitment to the liver in concanavalin induced hepatitis [J]. J Immunol ， 2004 ， 172 ( 1 )： 45 - 53 .

Y BI ， J LI ， Y YANG ， et al . Human liver stem cells attenuate concanavalin A-induced acute liver injury by modulating myeloid-derived suppressor cells and CD4 ＋ T cells in mice [J]. Stem Cell Res Ther ， 2019 ， 10 ( 1 )： 22 .

A K Horst ， C Wegscheid ， C Schaefers ， et al . Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1 controls IL-2-dependent regulatory T-cell induction in immune-mediated hepatitis in mice [J]. Hepatology ， 2018 ， 68 ( 1 )： 200 - 214 .

X ZHAO ， S DING ， C GENG ， et al . Anti-CD200 attenuates concanavalin A induced hepatitis via modulating the imbalance of CD4 ＋ T lymphocyte differentiation in mice [J]. Am J Transl Res ， 2018 ， 10 ( 12 )： 4202 - 4209 .

X ZHANG ， Q QUAN ， Z SUN ， et al . Protective effects of cyclosporine A on T-cell dependent ConA-induced liver injury in Kunming mice [J]. World J Gastroenterol ， 2001 ， 7 ( 4 )： 569 - 571 .

M Y CHOU ， L T HUANG ， Y L TIAN ， et al . Age-dependent effects of prenatal dexamethasone exposure on immune responses in male rats [J]. Tohoku J Exp Med ， 2017 ， 241 ( 3 )： 225 - 237 .

陈智，朱海红，杨英．细胞因子风暴与肝衰竭 [J]．临床肝胆病杂志， 2014 ， 30 ( 10 )： 981 - 983 .

X X DU ， Y SHI ， Y YANG ， et al . DAMP molecular IL-33 augments monocytic inflammatory storm in hepatitis B-precipitated acute-on-chronic liver failure [J]. Liver Int ， 2018 ， 38 ( 2 )： 229 - 238 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

补中益气汤通过PINK1途径调控骨骼肌线粒体稳态抗运动性疲劳

基于Nrf2/ROS通路探讨补中益气汤调控内质网应激改善非小细胞肺癌的顺铂耐药性

补中益气汤通过调控PCBP1诱导铁死亡改善非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制

补中益气汤通过Nrf2/ROS/PERK/CHOP信号通路调控内质网应激改善NSCLC顺铂耐药的分子机制

补中益气汤通过miR-155/Ndfip1/Pten轴调控Th17细胞改善自身免疫性甲状腺炎的作用机制