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1.广州中医药大学 中药学院,广州 510006
2.广东药科大学 中药学院 广东省中药饮片规范化炮制工程技术研究中心,广州 510006
王武静,在读硕士,E-mail:1737471344@qq.com
李盛青,教授,硕士生导师,从事中药学及中药药理研究工作,E-mail:020330@gzucm.edu.cn
舒尊鹏,副教授,硕士生导师,从事中药及复方药效物质基础及作用机制研究,Tel:020-39353119,E-mail:shuzunpeng2010@163.com
网络出版日期:2020-07-08,
纸质出版日期:2020-08-20
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王武静,杨燕妮,丁子禾等.枳壳均一多糖CALB-2结构表征及生物活性[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(16):154-160.
WANG Wu-jing,YANG Yan-ni,DING Zi-he,et al.Structures Characteristics and Bioactivity of Polysaccharide CALB-2 from Aurantii Fructus[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(16):154-160.
王武静,杨燕妮,丁子禾等.枳壳均一多糖CALB-2结构表征及生物活性[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(16):154-160. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20201714.
WANG Wu-jing,YANG Yan-ni,DING Zi-he,et al.Structures Characteristics and Bioactivity of Polysaccharide CALB-2 from Aurantii Fructus[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(16):154-160. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20201714.
目的
2
从枳壳中分离纯化枳壳均一多糖CALB-2,并对其进行结构分析、形态表征及生物活性的研究。
方法
2
采用热水提取法从中药枳壳中提取枳壳粗多糖(CALB),经阴阳离子交换树脂、离子交换琼脂糖凝胶以及丙烯葡聚糖凝胶等分离纯化技术得到枳壳均一多糖CALB-2;利用高效液相色谱法(HPLC)测定CALB-2的相对分子质量,采用甲基化分析和Smith降解对CALB-2进行单糖组成分析,通过红外光谱扫描(IR)分析和电镜扫描技术(SEM)对CALB-2进行结构分析及形态表征,并通过H
2
O
2
诱导心肌细胞氧化损伤模型对CALB-2抗氧化活性进行研究。
结果
2
经HPLC测定CALB-2为均一多糖,其相对分子质量为3.57×10
7
Da。综合运用IR光谱分析、甲基化分析和Smith降解得到CALB-2为多支结构的酸性多糖,且主要以1→3,4键型存在。分子形态考察结果显示CALB-2为非晶态固体。体外活性结果表明CALB-2可明显减缓H
2
O
2
所致心肌细胞的氧化损伤作用。
结论
2
枳壳多糖CALB-2为多支结构的均一酸性多糖,且具有一定抗心肌细胞氧化损伤的作用,以上发现为枳壳多糖进一步地深入研究奠定了理论基础。
Objective
2
To isolate and purify a polysaccharide CALB-2 fraction from Aurantii Fructus,and analyze its basic chemical structure
morphological characteristics and bioactivity.
Method
2
A refined CALB-2 was obtained from Aurantii Fructus by hot water extraction,then separated and purified by ion exchange resin,ion exchange agarose gel and propylene dextran gel to obtain homogeneous polysaccharide CALB-2. The molecular mass of CALB-2 was determined by high performance liquid chromatography (HPLC). Monosaccharide composition analysis of CALB-2 was conducted by methylation analysis and Smith degradation. Structural analysis and morphological characterization were conducted by infrared scanning (IR) and scanning electron microscopy (SEM) analysis. Antioxidant activity of CALB-2 was studied by using H
2
O
2
-induced cardiomyocyte oxidative damage model.
Result
2
CALB-2 was a homogeneous polysaccharide and the molecular weight of CALB-2 was estimated to be 3.57×10
7
Da,which was proved to be a kind of highly branched acidic polysaccharides in IR analysis
methylation analysis and Smith degradation
mainly present in form of 1→3,4 bonds. Through SEM observations,we indicated that the molecular morphology of CALB-2 was amorphous solid. The
in vitro
activity test showed that CALB-2 had obvious protective effects on injury of H9c2 myocardial cells induced by H
2
O
2
.
Conclusion
2
CALB-2 is a kind of homogeneous polysaccharide extracted from Aurantii Fructus, with an anti-cardiomyocyte oxidative damage effect
laying a theoretical foundation for further study of Aurantii Fructus polysaccharides.
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