UPLC同时测定4种酶定向炮制黄芪中的6种黄酮类成分含量

刘蓬蓬; 史辑; 张凡; 单国顺; 贾天柱

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20200654

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UPLC同时测定4种酶定向炮制黄芪中的6种黄酮类成分含量

药学基础 | 更新时间：2021-02-09

- UPLC同时测定4种酶定向炮制黄芪中的6种黄酮类成分含量
- Simultaneous Determination of Six Flavonoids in Astragali Radix Directional Processed with Four Enzymes by UPLC
- 中国实验方剂学杂志 2020年26卷第10期页码：94-99
- 作者机构：
  
  辽宁中医药大学　药学院，国家中医药管理局中药炮制原理解析重点实验室，辽宁省中药炮制工程技术研究中心，辽宁大连　 116600
- 作者简介：
  
  [第一作者]　刘蓬蓬，博士，讲师，从事中药炮制研究，Tel：0411-85890154，E-mail：liupengpeng0411@163.com
  *贾天柱，教授，从事中药炮制研究，Tel：0411-85890135，E-mail：tianzhujia0411@163.com
- 基金信息：
  
  国家中医药管理局中药炮制技术传承基地建设项目(2015132)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20200654
  中图分类号： R22; R943.1; R28; TQ92; O657.7
- 收稿日期：2019-09-12，
  
  网络出版日期：2019-11-29，
  
  纸质出版日期：2020-05-20
- 稿件说明：
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刘蓬蓬, 史辑, 张凡, 等. UPLC同时测定4种酶定向炮制黄芪中的6种黄酮类成分含量[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(10):94-99.

Peng-peng LIU, Ji SHI, Fan ZHANG, et al. Simultaneous Determination of Six Flavonoids in Astragali Radix Directional Processed with Four Enzymes by UPLC[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2020, 26(10): 94-99.
刘蓬蓬, 史辑, 张凡, 等. UPLC同时测定4种酶定向炮制黄芪中的6种黄酮类成分含量[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(10):94-99. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20200654.

Peng-peng LIU, Ji SHI, Fan ZHANG, et al. Simultaneous Determination of Six Flavonoids in Astragali Radix Directional Processed with Four Enzymes by UPLC[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2020, 26(10): 94-99. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20200654.

摘要

目的：

建立黄芪中6种黄酮类成分的含量测定方法，研究4种酶(复合酶、植物纤维素酶、蜗牛酶及

-葡萄糖苷酶)定向炮制对黄芪中黄酮苷类成分及其苷元含量的影响。

方法：

采用ACQUITY UPLC HSS T

色谱柱(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)，流动相0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液梯度洗脱，检测波长260 nm，流速0.3 mL·min

-1

，柱温30 ℃，进样量2 μL。

结果：

6种成分毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、黄芪紫檀烷苷、美迪紫檀素的分离度良好，在各自线性范围内线性关系良好(

≥0.998 5)，精密度、稳定性、重复性试验的RSD均

5.0%；平均加样回收率97.62%～101.13%，RSD 1.4%～2.7%。在0.5 g·L

-1

酶溶液水平，毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、黄芪紫檀烷苷、美迪紫檀素在复合酶制黄芪中的质量分数分别为0.082 0，0.335 9，0.055 9，0.104 9，0.015 0，0.009 7 mg·g

-1

，在纤维素酶制黄芪中的质量分数分别为0.105 7，0.364 2，0.070 2，0.117 4，0.020 8，0.012 5 mg·g

-1

，在蜗牛酶制黄芪中的质量分数分别为0.031 4，0.510 0，0.043 5，0.210 9，0.013 0，0.013 0 mg·g

-1

，在

-葡萄糖苷酶制黄芪中的质量分数分别为0.085 3，0.312 4，0.061 5，0.110 8，0.005 8，0.009 6 mg·g

-1

。

结论：

黄芪经4种酶炮制后，除黄芪紫檀烷苷外，毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷的含量均降低，但这3种黄酮苷类成分所对应苷元的含量均显著增加。该方法操作简便、准确、重复性好，适用于黄芪中6种黄酮类成分的含量测定，可为黄芪的酶定向炮制研究提供参考。

Abstract

Objective:

To establish an UPLC method for the simultaneous determination of 6 flavonoids

and to research for the effect of Astragali Radix directional processed with four enzymes (complex enzyme

plant cellulase

snail enzyme

and

-glucosidase) on the contents of flavonoid glycosides and their aglycones in this herb.

Method:

Chromatographic separation was carried out on ACQUITY UPLC HSS T

column (2.1 mm×100 mm

1.8 μm) with the mobile phase of 0.1 mol·L

-1

formic acid solution-0.1 mol·L

-1

formic acid acetonitrile solution for gradient elution. The detection wavelength was set at 260 nm

the flow rate was 0.3 mL·min

-1

the column temperature was 30 ℃

and the injection volume was 2 μL.

Result:

Calycosin-glucoside

calycosin

ononin

formononetin

10-dimethoxy-pterocarpan-3-

-glucoside and 3-hydroxy-9

10-dimethoxy-pterocarpan showed good linear relationships within their own ranges (

≥0.998 5)

the relative standard deviations (RSDs) of precision

stability and repeatability were all

5.0%

and the average recovery was 97.62%-101.13% with RSDs of 1.4%-2.7%. In 0.5 g·L

-1

level of enzyme solution

the contents of calycosin-glucoside

calycosin

ononin

formononetin

10-dimethoxy-pterocarpan-3-

-glucoside and 3-hydroxy-9

10-dimethoxy-pterocarpan in Astragali Radix processed with complex enzyme were 0.082 0

0.335 9

0.055 9

0.104 9

0.015 0

0.009 7 mg·g

-1

the contents of them in Astragali Radix processed with plant cellulase were 0.105 7

0.364 2

0.070 2

0.117 4

0.020 8

0.012 5 mg·g

-1

their contents in Astragali Radix processed with snail enzyme were 0.031 4

0.510 0

0.043 5

0.210 9

0.013 0

0.013 0 mg·g

-1

and their contents in Astragali Radix processed with

-glucosidase were 0.085 3

0.312 4

0.061 5

0.110 8

0.005 8

0.009 6 mg·g

-1

respectively.

Conclusion:

After the processing of Astragali Radix by four enzymes

in addition to 9

10-dimethoxy-pterocarpan-3-

-glucoside

the contents of calycosin-glucoside and ononin are reduced

but the contents of their three corresponding aglycones are significantly increased. The established method is simple

accurate and reproducible

and is suitable for the simultaneous determination of 6 flavonoids in Astragali Radix

which can provide a reference for this herb directional processed with enzymes.

关键词

Keywords

references

国家药典委员会．中华人民共和国药典：一部 [M]．北京：中国医药科技出版社， 2015 ： 302 - 303 .

蔡金坊，代云桃，肖永庆，等．系统评价蜜炙对黄芪药效物质基础的改变 [J]．中国实验方剂学杂志， 2016 ， 22 ( 8 )： 47 - 52 .

M HATTORI , G KIM , S MOTOIKE , et al . Metabolism of sennosides by intestinal flora [J]． Chem Pharm Bull(Tokyo) ， 1982 ， 30 ( 4 )： 1338 - 1346 .

A I EL-SEDAWY , M HATTORI , K KOBASHI , et al . Metabolism of gentiopicroside (gentiopicrin) by human intestinal bacteria [J]． Chem Pharm Bull(Tokyo) ， 1989 ， 37 ( 9 )： 2435 - 2437 .

彭静，马益华，陈彦，等．固定化蜗牛酶同时生物转化淫羊藿中4种黄酮苷 [J]．中成药， 2016 ， 38 ( 9 )： 1984 - 1990 .

周荧，魏建林，罗胜保，等．固定化 β -葡萄糖苷酶在异黄酮生物转化中的应用 [J]．粮食科技与经济， 2016 ， 41 ( 2 )： 37-40，50 .

高霞，刘聪燕，陈彦，等．酶技术在中药黄酮类成分研究中的应用 [J]．中草药， 2014 ， 45 ( 16 )： 2412 - 2417 .

杨云松，高鹏，代龙．糖苷类化合物体外生物转化的研究进展 [J]．中国生化药物杂志， 2012 ， 33 ( 6 )： 927 - 930 .

欧志敏，杨根生，冯海． β -葡萄糖苷酶水解牛蒡子苷制备牛蒡子苷元 [J]．药物生物技术， 2009 ， 16 ( 5 )： 443 - 446 .

许平平，谭银春，鱼红闪，等．酶转化法提高黄芪甲苷的得率 [J]．大连工业大学学报， 2009 ， 28 ( 1 )： 20 - 22 .

刘欣，崔昱，杨凌．糖苷酶与药物研发 [J]．天然产物研究与开发， 2005 ， 17 ( 2 )： 223 - 228 .

杜国军．恒山黄芪道地药材质量标准研究 [D]．太原：山西大学， 2013 .

芮雯，冯毅凡，姜苗苗，等．黄芪及其蜜炙品的UPLC-Q-TOF-MS分析 [J]．广东药学院学报， 2012 ， 28 ( 1 )： 47 - 50 .

王平，梁逸曾． HPLC-DAD-MS研究黄芪的化学成分 [J]．中草药， 2011 ， 42 ( 2 )： 226 - 229 .

朱立俏，于绍华，张茜，等．基于HPLC-DAD特征图谱分析莱菔子饮片酶解过程中化学成分的变化 [J]．中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 ( 4 )： 140 - 145 .

吴茵，白万军，魏欣．基于UPLC-Q-TOF-MS技术分析木蝴蝶中化学成分 [J]．中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 ( 2 )： 196 - 200 .

刘靖，陈虎彪，杜新刚，等．不同种植方式下恒山黄芪的质量比较研究 [J]．中国中药杂志， 2008 ， 33 ( 5 )： 570 - 573 .

李翔，朱臻宇，柴逸峰，等． HPLC-MS测定黄芪药材中3种成分的含量 [J]．药学学报， 2006 ， 41 ( 8 )： 793 - 796 .

张曦，孙衍国，梁鑫淼，等．中药黄芪中异黄酮苷类化合物的高效液相色谱-串联质谱分析 [J]．精细化工， 2005 ， 22 ( 12 )： 898 - 902 .

林秀莲，宋粉云，潘玄玄，等． UPLC-Q-TOF-MS分析补肾强身片中化学成分 [J]．中国实验方剂学杂志， 2018 ， 24 ( 19 )： 61 - 67 .

贾天柱．中药炮制化学与化学炮制学的提出及研究思路 [J]．世界科学技术—中医药现代化， 2010 ， 12 ( 3 )： 337 - 342 .

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