脑心通调控NLRP3/Caspase-1通路抑制脂多糖诱导的BV2细胞焦亡

王栋; 苏晓慧; 戚明珠; 王艳秋; 孔祥英; 林娜

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20201037

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脑心通调控NLRP3/Caspase-1通路抑制脂多糖诱导的BV2细胞焦亡

药理 | 更新时间：2021-02-09

- 脑心通调控NLRP3/Caspase-1通路抑制脂多糖诱导的BV2细胞焦亡
- Naoxintong Inhibits LPS Induced BV2 Cell Pyroptosis by NLRP3/Caspase-1 Signaling Pathway
- 中国实验方剂学杂志 2020年26卷第10期页码：29-34
- 作者机构：
  
  1.贵州中医药大学，贵阳　 550025
  2.中国中医科学院　中药研究所，北京　 100700
- 作者简介：
  
  [第一作者]　王栋，在读硕士，从事中药药理学研究，E-mail：wangdong9998@163.com
  *孔祥英，博士，研究员，硕士生导师，从事中药药理学研究，E-mail：kongu0051@163.com；
  *林娜，博士，首席研究员，博士生导师，从事药性理论研究，E-mail：linna888@163.com
- 基金信息：
  
  国家“重大新药创制”科技重大专项(2019ZX09731-002);国家自然科学基金面上项目(81673630);北京市自然科学基金面上项目(7162139)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20201037
  中图分类号： R2-0; R289; R285.5
- 收稿日期：2019-12-23，
  
  网络出版日期：2020-02-06，
  
  纸质出版日期：2020-05-20
- 稿件说明：
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王栋, 苏晓慧, 戚明珠, 等. 脑心通调控NLRP3/Caspase-1通路抑制脂多糖诱导的BV2细胞焦亡[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(10):29-34.

Dong WANG, Xiao-hui SU, Ming-zhu QI, et al. Naoxintong Inhibits LPS Induced BV2 Cell Pyroptosis by NLRP3/Caspase-1 Signaling Pathway[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2020, 26(10): 29-34.
王栋, 苏晓慧, 戚明珠, 等. 脑心通调控NLRP3/Caspase-1通路抑制脂多糖诱导的BV2细胞焦亡[J]. 中国实验方剂学杂志, 2020,26(10):29-34. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20201037.

Dong WANG, Xiao-hui SU, Ming-zhu QI, et al. Naoxintong Inhibits LPS Induced BV2 Cell Pyroptosis by NLRP3/Caspase-1 Signaling Pathway[J]. Chinese journal of experimental traditional medical formulae, 2020, 26(10): 29-34. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20201037.

摘要

目的：

探索脑心通醇提物对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞BV2焦亡的影响，并通过NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)通路阐释其可能的作用机制。

方法：

LPS(1 mg·L

-1

)体外诱导BV2细胞的同时，加入不同质量浓度脑心通醇提物(2，10，50 mg·L

-1

)干预后，分别采用MTS法检测细胞活性，实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测白细胞介素-1

(IL-1

)，肿瘤坏死因子-

(TNF-

)和NLRP3的mRNA水平；免疫荧光法检测NLRP3蛋白表达的情况；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3/Caspase-1通路关键蛋白表达。

结果：

与空白组比较，LPS(1 mg·L

-1

)能明显降低BV2细胞活性，显著升高IL-1

，TNF-

及NLRP3 mRNA表达水平(

0.01)，且可提升NLRP3蛋白表达水平以及Caspase-1剪切体和前体蛋白的比值(Caspase-1 p20/Caspase-1)。与LPS组比较，脑心通醇提物(2，10，50 mg·L

-1

)干预后，逆转了LPS导致的细胞活性降低(

0.01)，50 mg·L

-1

脑心通醇提物可显著降低IL-1

，TNF-

及NLRP3 mRNA表达水平(

0.05，

0.01)，显著降低LPS诱导的NLRP3的高表达以及Caspase-1 p20/Caspase-1(

0.01)。

结论：

脑心通能明显抑制LPS诱导的小胶质细胞焦亡，其作用机制与NLRP3/Caspase-1通路密切相关。

Abstract

Objective:

To explore the effect of Naoxintong ethanol extract (NXT) on pyroptosis of BV2 microglia cells induced by lipopolysaccharide (LPS)

and to explain the mechanism of pyroptosis based on NOD like receptor thermoprotein domain 3 (NLRP3)/cysteine-proteinase-1 (Caspase-1) pathway.

Method:

BV2 cells was treated with different concentrations of NXT(2

50 mg·L

-1

) after induced by LPS(1 mg·L

-1

)

in vitro

. Real-time PCR was used to detect mRNA expression of pro-inflammatory cytokine such as interleukin 1 beta (IL-1

)

tumor necrosis factor (TNF)-

and NLRP3.Western bolt and immunofluorescence were used to observe the protein expression of NLRP3/Caspase-1 signaling pathway.

Result:

Compared with control group

after LPS(1 mg·L

-1

) stimulation

BV2 cells viability was decreased. The mRNA expression levels of IL-1

TNF-

and NLRP3 were significantly elevated(

0.01)

the protein levels of NLRP3 and Caspase-1 p20/Caspase-1 were also increased. After given NXT(2

50 mg·L

-1

)

BV2 cells viability reversed which induced by LPS. Compared with LPS group

the mRNA expression of IL-1

TNF-

and NLRP3 reduced obviously with given 50 mg·L

-1

NXT (

0.05

0.01)

significantly inhibited NLRP3 high protein expression and Caspase-1 p20/Caspase-1 expression(

0.01).

Conclusion:

NXT can inhibit LPS induced pyroptosis of BV2 cells and the mechanism may closely related to NLRP3/Caspase-1 signaling pathway.

关键词

Keywords

references

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