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1.合肥市第二人民医院,合肥 230011
2.安徽医科大学 第一附属医院,合肥 230022
[第一作者] 赵营莉,硕士,药师,从事中药药理和肿瘤基础研究,Tel:0551-62965321,E-mail:2433895340@qq.com
*夏泉,博士,主任药师,硕士生导师,从事天然药物活性成分的筛选研究,Tel:0551-62922154,E-mail:xiaquan2010@163.com
收稿日期:2019-07-12,
网络出版日期:2019-11-27,
纸质出版日期:2020-03-05
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赵营莉, 李娟, 方兴, 等. 蒙古黄芪和膜荚黄芪水溶性蛋白表达[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(5):137-144.
Ying-li ZHAO, Juan LI, Xing FANG, et al. Ater-soluble Protein Profiles of
赵营莉, 李娟, 方兴, 等. 蒙古黄芪和膜荚黄芪水溶性蛋白表达[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(5):137-144. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200512.
Ying-li ZHAO, Juan LI, Xing FANG, et al. Ater-soluble Protein Profiles of
目的:
2
蒙古黄芪和膜荚黄芪都为药用黄芪,二者亲缘关系近,成分相似,药用价值尚未区分。该研究旨在建立蒙古黄芪和膜荚黄芪的水溶性蛋白表达谱,了解两种黄芪之间存在的差别。
方法:
2
样品采用水超声提取和丙酮沉淀的方法得到黄芪水溶性蛋白成分,质谱级胰酶酶解后的肽段经nano ESI-LC-MS/MS分析,采用Proteome Discoverer 1.4软件比对豆科蛋白数据库鉴定蛋白,再使用非标记定量软件SIEVE分析蒙古黄芪与膜荚黄芪水溶性蛋白质表达的差异。最后运用生物信息学方法分析2种黄芪共有蛋白的分类、分子功能、参与的生物过程和信号通路。
结果:
2
蒙古黄芪鉴定特异性蛋白有920个,膜荚黄芪鉴定的特异性蛋白有717个,2种黄芪中共同表达的蛋白有472个,其中二者的差异表达蛋白有21个,如PR-10蛋白,NDK-1蛋白,谷蛋白A
2
,磷脂酶D等蛋白在两种黄芪中差异表达。蒙古黄芪高表达蛋白14个,膜荚黄芪高表达蛋白7个。
结论:
2
蒙古黄芪和膜荚黄芪的水溶性蛋白表达谱存在显著差异,特异性蛋白、差异表达蛋白和共同表达的蛋白可为今后两种黄芪的鉴别、药理作用机制的研究和寻找作用靶点提供参考。
Objective:
2
Astragalus membranaceus
var.
mongholicus
and
A
.
membranaceus
are medicinal
Astragalus
which are closely related and similar in composition
but with unclear medicinal value. Water-soluble protein profiles for
A
.
membranaceus
var.
mongholicus
and
A
.
membranaceus
were established to explore the differences between the two kinds of Astragalus Radix.
Method:
2
The water-soluble protein components were obtained through water ultrasonic extraction and acetone precipitation. After digested with trypsin
the obtained peptides were analyzed by nano ESI-LC-MS/MS method. Proteome Discovery 1.4 software was used to identify the proteins by comparing with the legume protein database
and the different expression water-soluble proteins were analyzed by the label-free quantitative software SIEVE. Finally
relevant information for common expression proteins
including classification
molecular function
involved biological process and signaling pathway
were analyzed by bioinformatics.
Result:
2
There were 920 and 717 specific proteins identified for
A
.
membranaceus
var.
mongholicus
and
A
.
membranaceus
respectively. Totally 472 proteins were found to be co-expressed
in which 21 were differentially expressed
such as PR-10 protein
NDK-1 protein
glutelin A
2
and phospholipase D. There were 14 highly expressed proteins in
A
.
membranaceus
var.
mongholicus
and 7 highly expressed proteins in
A
.
membranaceus
.
Conclusion:
2
There are significant differences in water-soluble protein profiles for two kinds of Astragalus Radix. Specific proteins
differentially expressed proteins and common expressed proteins can provide references for the identification of
A
.
membranaceus
var.
mongholicus
and
A
.
membranaceus
. It also can be used to define pharmacological mechanisms and search for drug action targets.
国家药典委员会 . 中华人民共和国药典:一部 [M]. 北京 : 中国医药科技出版社 , 2015 : 300 - 303 .
吴娇 , 王聪 . 黄芪的化学成分及药理作用研究进展 [J]. 新乡医学院学报 , 2018 , 35 ( 9 ): 755 - 760 .
田华 , 邓雁如 , 周坤 , 等 . 蒙古黄芪的化学成分研究 [J]. 中国实验方剂学杂志 , 2016 , 22 ( 7 ): 70 - 73 .
曹庆伟 , 张瑞 , 李科 , 等 . 蒙古黄芪质量评价及商品规格等级研究进展 [J]. 山西医科大学学报 , 2019 , 50 ( 6 ): 854 - 859 .
牛倩芸 , 万燕晴 , 李震宇 , 等 . 不同商品等级黄芪质量评价研究 [J]. 中药材 , 2015 , 38 ( 6 ): 1186 - 1190 .
牟佳佳 , 陈芳 , 陈党辉 , 等 . 黄芪中5种黄酮类成分的含量测定及其指纹图谱研究 [J]. 药物评价研究 , 2019 , 42 ( 5 ): 900 - 906 .
王迪 , 刘磊 , 李科 , 等 . 基于内切-1,3- β -葡聚糖酶水解的黄芪糖指纹图谱的建立及不同种质资源黄芪鉴别 [J]. 中草药 , 2018 , 49 ( 10 ): 2320 - 2327 .
李爱平 , 陈佳佳 , 李震宇 , 等 . 基于核磁指纹图谱黄芪药材均一性评价研究 [J]. 中药材 , 2017 , 40 ( 9 ): 2107 - 2111 .
宋成英 , 封加福 . HPLC同时测定黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷 [J]. 中国实验方剂学杂志 , 2013 , 19 ( 11 ): 115 - 117 .
秦雪梅 , 李震宇 , 孙海峰 , 等 . 我国黄芪药材资源现状与分析 [J]. 中国中药杂志 , 2013 , 38 ( 19 ): 3234 - 3238 .
李锐 , 付铁军 , 及元乔 , 等 . 膜荚黄芪与蒙古黄芪化学成分的高效液相色谱-质谱研究 [J]. 分析化学 , 2005 , 33 ( 12 ): 1676 - 1680 .
刘杨 , 包华音 , 刘德丽 , 等 . 黄芪蛋白提取方法的比较 [J]. 中国实验方剂学杂志 , 2015 , 21 ( 20 ): 76 - 78 .
朱宇伟 , 于庆云 , 刘培 , 等 . 蛋白质组学在中医药科学研究中的应用进展 [J]. 中国现代中药 , 2016 , 18 ( 5 ): 661 - 665 .
范芳芳 , 赵可惠 , 王天虹 , 等 . 蛋白质组学在我国传统医药研究领域应用的文献计量学分析 [J]. 中华中医药学刊 , 2018 , 36 ( 4 ): 876 - 879 .
C JIANG , Z CHENG , C ZHANG , et al . Proteomic analysis of seed storage proteins in wild rice species of the Oryza genus [J]. Proteome Sci , 2014 , 12 ( 1 ): 51 .
W ZHU , X XU , J TIAN , et al . Proteomic analysis of Lonicera japonica Thunb. immature flower buds using combinatorial peptide ligand libraries and polyethylene glycol fractionation [J]. J Proteome Res , 2016 , 15 ( 1 ): 166 - 181 .
谢腾 , 王升 , 马炯 , 等 . 生物信息学在中药资源研究中的应用 [J]. 中国中药杂志 , 2012 , 37 ( 24 ): 3684 - 3690 .
江蔚新 , 葛坤如 , 薛宝玉 . 不同种类黄芪根中有效成分的比较 [J]. 哈尔滨商业大学学报:自然科学版 , 2004 , 20 ( 4 ): 387 - 389 .
Y LI , S GUO , Y ZHU , et al . Comparative analysis of twenty-five compounds in different parts of Astragalus membranaceus var. mongholicus and Astragalus membranaceus by UPLC-MS/MS [J]. J Pharm Anal , 2019 , doi: 10.1016/j.jpha.2019.06.002 http://dx.doi.org/10.1016/j.jpha.2019.06.002 .
陈颖 , 孙海燕 , 曹银萍 . 三萜皂苷生物合成途径研究进展 [J]. 中国野生植物资源 , 2019 , 30 ( 6 ): 15 - 17 .
C MUÑOZ , T HOFFMANN , N M ESCOBAR , et al . The strawberry fruit Fra a allergen functions in flavonoid biosynthesis [J]. Mol Plant , 2012 , 31 ( 1 ): 113 - 124 .
康亚兰 , 裴瑾 , 蔡文龙 , 等 . 药用植物黄酮类化合物代谢合成途径及相关功能基因的研究进展 [J]. 中草药 , 2014 , 45 ( 9 ): 1336 - 1341 .
张丹凤 . 蒙古黄芪异黄酮合成酶基因的克隆及序列分析 [D]. 福州 : 福建农林大学 , 2004 .
朱馨妮 , 汪珊珊 , 周佳琴 , 等 . 植物核苷二磷酸激酶研究进展 [J]. 生物技术通报 , 2017 , 33 ( 11 ): 19 - 28 .
G T BECKHAM , J STÅHLBERG , B C KNOTT , et al . Towards a molecular-level theory of carbohydrate processivity in glycoside hydrolases [J]. Curr Opin Biotechnol , 2014 , 27 : 96 - 106 .
曹建军 , 王长如 , 梁宗锁 , 等 . 不同黄芪品种根中多糖的动态积累及多糖含量比较研究 [J]. 西北植物学报 , 2006 , 26 ( 6 ): 1263 - 1266 .
Y CHEN , L Q QU , X JIA . Expression pattern of UidA gene under the control of rice glutelin GluA-2 gene upstream sequence in transgenic rice endosperm [J]. Acta Genetica Sinica , 2004 , 31 ( 3 ): 281 - 286 .
J LI , X WANG . Phospholipase D and phosphatidic acid in plant immunity [J]. Plant Sci , 2019 , 279 : 45 - 50 .
M WILLIAMS , V VALAYANNOPOULOS , R ALTASSAN , et al . Clinical,biochemical,and molecular overview of transaldolase deficiency and evaluation of the endocrine function: Update of 34 patients [J]. J Inherit Metab Dis , 2019 , 42 ( 1 ): 147 - 158 .
朱馨妮 , 汪珊珊 , 周佳琴 , 等 . 植物核苷二磷酸激酶研究进展 [J]. 生物技术通报 , 2017 , 33 ( 11 ): 19 - 28 .
廖素环 , 施李鸣 , 温荣辉 , 等 . S -腺苷高半胱氨酸水解酶在甲基循环中的代谢调节 [J]. 动物医学进展 , 2011 , 32 ( 6 ): 115 - 118 .
Y WANG , K BOUWMEESTER , P BESEH , et al . Phenotypic analyses of Arabidopsis T-DNA insertion lines and expression profiling reveal that multiple L -type lectin receptor kinases are involved in plant immunity [J]. Mol Plant Microbe Interact , 2014 , 27 ( 12 ): 1390 - 1402 .
梁颖 , 李玉花 . 植物中磷酸甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)在氧化胁迫下的生理功能 [J]. 植物生理学通讯 , 2009 , 45 ( 10 ): 1027 - 1032 .
汪娟 . 黄芪的药理作用研究进展 [J]. 医疗装备 , 2018 , 31 ( 14 ): 202 - 203 .
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